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酶法制备羊乳酪蛋白ACE抑制肽及分离纯化

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
1 前言第13-20页
   ·高血压与 ACE 抑制肽第13-15页
     ·高血压的危害第13页
     ·传统降压药物的危害及食源性 ACE 抑制肽的优势第13-14页
     ·ACE 抑制肽第14-15页
   ·ACE 抑制肽的研究进展第15-18页
     ·ACE 抑制肽的制备方法第15-17页
     ·ACE 抑制肽的分离纯化第17-18页
   ·本课题的意义及研究内容第18-20页
2 材料与方法第20-28页
   ·材料第20-22页
     ·实验材料与试剂第20-21页
     ·仪器设备第21-22页
   ·技术路线与试验方法第22-25页
     ·技术路线第22页
     ·脱脂乳的制备第22页
     ·酪蛋白提取工艺的优化第22页
     ·酪蛋白最佳用酶的选择第22-23页
     ·酶解条件的优化第23页
     ·酶解液的超滤分离第23页
     ·大孔树脂 DA201-C 对酶解物的初步分离第23-24页
     ·凝胶色谱对酶解物的分离纯化第24-25页
     ·RP-HPLC 法测定肽组成图谱第25页
   ·分析测定方法第25-28页
     ·蛋白浓度的测定第25页
     ·多肽浓度的测定第25页
     ·酪蛋白得率的测定第25页
     ·酪蛋白提取率的测定第25页
     ·pH-State 法测蛋白质水解度第25-26页
     ·ACE 抑制率的测定第26-27页
     ·IC50的测定第27-28页
3 结果与讨论第28-70页
   ·酪蛋白提取工艺的优化第28-34页
     ·蛋白质标准曲线第28页
     ·温度对酪蛋白得率和提取率的影响第28-29页
     ·不同 pH 条件下酪蛋白得率和提取率的变化第29-30页
     ·搅拌强度影响酪蛋白制备的效果分析第30页
     ·酪蛋白提取工艺的优化第30-34页
   ·羊乳酪蛋白水解最佳用酶的选择第34-36页
   ·单一酶水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽的优化第36-45页
     ·温度对 Alcalase 水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽效果的影响第36-37页
     ·pH 对 Alcalase 水解羊乳酪蛋白效果的影响第37页
     ·酶添加量对羊乳酪蛋白酶解物 ACE 抑制率及水解度的影响第37-38页
     ·底物浓度对羊乳酪蛋白酶解物 ACE 抑制率及水解度的效果分析第38页
     ·不同水解时间下 ACE 抑制率及水解度的变化第38-39页
     ·Alcalase 水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽主要影响因素的筛选第39-41页
     ·Alcalase 水解羊乳酪蛋白最佳酶解工艺条件的优化第41-45页
   ·复合酶水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽的优化第45-57页
     ·温度对复合酶水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽的效果分析第45-46页
     ·pH 对复合酶水解羊乳酪蛋白效果的影响第46-47页
     ·酶添加量引起 ACE 抑制率及水解度的变化分析第47页
     ·底物浓度对 ACE 抑制率及水解度的影响第47-48页
     ·不同水解时间下 ACE 抑制率及水解度的变化第48-49页
     ·复合酶比例对复合酶水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽的影响第49页
     ·复合酶水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽主要影响因素的筛选第49-52页
     ·最陡爬坡试验结果第52页
     ·复合酶水解羊乳酪蛋白最佳酶解工艺条件的优化第52-57页
   ·酶解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽的反应动力学第57-59页
     ·多肽标准曲线第57页
     ·单一酶水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽的反应动力学第57-58页
     ·复合酶水解羊乳酪蛋白制备 ACE 抑制肽的反应动力学第58-59页
   ·酪蛋白酶解液的超滤分离第59页
   ·DA201-C 大孔树脂对酶解液的脱盐精制第59-63页
     ·DA201-C 大孔树脂对 ACE 抑制肽的静态吸附动力学第59-60页
     ·DA201-C 大孔树脂对 ACE 抑制肽的静态解吸动力学第60-61页
     ·不同 pH 值对吸附效果的影响第61页
     ·不同乙醇浓度对解吸效果的影响第61-62页
     ·大孔吸附树脂 DA201-C 的动态解吸第62页
     ·大孔吸附树脂 DA201-C 的洗脱液 IC50的测定第62-63页
   ·葡聚糖凝胶色谱分离纯化 ACE 抑制肽第63-70页
     ·洗脱剂对 SephadexG-25 分离效果的影响第63-64页
     ·上样浓度引起 SephadexG-25 分离效果变化分析第64-65页
     ·不同洗脱剂流速影响 SephadexG-25 的分离效果分析第65-67页
     ·SephadexG-25 组分分离第67-68页
     ·SephadexG-15 分离 G2 组分第68-69页
     ·SephadexG-15 分离组分 G2-2 的 RP-HPLC 肽图谱第69-70页
4 结论、创新点及展望第70-72页
   ·结论第70页
   ·创新点第70-71页
   ·展望第71-72页
致谢第72-73页
参考文献第73-80页
攻读学位期间发表的成果目录第80-81页

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