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氧化葡萄糖酸杆菌中吡咯喹啉醌转运与代谢过程的系统生物学研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第7-14页
    1.1 氧化葡萄糖杆菌的研究进展第7-8页
        1.1.1 氧化葡萄糖酸杆菌概述第7页
        1.1.2 氧化葡萄糖酸杆菌的应用第7-8页
    1.2 吡咯喹啉醌的研究进展第8-9页
        1.2.1 PQQ性质与用途第8页
        1.2.2 PQQ合成与转运途径第8-9页
    1.3 系统生物学的研究进展第9-12页
        1.3.1 系统生物学简介第9页
        1.3.2 转录组学简介第9-10页
        1.3.3 蛋白质组学简介第10-11页
        1.3.4 系统生物学在氧化葡萄糖酸杆菌研究中的应用第11-12页
    1.4 立题依据和研究意义第12页
    1.5 主要研究内容第12-14页
第二章 材料与方法第14-22页
    2.1 实验材料第14-15页
        2.1.1 菌种和质粒第14页
        2.1.2 培养基第14页
        2.1.3 实验所用主要试剂第14-15页
        2.1.4 实验所用主要仪器第15页
    2.2 转录组学实验方法第15-16页
        2.2.1 细胞培养及总RNA提取第15-16页
        2.2.2 c DNA文库的构建及Miseq上机测序第16页
        2.2.3 RNA-Seq数据处理与分析第16页
    2.3 蛋白质组学实验方法第16-19页
        2.3.1 细胞培养第16-17页
        2.3.2 细胞全蛋白提取第17页
        2.3.3 细胞膜蛋白提取第17-18页
        2.3.4 双向电泳第18页
        2.3.5 荧光双向电泳第18-19页
        2.3.6 质谱鉴定第19页
        2.3.7 生物信息学分析第19页
    2.4 分子生物学实验方法第19-22页
        2.4.1 q PCR验证第19-20页
        2.4.2 基因过表达实验方法第20-21页
        2.4.3 PQQ检测方法第21页
        2.4.4 不同PQQ浓度下测定G. oxydans生长曲线第21-22页
第三章 结果与讨论第22-38页
    3.1 G. oxydans双向电泳全蛋白与膜蛋白提取方法比较第22-24页
        3.1.1 G. oxydans总蛋白 2-DE图谱的建立第22页
        3.1.2 G. oxydans膜蛋白 2-DE图谱的建立第22-24页
        3.1.3 重复性验证第24页
    3.2 对照菌株与pqq B过表达重组菌株的比较组学分析第24-32页
        3.2.1 对照菌株与pqq B过表达重组菌株的比较转录组学结果第25-26页
        3.2.2 对照菌株与pqq B过表达重组菌株的比较蛋白组学研究结果第26-27页
        3.2.3 对照菌株与pqq B过表达重组菌株的差异表达聚类分析第27-30页
        3.2.4 关键差异表达基因和蛋白q PCR验证第30-32页
    3.3 外源PQQ刺激下G. oxydans的差异表达组学分析第32-38页
        3.3.1 不同PQQ浓度压力下G. oxydans生长情况第32-33页
        3.3.2 不同PQQ浓度刺激下氧化葡萄糖酸杆菌胞内外的影响第33页
        3.3.3 不同PQQ浓度刺激下G. oxydans的转录组学分析第33-35页
        3.3.4 不同PQQ浓度刺激下G. oxydans的蛋白质组学分析第35页
        3.3.5 不同PQQ浓度刺激下G. oxydans的差异表达聚类分析第35-37页
        3.3.6 关键差异表达基因和蛋白q PCR验证第37-38页
主要结论与展望第38-40页
    主要结论第38页
    展望第38-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-45页
附录第45-61页
    附录I:作者攻读专业学位硕士学位期间发表的论文第45-46页
    附录II:转录组学鉴定的对照菌与pqq B过表达菌株间的差异表达基因第46-50页
    附录III:蛋白组学鉴定的对照菌与pqq B过表达菌株间的差异表达蛋白第50-55页
    附录V:转录组学鉴定的不同PQQ浓度刺激下G. oxydans的差异表达基因第55-59页
    附录VI:转录组学鉴定的不同PQQ浓度刺激下G. oxydans的差异表达蛋白第59-61页

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