液相芯片技术检测食品中三种致病性弧菌的研究
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 液相芯片技术的原理 | 第12-13页 |
| 1.2 弧菌属概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 霍乱弧菌 | 第14页 |
| 1.2.2 创伤弧菌 | 第14-15页 |
| 1.2.3 溶藻弧菌 | 第15页 |
| 1.3 国内外食品微生物检测现状 | 第15-18页 |
| 1.3.1 传统培养基培养法 | 第15页 |
| 1.3.2 酶联免疫吸附法 | 第15-16页 |
| 1.3.3 核酸探针技术 | 第16页 |
| 1.3.4 寡核苷酸微阵列技术 | 第16页 |
| 1.3.5 环介导等温扩增技术 | 第16-17页 |
| 1.3.6 PCR方法 | 第17页 |
| 1.3.7 液相芯片技术 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题来源及研究意义 | 第18-19页 |
| 1.4.1 课题来源 | 第18页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第18-19页 |
| 1.5 本课题的研究内容 | 第19页 |
| 1.5.1 通用引物与探针的设计 | 第19页 |
| 1.5.2 DNA模板的提取 | 第19页 |
| 1.5.3 反应体系的建立 | 第19页 |
| 1.5.4 液相芯片检测 | 第19页 |
| 1.6 本课题的技术路线示意图 | 第19-21页 |
| 2 引物与探针的设计与合成 | 第21-25页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 引物设计方法 | 第21-22页 |
| 2.2.1 通用引物的设计 | 第21页 |
| 2.2.2 特异性探针的设计 | 第21-22页 |
| 2.3 Blast比对与验证 | 第22页 |
| 2.4 讨论 | 第22-24页 |
| 2.5 本章小结 | 第24-25页 |
| 3 DNA模板的提取 | 第25-28页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第25页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第25页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第25页 |
| 3.3 实验方法 | 第25-27页 |
| 3.3.1 DNA提取方法 | 第25-26页 |
| 3.3.2 DNA浓度测定及纯度判定 | 第26-27页 |
| 3.4 结果与分析 | 第27页 |
| 3.5 本章小结 | 第27-28页 |
| 4 PCR反应体系的建立 | 第28-35页 |
| 4.1 引言 | 第28页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第28-29页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第28页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第28-29页 |
| 4.3 实验方法 | 第29-30页 |
| 4.3.1 PCR扩增反应 | 第29页 |
| 4.3.2 PCR反应条件的优化 | 第29-30页 |
| 4.3.3 PCR灵敏度检测 | 第30页 |
| 4.4 结果与分析 | 第30-33页 |
| 4.4.1 PCR扩增反应结果 | 第30页 |
| 4.4.2 PCR反应条件优化结果 | 第30-31页 |
| 4.4.3 PCR灵敏度的检测结果 | 第31-33页 |
| 4.5 讨论 | 第33-34页 |
| 4.6 本章小结 | 第34-35页 |
| 5 液相芯片仪检测 | 第35-44页 |
| 5.1 引言 | 第35页 |
| 5.2 实验仪器与材料 | 第35-36页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第35页 |
| 5.2.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 5.3 实验方法 | 第36-37页 |
| 5.3.1 微球与探针的耦联 | 第36页 |
| 5.3.2 耦联效果的验证 | 第36-37页 |
| 5.3.3 液相芯片的杂交条件优化 | 第37页 |
| 5.3.4 液相芯片特性的检测 | 第37页 |
| 5.4 结果与分析 | 第37-41页 |
| 5.4.1 耦联效果的验证结果 | 第37-38页 |
| 5.4.2 液相芯片的杂交条件确定 | 第38-39页 |
| 5.4.3 液相芯片特性的验证 | 第39-41页 |
| 5.5 讨论 | 第41-42页 |
| 5.6 本章小结 | 第42-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
