| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 粘康酸 | 第9-15页 |
| 1.1.1 粘康酸的结构、性质以及应用 | 第9-10页 |
| 1.1.2 粘康酸制造概述 | 第10-15页 |
| 1.2 进化工程 | 第15-17页 |
| 1.3 本课题研究内容、目的及意义 | 第17-19页 |
| 1.3.1 研究目的及意义 | 第17页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-25页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第19-20页 |
| 2.1.2 引物序列 | 第20-22页 |
| 2.1.3 主要药品及试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.4 主要设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 粘康酸细胞工厂的构建 | 第25-35页 |
| 2.2.2 粘康酸细胞工厂的优化 | 第35-36页 |
| 2.2.3 HPLC分析三脱氢莽草酸、原儿茶酸、儿茶酚以及粘康酸含量 | 第36页 |
| 2.2.4 粘康酸工程菌摇瓶发酵与分批补料发酵 | 第36-38页 |
| 3 结果与讨论 | 第38-55页 |
| 3.1 原儿茶酸代谢途径的构建、组合调控及发酵 | 第38-40页 |
| 3.1.1 原儿茶酸代谢途径的构建与组合调控 | 第38-39页 |
| 3.1.2 原儿茶酸工程菌摇瓶发酵评价 | 第39-40页 |
| 3.2 儿茶酚代谢途径的构建、组合调控及发酵 | 第40-42页 |
| 3.2.1 儿茶酚代谢途径的构建与组合调控 | 第40-41页 |
| 3.2.2 儿茶酚工程菌摇瓶发酵评价 | 第41-42页 |
| 3.3 粘康酸代谢途径的构建、组合调控及发酵 | 第42-48页 |
| 3.3.1 粘康酸代谢途径的构建与组合调控 | 第42-44页 |
| 3.3.2 粘康酸工程菌摇瓶发酵评价 | 第44-46页 |
| 3.3.3 MA30摇瓶发酵优化 | 第46-47页 |
| 3.3.4 MA30的5L发酵罐分批补料发酵评价 | 第47-48页 |
| 3.4 粘康酸细胞工厂的优化 | 第48-52页 |
| 3.4.1 粘康酸高通量筛选方法的建立 | 第48页 |
| 3.4.2 文库的构建与筛选 | 第48-50页 |
| 3.4.3 筛选得到的进化菌株摇瓶发酵评价 | 第50-51页 |
| 3.4.4 MA30-G2的5L发酵罐分批补料发酵评价 | 第51-52页 |
| 3.5 基因组重测序分析 | 第52-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 5 展望 | 第56-57页 |
| 6 参考文献 | 第57-65页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-70页 |