| 致谢 | 第4-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| 缩写 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.酵母菌混合糖代谢研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1 混合糖利用菌株 | 第12页 |
| 1.2 混合糖利用研究现状 | 第12-13页 |
| 1.3 麦芽糖假丝酵母(CandidamaltoseXu316)的代谢研究 | 第13-14页 |
| 1.3.1 麦芽糖假丝酵母(CandidamaltoseXu316)的发酵特点 | 第13页 |
| 1.3.2 木糖发酵酵母的Crabtree效应 | 第13页 |
| 1.3.3 麦芽糖假丝酵母(CandidamaltoseXu316)的代谢研究 | 第13-14页 |
| 2利用木糖转化生产木糖醇的研究进展 | 第14-19页 |
| 2.1 微生物发酵菌株 | 第14-15页 |
| 2.1.1 细菌 | 第14-15页 |
| 2.1.2 霉菌 | 第15页 |
| 2.1.3 酵母 | 第15页 |
| 2.2 木糖醇制备的原料 | 第15页 |
| 2.3 木糖醇的生产方法 | 第15-17页 |
| 2.4 微生物发酵木糖醇生化过程 | 第17-19页 |
| 2.5 微生物发酵转化木糖醇的现状 | 第19页 |
| 2.6 我国木糖醇的生产现状 | 第19页 |
| 3.本论文的研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 3.1 混合糖代谢研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 3.2 木糖醇转化的目的与意义 | 第20页 |
| 3.3 麦芽糖假丝酵母适应高温进化的原理与意义 | 第20页 |
| 3.4 转运蛋白SUT1的克隆 | 第20-21页 |
| 4.本论文的主要研究内容与创新点 | 第21-23页 |
| 4.1 研究内容 | 第21-22页 |
| 4.2 本论文的创新点 | 第22页 |
| 4.3 本论文的技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 麦芽糖假丝酵母的混合糖代谢研究 | 第23-34页 |
| 1 材料与方法 | 第23-27页 |
| 1.1 材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 菌种 | 第23页 |
| 1.1.2 试剂 | 第23页 |
| 1.1.3 仪器与设备 | 第23-24页 |
| 1.1.4 培养基 | 第24页 |
| 1.2 培养方法 | 第24-25页 |
| 1.2.1 粗酶液的制备 | 第24页 |
| 1.2.2 HPLC样品的制备 | 第24-25页 |
| 1.3 分析检测方法 | 第25-27页 |
| 1.3.1 HPLC标准曲线样品的制备 | 第25页 |
| 1.3.2 蛋白含量的测定 | 第25页 |
| 1.3.3 酶活的测定 | 第25-27页 |
| 2结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.1 以葡萄糖和木糖为唯一碳源的发酵情况 | 第27-28页 |
| 2.2 不同浓度混合糖的发酵情况 | 第28-30页 |
| 2.3 乙醇和XR,XDH酶活的大小可能导致酵母菌体在混合糖发酵过程中停止生长 | 第30-33页 |
| 3.本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 麦芽糖假丝酵母对木糖的高效生物转化 | 第34-42页 |
| 1 材料与方法 | 第34-37页 |
| 1.1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 菌种 | 第34页 |
| 1.1.2 试剂 | 第34页 |
| 1.1.3 仪器与设备 | 第34-35页 |
| 1.1.4 培养基 | 第35页 |
| 1.2 培养方法 | 第35-36页 |
| 1.2.1 活化培养 | 第35页 |
| 1.2.2 转化实验 | 第35页 |
| 1.2.3 放大的多批次木糖转化实验 | 第35-36页 |
| 1.2.4 放大的多批次玉米芯水解液和木糖废母液转化实验 | 第36页 |
| 1.3 实验分析方法 | 第36-37页 |
| 1.3.1 HPLC样品的制备 | 第36页 |
