| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| abstract | 第9页 |
| 第一章 前言 | 第14-25页 |
| 1.1 限制性饮食 | 第14-15页 |
| 1.1.1 限制性饮食的简介 | 第14页 |
| 1.1.2 线虫限制性饮食的益处 | 第14-15页 |
| 1.2 寿命 | 第15-18页 |
| 1.2.1 寿命简介 | 第15-16页 |
| 1.2.2 寿命的调控机制 | 第16-18页 |
| 1.3 自噬 | 第18-22页 |
| 1.3.1 自噬的发生 | 第18-20页 |
| 1.3.2 自噬的调控及其生理作用 | 第20页 |
| 1.3.3 线虫中自噬的生理作用 | 第20-21页 |
| 1.3.4 线虫中研究自噬的优势及方法 | 第21-22页 |
| 1.4 组织蛋白酶及其溶酶体 | 第22-24页 |
| 1.4.1 组织蛋白酶及其溶酶体简介 | 第22-23页 |
| 1.4.2 组织蛋白酶L的功能及作用 | 第23页 |
| 1.4.3 溶酶体相关简介 | 第23-24页 |
| 1.5 秀丽隐杆线虫概述 | 第24页 |
| 1.5.1 秀丽隐杆线虫的简介 | 第24页 |
| 1.6 本课题要解决的问题及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料和方法 | 第25-35页 |
| 2.1 主要试剂 | 第25-27页 |
| 2.2 主要仪器 | 第27页 |
| 2.3 线虫突变体 | 第27-28页 |
| 2.4 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.4.1 线虫遗传杂交实验 | 第28页 |
| 2.4.2 线虫的同步化及培养 | 第28页 |
| 2.4.3 NGM培养基的配制 | 第28-29页 |
| 2.4.4 不同大肠杆菌饮食的培养基配制 | 第29页 |
| 2.4.5 统计进食速率实验 | 第29页 |
| 2.4.6 饮食限制的方法 | 第29-30页 |
| 2.4.7 线虫寿命实验 | 第30-31页 |
| 2.4.8 溶酶体染色及荧光拍照实验 | 第31页 |
| 2.4.9 线虫基因的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4.10 线虫的总RNA提取及逆转录 | 第32-33页 |
| 2.4.11 荧光定量PCR | 第33页 |
| 2.4.12 线虫总蛋白的提取 | 第33-34页 |
| 2.4.13 测蛋白浓度(Bradford法) | 第34页 |
| 2.4.14 蛋白免疫印迹杂交实验(western blot) | 第34页 |
| 2.4.16 数据收集与统计分析 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-54页 |
| 3.1 构建eat-2&Plgg-1gfp::lgg-1和cpl-1&Plgg-1gfp::lgg-1双突变体线虫 | 第35-38页 |
| 3.1.1 运用荧光显微镜筛选双突变体中纯合GFP线虫 | 第35-36页 |
| 3.1.2 eat-2及cpl-1基因的扩增及鉴定 | 第36-37页 |
| 3.1.3 双突变体组织蛋白酶L及咽部收缩速率的改变 | 第37-38页 |
| 3.2 限制性饮食条件下自噬,溶酶体及组织蛋白酶L的改变 | 第38-45页 |
| 3.2.1 限制性饮食诱导自噬基因的表达和自噬蛋白增加 | 第39-41页 |
| 3.2.2 限制性饮食激活溶酶体的增加 | 第41-42页 |
| 3.2.3 在限制性饮食条件下组织蛋白酶L的表达情况 | 第42-45页 |
| 3.3 组织蛋白酶L的缺失抑制溶酶体及其自噬的增加 | 第45-50页 |
| 3.3.1 组织蛋白酶L缺失抑制限制性饮食下溶酶体的增加 | 第45-47页 |
| 3.3.2 组织蛋白酶L缺失抑制自噬 | 第47-50页 |
| 3.4 组织蛋白酶L缺失抑制饮食限制的寿命延长 | 第50-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第66-67页 |
