庆大霉素可视化免疫快速检测方法的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-21页 |
| ·兽药残留的现状 | 第10-11页 |
| ·可视化快速检测方法的发展 | 第11-12页 |
| ·食源性致病微生物的可视化快速检测技术的发展 | 第11页 |
| ·真菌毒素的可视化快速检测技术的发展 | 第11-12页 |
| ·农药残留可视化免疫快速检测技术的发展 | 第12页 |
| ·兽药残留可视化免疫快速检测技术的发展 | 第12页 |
| ·胶体金免疫层析快速检测技术 | 第12-14页 |
| ·胶体金免疫层析检测技术的原理 | 第12-13页 |
| ·胶体金免疫层析检测技术的优势 | 第13页 |
| ·胶体金免疫层析检测技术的发展趋势 | 第13-14页 |
| ·免疫亲和柱快速检测技术 | 第14-15页 |
| ·免疫亲和柱快速检测技术的原理 | 第14-15页 |
| ·免疫亲和柱快速检测技术的应用 | 第15页 |
| ·庆大霉素简介 | 第15-20页 |
| ·理化性质 | 第16页 |
| ·庆大霉素的应用及抗菌机理 | 第16页 |
| ·庆大霉素的体内代谢及毒性 | 第16-17页 |
| ·最大残留限量 | 第17页 |
| ·庆大霉素的检测方法概述 | 第17-20页 |
| ·本课题的研究意义 | 第20页 |
| ·本课题的研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器及材料 | 第22-23页 |
| ·待测样品 | 第23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·抗庆大霉素多克隆抗体的前处理 | 第24-25页 |
| ·抗体的纯化 | 第24-25页 |
| ·抗体蛋白浓度的测定 | 第25页 |
| ·半抗原和蛋白偶联 | 第25页 |
| ·胶体金的制备 | 第25-26页 |
| ·制备前的准备工作 | 第25页 |
| ·柠檬酸三钠还原法制备胶体金 | 第25-26页 |
| ·胶体金质量鉴定 | 第26页 |
| ·胶体金标记抗体蛋白 | 第26-27页 |
| ·抗体蛋白处理 | 第26页 |
| ·胶体金标记抗体最适pH的确定 | 第26页 |
| ·胶体金标记抗体最适蛋白量的确定 | 第26-27页 |
| ·胶体金标记抗体 | 第27页 |
| ·胶体金标记抗体的纯化及鉴定 | 第27页 |
| ·免疫层析试纸条层析条件的优化 | 第27-29页 |
| ·抗原包被量和金标抗体稀释倍数的测定 | 第27页 |
| ·硝酸纤维素膜的选择 | 第27页 |
| ·包被抗原稀释液及标品稀释液的优化 | 第27页 |
| ·封闭液的选择及封闭条件的优化 | 第27-28页 |
| ·金标结合释放垫泡垫的配方优化 | 第28页 |
| ·试纸条的组装及检测方法原理 | 第28-29页 |
| ·免疫层析试纸条检测限的确定 | 第29页 |
| ·试纸条方法特异性的检测 | 第29页 |
| ·与氨基糖苷类药物的交叉反应 | 第29页 |
| ·与其他族兽药的交叉反应 | 第29页 |
| ·重复性实验 | 第29页 |
| ·免疫层析试纸条检测实际样品 | 第29-30页 |
| ·样品的基质影响消除 | 第30页 |
| ·添加回收实验 | 第30页 |
| ·试纸条稳定性实验 | 第30页 |
| ·4℃稳定性实验 | 第30页 |
| ·37℃稳定性实验 | 第30页 |
| ·免疫亲和柱快速检测方法的建立 | 第30-34页 |
| ·免疫亲和凝胶的制备 | 第30-31页 |
| ·检测柱酶标标准品稀释倍数及凝胶层的优化 | 第31页 |
| ·免疫亲和检测柱的制备 | 第31-32页 |
| ·免疫亲和检测柱的检测原理及步骤 | 第32-33页 |
| ·检测柱检测限的确定 | 第33-34页 |
| ·实际样品的检测 | 第34页 |
| ·酶联免疫吸附法验证方法的有效性 | 第34-36页 |
| ·酶联免疫吸附法样品前处理方法 | 第34页 |
| ·酶联免疫吸附法方法步骤 | 第34-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-56页 |
| ·庆大霉素多史隆抗体的纯化及测定 | 第36页 |
| ·胶体金溶液的制备与质量鉴定 | 第36-38页 |
| ·胶体金的制备 | 第36-37页 |
| ·胶体金的质量鉴定 | 第37-38页 |
| ·胶体金标记抗体蛋白 | 第38-40页 |
| ·胶体金标记抗体最适pH的确定 | 第38-39页 |
| ·胶体金标记抗体最适蛋白量的测定 | 第39-40页 |
| ·胶体金标记抗体的质量鉴定 | 第40页 |
| ·免疫层析试纸条层析条件的优化 | 第40-44页 |
| ·抗原包被量和金标抗体稀释倍数的确定 | 第40页 |
| ·硝酸纤维素膜的选择 | 第40-41页 |
| ·包被抗原稀释液及标准品稀释液的确定 | 第41-42页 |
| ·封闭液及封闭条件的确定 | 第42-43页 |
| ·金标结合释放垫泡垫缓冲液的确定 | 第43-44页 |
| ·免疫层析试纸条检测限及检测时间的确定 | 第44页 |
| ·试纸条方法的特异性 | 第44-45页 |
| ·与氨基糖苷类药物的交叉反应 | 第44-45页 |
| ·与其他族兽药的交叉反应 | 第45页 |
| ·重复性实验 | 第45-46页 |
| ·试纸条实际样品的检测 | 第46-49页 |
| ·样品基质影响的消除 | 第46页 |
| ·添加回收实验 | 第46-48页 |
| ·试纸条样品检测限的确定 | 第48-49页 |
| ·试纸条的稳定性实验 | 第49-50页 |
| ·4℃低温保存实验 | 第49页 |
| ·37℃加速实验 | 第49-50页 |
| ·酶联免疫吸附法验证免疫层析试纸条方法的有效性 | 第50-51页 |
| ·免疫亲和快速检测柱方法的建立 | 第51-56页 |
| ·检测柱凝胶层及酶标标准品用量的确定 | 第52页 |
| ·检测柱检测限的确定 | 第52-53页 |
| ·实际样品的检测 | 第53-54页 |
| ·检测柱样品检测限的确定 | 第54页 |
| ·酶联免疫吸附法验证免疫亲和检测柱方法的有效性 | 第54-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-65页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66页 |