| 1.3.2 物质含量的测定 | 第36页 |
| 1.3.3 HPLC标准曲线样品的制备 | 第36-37页 |
| 2.结果与讨论 | 第37-41页 |
| 2.1 麦芽糖假丝酵母在30℃温度下转化木糖和木糖母液的实验 | 第37-38页 |
| 2.2 麦芽糖假丝酵母在30℃温度下转化不同浓度木糖的实验 | 第38-39页 |
| 2.3 芽糖假丝酵母在30℃温度下转化不同浓度木糖母液的实验 | 第39-40页 |
| 2.4 麦芽糖假丝酵母多批次转化木糖的实验 | 第40-41页 |
| 2.5 麦芽糖假丝酵母转化玉米芯水解液和木糖废母液产木糖醇的工业性试验 | 第41页 |
| 3.本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 麦芽糖假丝酵母的适应性进化 | 第42-49页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| 1.1 材料 | 第42-43页 |
| 1.1.1 菌种 | 第42页 |
| 1.1.2 试剂 | 第42页 |
| 1.1.3 分子生物常用酶,试剂盒及电泳缓冲液 | 第42页 |
| 1.1.4 仪器与设备 | 第42-43页 |
| 1.1.5 培养基 | 第43页 |
| 1.2 培养方法 | 第43-44页 |
| 1.2.1 活化培养 | 第43页 |
| 1.2.2 适应进化培养方法 | 第43页 |
| 1.2.3 平板分离 | 第43-44页 |
| 1.2.4 木糖醇生产方法 | 第44页 |
| 1.2.5 PCR方法 | 第44页 |
| 1.3 分析检测方法 | 第44页 |
| 1.4 试剂盒使用方法 | 第44-45页 |
| 1.4.1 使用BIOMIGA EZgene TM Yeast gDNA Kit试剂盒进行酵母基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| 1.4.2 使用SenPrep柱式DNA胶回收试剂盒进行胶回收步骤 | 第45页 |
| 2.结果与讨论 | 第45-48页 |
| 2.1 麦芽糖假丝酵母的高温适应进化过程 | 第45-46页 |
| 2.2 麦芽糖假丝酵母适应进化菌株的鉴定 | 第46页 |
| 2.3 麦芽糖假丝酵母驯化菌株性能的鉴定 | 第46-48页 |
| 3.本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 麦芽糖假丝酵母木糖转运蛋白的克隆 | 第49-55页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| 1.1 材料 | 第49页 |
| 1.1.1 菌种 | 第49页 |
| 1.2 分子生物常用酶、试剂盒及电泳缓冲液 | 第49-52页 |
| 1.2.1 使用BIOMIGA EZgene TM Yeast g DNA Kit试剂盒进行酵母基因组DNA的提取 | 第49-50页 |
| 1.2.2 使用SenPrep柱式DNA胶回收试剂盒进行胶回收步骤 | 第50页 |
| 1.2.3 液氮法大量提取酵母基因组DNA | 第50-51页 |
| 1.2.4 乙醇沉淀的方法如下（主要用于浓缩DNA） | 第51页 |
| 1.2.5 试验设计原理与方法 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-54页 |
| 2.1 麦芽糖假丝酵母转运蛋白保守序列的克隆 | 第52-53页 |
| 2.2 染色体步移法克隆完整的麦芽糖假丝酵母SUT1基因 | 第53-54页 |
| 2.3 麦芽糖假丝酵母SUT1基因的确定 | 第54页 |
| 3.本章小结 | 第54-55页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第55-57页 |
| 1.本文主要结论 | 第55页 |
| 2.讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| ABSTRACT | 第62-63页 |
| 附录 | 第64-73页 |
| 附表1 麦芽糖假丝酵母驯化前后18SDNA序列比对 | 第64-66页 |
| 附表2：染色体步移法克隆的麦芽糖假丝酵母 SUT1 基因与 Candida tropicalisMYA-3404 己糖转运蛋白2的cDNA 的序列比对 | 第66-69页 |
| 附表3：染色体步移法克隆的麦芽糖假丝酵母SUT1基因与全基因组测序结果的序列比对 | 第69-73页 |
