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普鲁兰酶糖结合关键氨基酸位点的功能研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 前言第9-22页
    1.1 普鲁兰酶概述第9-15页
        1.1.1 普鲁兰酶的性质第9-10页
        1.1.2 普鲁兰酶的分类及结构特征第10-12页
        1.1.3 普鲁兰酶的研究现状及发展趋势第12-14页
        1.1.4 普鲁兰酶的应用第14-15页
    1.2 糖基结合模块概述第15-20页
        1.2.1 糖基结合模块性质第15-16页
        1.2.2 国内外研究现状及发展动态分析第16-20页
    1.3 课题研究目的与意义第20-21页
    1.4 研究内容第21-22页
2 材料与方法第22-37页
    2.1 实验材料第22-26页
        2.1.1 菌种和质粒第22页
        2.1.2 主要化学试剂第22-23页
        2.1.3 主要仪器和设备第23-24页
        2.1.4 培养基第24页
        2.1.5 主要试剂第24-26页
    2.2 实验方法第26-37页
        2.2.1 普鲁兰酶关键氨基酸的丙氨酸筛选及性质分析第26-34页
        2.2.2 单位点定向设计第34-37页
3 结果与讨论第37-57页
    3.1 影响底物亲和力关键氨基酸位点确定及分析第37-51页
        3.1.1 普鲁兰酶糖结合相关氨基酸的丙氨酸突变体构建第37-38页
        3.1.2 普鲁兰酶及其突变酶的诱导表达与纯化第38-40页
        3.1.3 重组普鲁兰酶动力学性质研究第40-49页
        3.1.4 关键氨基酸位点对酶学性质的影响第49-51页
    3.2 单位点定向设计第51-57页
        3.2.1 普鲁兰酶定向突变体构建第51页
        3.2.2 筛选阳性克隆第51-52页
        3.2.3 定向突变酶的诱导表达与纯化第52-54页
        3.2.4 定向突变酶酶活性质测定第54-57页
4 结论第57-58页
5 展望第58-59页
6 参考文献第59-66页
7 论文发表情况第66-67页
8 致谢第67页

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