摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 绪论 | 第10-19页 |
1.1 L-乳酸 | 第10-11页 |
1.2 L-乳酸的制取 | 第11-14页 |
1.3 凝结芽孢杆菌 | 第14页 |
1.4 同步糖化 | 第14-15页 |
1.5 蛋白质组学 | 第15-16页 |
1.6 ITRAQ | 第16-18页 |
1.7 本文的研究意义与内容 | 第18-19页 |
1.7.1 研究意义 | 第18页 |
1.7.2 研究内容 | 第18-19页 |
第二章 BCS 13002 的鉴定及其生长发酵特性研究 | 第19-30页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第19-21页 |
2.2.1 实验菌株 | 第19页 |
2.2.2 主要仪器 | 第19-20页 |
2.2.3 主要试剂 | 第20页 |
2.2.4 培养基和溶液 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-23页 |
2.3.1 菌株BCS 13002 的鉴定 | 第21页 |
2.3.2 菌株BCS 13002 生长曲线的测定 | 第21页 |
2.3.3 HPLC法测定乳酸、乙酸含量 | 第21-22页 |
2.3.4 手性柱HPLC法测定两种乳酸手性异构体含量 | 第22页 |
2.3.5 DNS法和HPLC法测定葡萄糖含量 | 第22页 |
2.3.6 玉米淀粉完全水解液的制备 | 第22-23页 |
2.4 结果与分析 | 第23-28页 |
2.4.1 菌株BCS 13002 的 16S rDNA测序 | 第23页 |
2.4.2 系统进化分析 | 第23-24页 |
2.4.3 菌株BCS 13002 的生理生化鉴定 | 第24页 |
2.4.4 菌株BCS 13002 的显微镜镜检 | 第24-25页 |
2.4.5 菌株BCS 13002 的生长曲线 | 第25页 |
2.4.6 L-乳酸标准曲线的绘制 | 第25-26页 |
2.4.7 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第26-27页 |
2.4.8 菌株BCS 13002 发酵生产L-乳酸的能力 | 第27-28页 |
2.4.9 菌株BCS 13002 利用玉米淀粉水解物生产L-乳酸 | 第28页 |
2.5 本章小结 | 第28-30页 |
第三章 BSC 13002 的优化培养与同步糖化发酵生产L-乳酸 | 第30-42页 |
3.1 引言 | 第30页 |
3.2 材料与仪器 | 第30-31页 |
3.2.1 试剂与耗材 | 第30页 |
3.2.2 主要仪器 | 第30页 |
3.2.3 常用溶液及培养基 | 第30-31页 |
3.3 实验方法 | 第31-33页 |
3.3.1 五种氮源对BCS 13002 发酵生产L-乳酸的影响 | 第31页 |
3.3.2 三种碳源对BCS 13002 发酵生产L-乳酸的影响 | 第31页 |
3.3.3 三种中和剂对BCS 13002 发酵生产L-乳酸的影响 | 第31页 |
3.3.4 用响应面法优化BCS 13002 发酵生产L-乳酸的培养基 | 第31-32页 |
3.3.5 BCS 13002 在 5 L发酵罐中的分批补料发酵生产L-乳酸 | 第32页 |
3.3.6 玉米淀粉五种预处理方式对BCS 13002 发酵生产L-乳酸的影响 | 第32-33页 |
3.3.7 以玉米淀粉为原料的同步糖化发酵生产L-乳酸 | 第33页 |
3.3.8 糖酸转化率与L-乳酸产率的计算 | 第33页 |
3.4 结果与分析 | 第33-41页 |
3.4.1 五种氮源对BCS 13002 发酵生产L-乳酸的影响 | 第33-34页 |
3.4.2 三种碳源对BCS 13002 发酵生产L-乳酸的影响 | 第34-35页 |
3.4.3 三种中和剂对BCS13002发酵生产L-乳酸的影响规律 | 第35-36页 |
3.4.4 用响应面法优化BCS13002发酵生产L-乳酸的培养基 | 第36-38页 |
3.4.5 BCS 13002 在 5 L发酵罐中的分批补料发酵生产L-乳酸的规律 | 第38-39页 |
3.4.6 五种原料预处理方式对BCS 13002 发酵生产L-乳酸的影响规律 | 第39-40页 |
3.4.7 以玉米淀粉为原料同步糖化发酵生产L-乳酸 | 第40-41页 |
3.5 本章小结 | 第41-42页 |
第四章 BCS 13002 相关代谢的蛋白组学研究 | 第42-74页 |
4.1 引言 | 第42页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第42-43页 |
4.2.1 菌株 | 第42页 |
4.2.2 主要仪器 | 第42页 |
4.2.3 主要试剂 | 第42-43页 |
4.2.4 培养基和常用溶液 | 第43页 |
4.3 实验方法 | 第43-48页 |
4.3.1 BCS 13002 发酵生产L-乳酸的样品制备 | 第43-44页 |
4.3.2 样品中蛋白的提取 | 第44页 |
4.3.3 样品蛋白浓度检测与SDS-PAGE电泳分析 | 第44-45页 |
4.3.4 还原烷基化和酶解 | 第45页 |
4.3.5 对样品进行iTRAQ标记 | 第45页 |
4.3.6 高pH RPLC第一维分离 | 第45页 |
4.3.7 液相-质谱第二维分析 | 第45-46页 |
4.3.8 质谱结果的生物学信息学分析 | 第46-47页 |
4.3.9 GO功能注释 | 第47页 |
4.3.10 KEGG通路注释 | 第47-48页 |
4.3.11 COG通路注释 | 第48页 |
4.3.12 样本间差异蛋白的定义 | 第48页 |
4.3.13 差异蛋白GO功能显著性富集分析 | 第48页 |
4.3.14 差异蛋白KEGG显著性富集分析 | 第48页 |
4.4 结果与分析 | 第48-73页 |
4.4.1 BCS 13002 使用四种碳源发酵的效果 | 第48-50页 |
4.4.2 样品蛋白质质量的判定 | 第50-51页 |
4.4.3 蛋白组学数据的质控 | 第51-53页 |
4.4.4 蛋白组学的全谱分析 | 第53-57页 |
4.4.5 差异表达蛋白分析 | 第57-73页 |
4.5 本章小结 | 第73-74页 |
结论与展望 | 第74-76页 |
一、结论 | 第74-75页 |
二、创新 | 第75页 |
三、展望 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第88-89页 |
致谢 | 第89页 |