| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第12-25页 |
| 1.1 琼胶的研究概况 | 第12-13页 |
| 1.1.1 琼胶 | 第12-13页 |
| 1.1.2 琼胶的理化性质 | 第13页 |
| 1.1.3 琼胶的应用 | 第13页 |
| 1.1.4 琼胶寡糖 | 第13页 |
| 1.2 琼胶酶的研究概况 | 第13-22页 |
| 1.2.1 琼胶酶的来源及发酵现状 | 第13-17页 |
| 1.2.2 琼胶酶的作用方式 | 第17-18页 |
| 1.2.3 琼胶酶的糖苷水解酶家族归属及作用机理 | 第18-19页 |
| 1.2.4 典型菌株的琼胶降解途径 | 第19页 |
| 1.2.5 琼胶酶活性的检测方法 | 第19-20页 |
| 1.2.6 琼胶酶的分离纯化及酶学性质 | 第20-21页 |
| 1.2.7 琼胶酶的克隆与表达 | 第21页 |
| 1.2.8 琼胶酶的晶体结构 | 第21-22页 |
| 1.3 琼胶酶的应用 | 第22-23页 |
| 1.3.1 制备琼胶寡糖 | 第22页 |
| 1.3.2 海藻工具酶 | 第22-23页 |
| 1.3.3 在分子生物学方面的应用 | 第23页 |
| 1.4 论文的立题依据和研究内容 | 第23-25页 |
| 1.4.1 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 第2章 产琼胶酶细菌的分离和鉴定 | 第25-37页 |
| 2.1 试验材料与设备 | 第25-27页 |
| 2.1.1 样品 | 第25页 |
| 2.1.2 培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 主要溶液及其配制 | 第26页 |
| 2.1.5 仪器与设备 | 第26-27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 样品的富集 | 第27页 |
| 2.2.2 产琼胶酶细菌的分离 | 第27-28页 |
| 2.2.3 琼胶酶粗酶样品制备及酶活力测定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 16SrRNA基因序列的PCR扩增、序列比对和系统发育分析 | 第29页 |
| 2.2.5 菌株的形态及生理生化特性鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.6 菌株的产酶方式研究 | 第30页 |
| 2.2.7 数据处理与分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-36页 |
| 2.3.1 琼胶酶产生菌的分离 | 第30-31页 |
| 2.3.2 菌株NTa的形态学观察 | 第31-32页 |
| 2.3.3 16SrRNA基因分析及系统发育树构建 | 第32-34页 |
| 2.3.4 菌株的表型及生理生化鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.5 菌株的产酶方式 | 第35-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 2.4.1 琼胶酶产生菌NTa的分离 | 第36页 |
| 2.4.2 琼胶酶产生菌NTa的鉴定 | 第36-37页 |
| 第3章 Stenotrophomonassp.NTa产琼胶酶发酵工艺优化 | 第37-56页 |
| 3.1 试验材料与设备 | 第37-38页 |
| 3.1.1 样品 | 第37页 |
| 3.1.2 培养基 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.4 主要溶液及其配制 | 第37-38页 |
| 3.1.5 仪器与设备 | 第38页 |
| 3.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 培养方法 | 第38页 |
| 3.2.2 检测方法 | 第38页 |
| 3.2.3 碳源对菌株产酶的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.4 氮源对菌株产酶的影响 | 第39页 |
| 3.2.5 NaCl浓度对菌株产酶的影响 | 第39页 |
| 3.2.6 温度对菌株产酶的影响 | 第39页 |
| 3.2.7 Plackett-Burman(PB)试验设计 | 第39-40页 |
| 3.2.8 最陡爬坡试验(SteepestAscentDesign) | 第40页 |
| 3.2.9 响应面试验设计(ResponseSurfaceMethodology) | 第40页 |
| 3.2.10 Stenotrophomonassp.NTa发酵琼胶酶动力学分析 | 第40-41页 |
| 3.2.11 数据处理与分析 | 第41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-55页 |
| 3.3.1 碳源对菌株产酶的影响 | 第41-44页 |
| 3.3.2 氮源对菌株产酶的影响 | 第44页 |
| 3.3.3 NaCl浓度对菌株产酶的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.4 温度对菌株产酶的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.5 Plackett-Burman试验 | 第46-48页 |
| 3.3.6 最陡爬坡试验 | 第48-49页 |
| 3.3.7 响应面试验 | 第49-52页 |
| 3.3.8 验证试验 | 第52-53页 |
| 3.3.9 Stenotrophomonassp.NTa发酵产琼胶酶的动态规律及酶合成动力学分析 | 第53-55页 |
| 3.4 小结 | 第55-56页 |
| 3.4.1 碳源、氮源、NaCl和温度对Stenotrophomonassp.NTa产琼脂酶的影响 | 第55页 |
| 3.4.2 Stenotrophomonassp.NTa发酵琼胶酶工艺的优化 | 第55页 |
| 3.4.3 Stenotrophomonassp.NTa发酵琼胶酶的动力学分析 | 第55-56页 |
| 第4章 Stenotrophomonassp.NTa琼胶酶的酶学性质及酶解产物分析 | 第56-70页 |
| 4.1 试验材料与设备 | 第56-57页 |
| 4.1.1 样品 | 第56页 |
| 4.1.2 培养基 | 第56页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第56页 |
| 4.1.4 主要溶液及其配制 | 第56-57页 |
| 4.1.5 仪器与设备 | 第57页 |
| 4.2 试验方法 | 第57-60页 |
| 4.2.1 培养方法 | 第57-58页 |
| 4.2.2 检测方法 | 第58页 |
| 4.2.3 温度对琼胶酶活性的影响 | 第58页 |
| 4.2.4 pH值对琼胶酶活性的影响 | 第58页 |
| 4.2.5 金属离子对琼胶酶活性的影响 | 第58页 |
| 4.2.6 抑制剂、变性剂及去垢剂对琼胶酶活性的影响 | 第58-59页 |
| 4.2.7 底物专一性研究 | 第59页 |
| 4.2.8 酶动力学研究 | 第59页 |
| 4.2.9 Stenotrophomonassp.琼胶酶酶解产物分析及琼脂酶类型鉴定 | 第59-60页 |
| 4.2.10 数据处理与分析 | 第60页 |
| 4.3 结果与分析 | 第60-68页 |
| 4.3.1 温度对琼胶酶活性的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.2 pH值对琼胶酶的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.3 金属离子对琼胶酶活性的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.4 抑制剂、去垢剂及变性剂对琼胶酶活性的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.5 底物特异性 | 第64页 |
| 4.3.6 琼胶酶动力学研究 | 第64-65页 |
| 4.3.7 Stenotrophomonassp.NTa所产琼胶酶水解琼脂产物分析及琼胶酶类型鉴定 | 第65-68页 |
| 4.4 小结 | 第68-70页 |
| 4.4.1 Stenotrophomonassp.NTa的琼胶酶酶学性质 | 第68-69页 |
| 4.4.2 Stenotrophomonassp.NTa所产琼胶酶水解琼脂产物分析及琼脂酶类型鉴定 | 第69-70页 |
| 第5章 结论和展望 | 第70-72页 |
| 5.1 结论 | 第70-71页 |
| 5.2 展望 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第83页 |
