| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 引言 | 第14-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-44页 |
| ·酶稳定性 | 第17-30页 |
| ·影响酶稳定性的环境因素 | 第17-20页 |
| ·酶稳定性研究方法 | 第20-28页 |
| ·提高酶稳定性策略 | 第28-30页 |
| ·酶稳定剂 | 第30-40页 |
| ·酶稳定剂种类 | 第30-32页 |
| ·渗透压补偿性溶质的种类及性质 | 第32-33页 |
| ·渗透压补偿性溶质Ectoine | 第33-35页 |
| ·Ectoine对酶的保护作用机理 | 第35-40页 |
| ·植酸酶和脂肪酶的稳定性 | 第40-42页 |
| ·本论文研究背景和内容 | 第42-44页 |
| 第2章 中度嗜盐菌Halomonas sp.B2发酵制备Ectoine | 第44-51页 |
| ·主要材料 | 第44-45页 |
| ·样品来源 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·仪器设备 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·菌株的分离纯化及分类鉴定 | 第45页 |
| ·摇瓶培养 | 第45页 |
| ·Ectoine浓度的HPLC测定 | 第45页 |
| ·Ectoine的~1H-NMR鉴定 | 第45-46页 |
| ·发酵罐分批发酵 | 第46页 |
| ·细胞干重测定 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-50页 |
| ·Ectoine合成菌株的分离筛选 | 第46-47页 |
| ·Ectoine的~1H-NMR鉴定 | 第47-48页 |
| ·NaCl浓度对Ectoine合成的影响 | 第48-49页 |
| ·Ectoine分批发酵 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第3章 Ectoine对植酸酶热稳定性影响的研究 | 第51-62页 |
| ·实验材料 | 第51-54页 |
| ·实验菌株 | 第51页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·试剂配制 | 第51-54页 |
| ·仪器设备 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·植酸酶纯化 | 第54页 |
| ·植酸酶活性测定 | 第54-55页 |
| ·残余酶活性测定 | 第55页 |
| ·植酸水解率测定 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-60页 |
| ·PHYA Ⅱ热稳定性 | 第55-56页 |
| ·Ectoine对PHYA Ⅱ热稳定性的影响 | 第56-57页 |
| ·Ectoine对PHYA Ⅱ水解的影响 | 第57-58页 |
| ·Ectoine对PHYA Ⅱ热稳定性保护作用方式 | 第58-59页 |
| ·Ectoine与其它补偿性溶质对PHYA Ⅱ热稳定性影响比较 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| 第4章 Ectoine提高植酸酶热稳定性机理的研究 | 第62-75页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·仪器设备 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-64页 |
| ·PHYA Ⅱ失活动力学分析 | 第63页 |
| ·PHYA Ⅱ失活热力学分析 | 第63-64页 |
| ·植酸酶热失活测定 | 第64页 |
| ·PHYA Ⅱ紫外和荧光光谱扫描 | 第64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-73页 |
| ·植酸酶热失活的动力学分析 | 第64-66页 |
| ·植酸酶热失活的热力学分析 | 第66-68页 |
| ·热处理下植酸酶构象分析 | 第68-73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第5章 Ectoine在有机相对脂肪酶保护作用的研究 | 第75-90页 |
| ·实验材料 | 第75-76页 |
| ·实验菌株 | 第75页 |
| ·材料 | 第75页 |
| ·培养基 | 第75页 |
| ·仪器设备 | 第75-76页 |
| ·实验方法 | 第76-78页 |
| ·Novozym435催化转酯合成生物柴油(脂肪酸甲酯,ME) | 第76页 |
| ·气相色谱分析 | 第76页 |
| ·全细胞脂肪酶的制备 | 第76-77页 |
| ·油酸乙酯合成 | 第77页 |
| ·油酸乙酯酯化率的测定 | 第77-78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-89页 |
| ·Ectoine对Novozym435催化转酯合成生物柴油的影响 | 第78-84页 |
| ·Ectoine对DM-01脂肪酶催化酯化合成油酸乙酯的影响 | 第84-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 第6章 Ectoine对有机相脂肪酶保护作用机理探讨 | 第90-118页 |
| ·实验材料 | 第90-91页 |
| ·材料 | 第90页 |
| ·仪器设备 | 第90-91页 |
| ·实验方法 | 第91-92页 |
| ·反应初速率动力学模型的建立 | 第91页 |
| ·Novozym435红外测试方法 | 第91页 |
| ·红外光谱数据处理 | 第91-92页 |
| ·DM-01脂肪酶的制备提取 | 第92页 |
| ·Ectoine对乙醇中脂肪酶紫外光谱的影响 | 第92页 |
| ·DM-01脂肪酶红外测试方法 | 第92页 |
| ·结果与讨论 | 第92-116页 |
| ·酶促棉籽油转酯反应中外扩散限制的影响 | 第92-94页 |
| ·Ectoine对酶促动力学影响 | 第94-96页 |
| ·Ectoine对Novozym435构象影响的研究 | 第96-98页 |
| ·Ectoine对Novozym435蛋白质酰胺Ⅰ带二级结构的影响 | 第98-107页 |
| ·Ectoine对DM-01脂肪酶在无水乙醇中构象的影响 | 第107-113页 |
| ·Ectoine对油酸环境中DM-01脂肪酶的构象的影响 | 第113-116页 |
| ·小结 | 第116-118页 |
| 结论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-130页 |
| 附录A Ectoine对Novozym435 FTIR光谱影响 | 第130-133页 |
| 附录B Ectoine对DM-01脂肪酶FTIR光谱的影响 | 第133-136页 |
| 攻读学位期间公开发表论文 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
