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深海中产蛋白酶菌株的筛选及酶学性质分析

摘要第1-5页
abstract第5-9页
1 前言第9-21页
   ·海洋环境第9页
   ·海洋微生物分类第9-11页
     ·海洋细菌第10-11页
     ·海洋细菌多样性研究及意义第11页
   ·低温微生物第11-14页
     ·低温微生物的分布第11-12页
     ·低温微生物的适冷机制第12-14页
   ·冷适酶及适冷机制第14-15页
     ·冷适酶第14-15页
     ·冷适酶的适冷机制第15页
   ·蛋白酶分类及作用特点第15-17页
     ·金属蛋白酶第16页
     ·丝氨酸蛋白酶第16页
     ·天冬氨酸蛋白酶第16页
     ·半胱氨酸蛋白酶第16-17页
   ·冷适酶的应用第17-20页
     ·冷适蛋白酶的研究现状第17-18页
     ·冷适蛋白酶研究方面的不足第18-19页
     ·冷适蛋白酶的应用第19-20页
   ·本课题立题背景和意义第20-21页
2 材料和方法第21-36页
   ·实验材料第21-27页
     ·菌株和质粒第21页
     ·工具酶及相关试剂第21-23页
     ·主要仪器和设备第23-24页
     ·培养基和主要溶液第24-27页
     ·实验所用引物第27页
   ·实验方法第27-36页
     ·产蛋白酶菌株的筛选第27-28页
     ·菌株鉴定第28-32页
     ·发酵时间对菌株生长及产酶的影响第32页
     ·菌株发酵培养基组分的优化第32-33页
     ·菌株发酵培养条件的优化第33-34页
     ·菌株酶学性质的研究第34-36页
3 结果与讨论第36-49页
   ·产蛋白酶菌株的筛选第36-37页
     ·蛋白酶生产菌株的初筛第36页
     ·蛋白酶生产菌株的复筛第36-37页
   ·菌株鉴定第37-40页
     ·菌株的形态学观察第37页
     ·生理生化特性第37-38页
     ·系统发育树分析第38-39页
     ·鉴定结果第39-40页
   ·培养时间对菌株生长及产酶的影响第40页
   ·菌株发酵培养基组分的优化第40-45页
     ·碳源试验第40-41页
     ·氮源试验第41-43页
     ·不同浓度NaCl对蛋白酶活的影响第43-44页
     ·正交试验确定最佳发酵培养基第44-45页
   ·菌株发酵条件的优化第45-49页
     ·pH对蛋白酶活的影响第45-46页
     ·接种量对蛋白酶活的影响第46-47页
     ·种龄对蛋白酶活性的影响第47页
     ·装液量对蛋白酶活性的影响第47-48页
     ·正交试验确定最佳发酵条件第48-49页
4 蛋白酶的酶学性质第49-56页
   ·(NH_4)_2SO_4分级沉淀条件的确定第49页
   ·蛋白酶酶学性质的分析第49-56页
     ·酶的最适pH第49-50页
     ·酶的pH稳定性第50页
     ·酶的最适温度第50-51页
     ·酶的热稳定性第51-52页
     ·金属离子对蛋白酶酶活力的影响第52-53页
     ·不同抑制剂对蛋白酶活力的影响第53-54页
     ·表面活性剂对蛋白酶活性的影响第54-55页
     ·有机溶剂对蛋白酶活力的影响第55-56页
5 结论第56-57页
6 展望第57-58页
7 参考文献第58-65页
8 攻读硕士学位期间发表论文情况第65-66页
9 致谢第66页

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