| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 课题背景 | 第11-12页 |
| 1.2 地衣芽孢杆菌产碱性蛋白酶研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2.1 碱性蛋白酶的定义 | 第12页 |
| 1.2.2 碱性蛋白酶的作用特性 | 第12页 |
| 1.2.3 碱性蛋白酶的酶学性质 | 第12-13页 |
| 1.3 酶分子化学修饰 | 第13-14页 |
| 1.3.1 酶分子化学修饰研究进展 | 第13页 |
| 1.3.2 用于结构分析的小分子化学修饰 | 第13-14页 |
| 1.3.3 PEG化学修饰 | 第14页 |
| 1.4 固定化酶的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4.1 传统固定化方法 | 第15页 |
| 1.4.2 新型固定化技术 | 第15页 |
| 1.5 固定化酶膜表面改性方法 | 第15-17页 |
| 1.5.1 表面氧化和腐蚀法 | 第15-16页 |
| 1.5.2 离子束注入法 | 第16页 |
| 1.5.3 添加表面活性剂法 | 第16页 |
| 1.5.4 表面接枝法 | 第16-17页 |
| 1.6 本文研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 1.7 课题的来源及主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.7.1 课题来源 | 第18页 |
| 1.7.2 主要研究内容 | 第18-19页 |
| 2 高去酰胺碱性蛋白酶2709分离纯化及部分酶学性质 | 第19-27页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料与方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.2.2 仪器与设备 | 第19-20页 |
| 2.2.3 培养基 | 第20页 |
| 2.2.4 试验方法 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-26页 |
| 2.3.1 硫酸铵盐析 | 第21-22页 |
| 2.3.2 DEAE-Sephadex A-50柱层析 | 第22页 |
| 2.3.3 Sephadex G-100柱层析 | 第22-23页 |
| 2.3.4 纯度鉴定及分子量测定 | 第23页 |
| 2.3.5 2709蛋白酶的酶学性质 | 第23-24页 |
| 2.3.6 2709蛋白酶的热稳定性 | 第24-26页 |
| 2.4 本章小结 | 第26-27页 |
| 3 高去酰胺碱性蛋白酶2709化学修饰 | 第27-35页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 材料与方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第27页 |
| 3.2.2 仪器与设备 | 第27-28页 |
| 3.2.3 试验方法 | 第28-29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-34页 |
| 3.3.1 酶分子修饰条件的确定 | 第29页 |
| 3.3.2 反应条件对修饰度的影响 | 第29页 |
| 3.3.3 红外光谱分析 | 第29-31页 |
| 3.3.4 修饰酶与原酶酶学性质比较 | 第31-34页 |
| 3.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 4 高去酰胺碱性蛋白酶2709固定化 | 第35-51页 |
| 4.1 引言 | 第35页 |
| 4.2 材料与方法 | 第35-40页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第35页 |
| 4.2.2 仪器与设备 | 第35-36页 |
| 4.2.3 固定化方法研究 | 第36-38页 |
| 4.2.4 2709固定化酶的酶学性质 | 第38-40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-50页 |
| 4.3.1 紫外光引发接枝反应条件对接枝率的影响 | 第40-41页 |
| 4.3.2 间隔臂的引入 | 第41-43页 |
| 4.3.3 戊二醛的活化 | 第43-44页 |
| 4.3.4 酶的固定化 | 第44-45页 |
| 4.3.5 BSA标准曲线绘制 | 第45页 |
| 4.3.6 固定化条件对酶活性的影响 | 第45-46页 |
| 4.3.7 固定化酶膜表面化学结构的表征 | 第46-47页 |
| 4.3.8 固定化酶膜的酶学性质的研究 | 第47-50页 |
| 4.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |