摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 前言 | 第9-22页 |
1.1 普鲁兰酶概述 | 第9-15页 |
1.1.1 普鲁兰酶的性质 | 第9-10页 |
1.1.2 普鲁兰酶的分类及结构特征 | 第10-12页 |
1.1.3 普鲁兰酶的研究现状及发展趋势 | 第12-14页 |
1.1.4 普鲁兰酶的应用 | 第14-15页 |
1.2 糖基结合模块概述 | 第15-20页 |
1.2.1 糖基结合模块性质 | 第15-16页 |
1.2.2 国内外研究现状及发展动态分析 | 第16-20页 |
1.3 课题研究目的与意义 | 第20-21页 |
1.4 研究内容 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-37页 |
2.1 实验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 菌种和质粒 | 第22页 |
2.1.2 主要化学试剂 | 第22-23页 |
2.1.3 主要仪器和设备 | 第23-24页 |
2.1.4 培养基 | 第24页 |
2.1.5 主要试剂 | 第24-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-37页 |
2.2.1 普鲁兰酶关键氨基酸的丙氨酸筛选及性质分析 | 第26-34页 |
2.2.2 单位点定向设计 | 第34-37页 |
3 结果与讨论 | 第37-57页 |
3.1 影响底物亲和力关键氨基酸位点确定及分析 | 第37-51页 |
3.1.1 普鲁兰酶糖结合相关氨基酸的丙氨酸突变体构建 | 第37-38页 |
3.1.2 普鲁兰酶及其突变酶的诱导表达与纯化 | 第38-40页 |
3.1.3 重组普鲁兰酶动力学性质研究 | 第40-49页 |
3.1.4 关键氨基酸位点对酶学性质的影响 | 第49-51页 |
3.2 单位点定向设计 | 第51-57页 |
3.2.1 普鲁兰酶定向突变体构建 | 第51页 |
3.2.2 筛选阳性克隆 | 第51-52页 |
3.2.3 定向突变酶的诱导表达与纯化 | 第52-54页 |
3.2.4 定向突变酶酶活性质测定 | 第54-57页 |
4 结论 | 第57-58页 |
5 展望 | 第58-59页 |
6 参考文献 | 第59-66页 |
7 论文发表情况 | 第66-67页 |
8 致谢 | 第67页 |