| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-42页 |
| ·食品过敏 | 第14-15页 |
| ·食物过敏原标签法规 | 第15-17页 |
| ·牛乳过敏问题 | 第17-18页 |
| ·牛乳的主要过敏原 | 第18-22页 |
| ·酪蛋白 | 第19页 |
| ·a-乳白蛋白 | 第19-20页 |
| ·β-乳球蛋白 | 第20-22页 |
| ·牛乳过敏原的检测 | 第22-25页 |
| ·降低βLG致敏性的研究 | 第25-28页 |
| ·热处理 | 第25-26页 |
| ·高压法 | 第26页 |
| ·酶解法 | 第26-27页 |
| ·糖基化法 | 第27-28页 |
| ·茶多酚 | 第28-29页 |
| ·茶多酚与蛋白质的相互作用 | 第29-30页 |
| ·本课题的研究依据和主要研究内容 | 第30-33页 |
| ·研究依据 | 第30-31页 |
| ·主要研究内容 | 第31-32页 |
| ·技术路线图 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-42页 |
| 第二章 抗牛乳主要过敏原βLG单克隆抗体的制备与鉴定 | 第42-54页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验材料与仪器 | 第42-45页 |
| ·实验动物 | 第42页 |
| ·实验细胞 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·主要实验试剂 | 第42-43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·主要试剂配制 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·动物免疫 | 第45页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第45页 |
| ·细胞融合 | 第45-46页 |
| ·阳性杂交瘤细胞筛选与克隆 | 第46-47页 |
| ·抗牛乳βLG单克隆抗体的制备与鉴定 | 第47页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第48-49页 |
| ·分泌抗天然牛乳βLG杂交瘤细胞株的筛选 | 第49页 |
| ·单克隆抗体的纯度检测及WB鉴定 | 第49-50页 |
| ·抗体亚类的鉴定 | 第50-51页 |
| ·单克隆抗体的效价测定 | 第51页 |
| ·检测抗βLG单克隆抗体的交叉性 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |
| 第三章 抗牛乳βLG单克隆抗体与βLG结合区域的确定 | 第54-62页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·实验材料与仪器 | 第54-56页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·主要实验试剂 | 第54-55页 |
| ·仪器 | 第55页 |
| ·主要试剂配制 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-57页 |
| ·主要抗原表位肽链的Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定 | 第56页 |
| ·多肽片段与单克隆抗体特异结合的ELISA检测 | 第56-57页 |
| ·多肽片段与单克隆抗体特异结合的Immuno dot-blotting检测 | 第57页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第57页 |
| ·实验结果 | 第57-60页 |
| ·主要抗原表位肽链的合成 | 第57页 |
| ·主要抗原表位合成肽链的Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定 | 第57-58页 |
| ·单克隆抗体识别抗原表位区域的ELISA检测 | 第58-59页 |
| ·单克隆抗体识别抗原表位区域的Immuno dot-blotting检测 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-62页 |
| 第四章 基于牛乳βLG免疫反应性建立检测食物中牛乳βLG成分的方法 | 第62-80页 |
| ·引言 | 第62-63页 |
| ·材料与方法 | 第63-65页 |
| ·实验原料 | 第63页 |
| ·实验试剂 | 第63页 |
| ·仪器 | 第63-64页 |
| ·主要试剂配制 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-68页 |
| ·牛乳总蛋白抗原的提取 | 第65页 |
| ·食物样品蛋白粗提液的提取 | 第65页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第65页 |
| ·单克隆抗体生物素标记 | 第65-66页 |
| ·双抗体夹心法抗体配对实验 | 第66-67页 |
| ·检测牛乳主要过敏原βLG双单抗夹心免疫胶体金法 | 第67-68页 |
| ·检测牛乳主要过敏原βLG的免疫印迹法 | 第68页 |
| ·基于牛乳主要过敏原βLG免疫反应性的检测方法在食品中的应用 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-76页 |
| ·双抗体夹心法抗体配对 | 第68-71页 |
| ·基于βLG免疫反应性的检测βLG方法建立 | 第71-75页 |
| ·基于βLG免疫反应性检测食物中的牛乳过敏原成分检测方法的应用 | 第75-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-80页 |
| 第五章 βLG与茶多酚主要活性成分相互结合对蛋白免疫反应性的影响 | 第80-108页 |
| ·引言 | 第80-81页 |
| ·实验材料与仪器 | 第81-83页 |
| ·实验材料 | 第81-82页 |
| ·主要实验试剂 | 第82页 |
| ·仪器 | 第82页 |
| ·主要试剂配制 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-85页 |
| ·抗牛乳βLG多克隆抗体 | 第83页 |
| ·免疫小鼠血清和牛乳过敏患者血清中抗βLG特异性IgG和IgE的鉴定 | 第83页 |
| ·βLG-EGCG和βLG-EGC产物的制备 | 第83页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第83页 |
| ·荧光光谱和同步荧光光谱 | 第83-84页 |
| ·红外光谱 | 第84页 |
| ·二级结构的FTIR分析 | 第84页 |
| ·圆二色光谱 | 第84页 |
| ·免疫反应性检测 | 第84-85页 |
| ·蛋白与维生素A的结合能力的检测 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-103页 |
| ·抗体特异性鉴定 | 第85-86页 |
| ·荧光光谱 | 第86-91页 |
| ·热力学参数 | 第91-92页 |
| ·同步荧光光谱 | 第92-95页 |
| ·圆二色光谱 | 第95-97页 |
| ·红外光谱 | 第97-99页 |
| ·与维生素A的结合 | 第99-100页 |
| ·免疫反应性检测 | 第100-103页 |
| ·本章小结 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-108页 |
| 第六章 βLG热处理后与EGCG相互结合对蛋白免疫反应性的影响 | 第108-117页 |
| ·引言 | 第108页 |
| ·实验材料与仪器 | 第108-109页 |
| ·实验材料 | 第108-109页 |
| ·主要实验试剂 | 第109页 |
| ·仪器 | 第109页 |
| ·主要试剂配制 | 第109页 |
| ·实验方法 | 第109-110页 |
| ·βLG预热处理后与EGCG结合 | 第109-110页 |
| ·免疫反应性检测 | 第110页 |
| ·结果与分析 | 第110-115页 |
| ·βLG热处理后与EGCG结合的荧光猝灭光谱和结合常数 | 第110-113页 |
| ·βLG热处理后与EGCG相互结合对其免疫反应性的影响 | 第113-115页 |
| ·本章小结 | 第115页 |
| 参考文献 | 第115-117页 |
| 结论与展望 | 第117-119页 |
| 一、结论 | 第117页 |
| 二、本论文的主要创新点 | 第117-118页 |
| 三、展望 | 第118-119页 |
| 附录 | 第119-123页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第123-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 附件 | 第126页 |
