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产黄嘌呤氧化酶菌种的诱变选育及发酵条件优化

中文摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-10页
第一章 绪论第10-29页
   ·黄嘌呤氧化酶概述第10-16页
     ·黄嘌呤氧化酶的一般性质第10-11页
     ·黄嘌呤氧化还原酶的两种形式第11-12页
     ·黄嘌呤氧化酶的底物特性及催化反应第12-14页
     ·黄嘌呤氧化酶的抑制剂第14-15页
       ·嘌呤结构类似性抑制物第14页
       ·非嘌呤结构类抑制剂第14-15页
     ·黄嘌呤氧化酶的应用第15-16页
       ·黄嘌呤氧化酶的生理功能第15页
       ·黄嘌呤氧化酶的病理功能第15页
       ·检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力第15-16页
       ·黄嘌呤氧化酶酶促产物的作用第16页
       ·其它应用第16页
   ·国内外来源于不同生物的黄嘌呤氧化酶的研究进展第16-18页
     ·动物来源的 XOD第17页
     ·植物来源的 XOD第17页
     ·微生物来源的 XOD第17-18页
   ·黄嘌呤氧化酶生产菌的选育第18-22页
     ·菌种选育的目标第18页
     ·生产菌株的选育第18-22页
       ·诱变育种第19-20页
       ·分离和筛选第20-21页
       ·产物黄嘌呤氧化酶活性测定第21-22页
   ·黄嘌呤氧化酶菌株的鉴定方法第22-23页
     ·经典鉴定法第23页
     ·分子遗传学分类鉴定法第23页
   ·诱变株黄嘌呤氧化酶发酵工艺的研究第23-27页
     ·培养基组成的研究第23-25页
       ·水第23-24页
       ·碳源第24页
       ·氮源第24页
       ·无机盐类及微量元素第24-25页
       ·生长因子和产酶促进剂第25页
     ·响应面法第25-26页
     ·环境条件的研究第26-27页
       ·温度第27页
       ·pH值第27页
       ·溶氧第27页
   ·本课题的背景及主要研究内容第27-29页
第二章 黄嘌呤氧化酶产生菌的诱变选育第29-41页
   ·实验材料第29-31页
     ·菌种来源第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·主要仪器第30页
     ·培养基第30页
     ·溶液的配制第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·诱变方法第31-33页
       ·紫外线诱变第31页
       ·硫酸二乙酯(DES)诱变第31-32页
       ·亚硝酸诱变第32页
       ·盐酸羟胺诱变第32页
       ·紫外线与氯化锂复合诱变第32页
       ·紫外线与硫酸二乙酯(DES)复合诱变第32页
       ·紫外线与微波复合诱变第32-33页
     ·筛选方法第33页
       ·初筛第33页
       ·复筛第33页
     ·酶活测定方法第33-34页
     ·稳定性分析方法第34页
   ·结果与讨论第34-39页
     ·紫外诱变选育第34-35页
     ·硫酸二乙酯(DES)诱变选育第35页
     ·亚硝酸诱变选育第35-36页
     ·盐酸羟胺诱变选育第36页
     ·紫外与氯化锂复合诱变第36-37页
     ·紫外与硫酸二乙酯复合诱变第37页
     ·紫外与微波复合诱变第37-38页
     ·不同诱变株产酶高峰期的确定第38-39页
     ·传代稳定性考察第39页
   ·本章小结第39-41页
第三章 黄嘌呤氧化酶诱变菌株的鉴定第41-54页
   ·实验材料第41-44页
     ·菌株及引物第41页
     ·培养基第41-42页
     ·主要分子试剂第42页
     ·主要仪器设备第42-43页
     ·试剂配制第43-44页
   ·实验方法第44-48页
     ·菌种生理生化鉴定第44页
     ·菌体培养方法第44-45页
     ·菌株基因组的提取第45页
     ·16SrDNA 的 PCR 扩增第45-46页
       ·PCR扩增目的基因第45-46页
       ·PCR扩增产物的回收与纯化第46页
     ·测序用克隆载体与目的基因的连接第46-47页
       ·测序用克隆载体与目的基因的连接第46页
       ·感受态细胞的制备第46-47页
       ·质粒DNA的转化第47页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第47页
     ·目的基因的序列测定及相似性分析第47-48页
     ·系统进化树的构建第48页
   ·结果与讨论第48-52页
     ·菌株生理生化鉴定结果分析第48-49页
     ·菌株基因组提取结果分析第49-50页
     ·16SrDNA 基因片段的获得第50页
     ·重组质粒鉴定结果第50-52页
     ·构建 Arthrobacter sp.UW6 菌株的系统进化树第52页
   ·本章小结第52-54页
第四章 发酵条件的优化及酶学性质的初步研究第54-70页
   ·材料与方法第54-56页
     ·菌株第54页
     ·主要试剂第54-55页
     ·主要仪器第55页
     ·培养基第55页
     ·培养方法第55页
     ·分析方法第55页
     ·粗酶性质的初步研究第55-56页
       ·pH值对酶活性及稳定性的影响第55-56页
       ·温度对酶活性及稳定性的影响第56页
       ·金属离子对酶稳定性的影响第56页
   ·结果与讨论第56-69页
     ·培养基优化结果与分析第56-62页
       ·不同碳源对黄嘌呤氧化酶发酵的影响第56-57页
       ·不同氮源对黄嘌呤氧化酶发酵的影响第57页
       ·Plackett-Burman法结果与分析第57-58页
       ·最陡爬坡实验第58-59页
       ·Box-Behnken实验设计及结果第59-62页
       ·模型验证第62页
     ·发酵工艺优化结果与分析第62-66页
       ·初始pH值对产酶的影响第63页
       ·接种量对产酶的影响第63-64页
       ·装样量对产酶影响第64页
       ·摇床转速对产酶的影响第64-65页
       ·培养温度对产酶的影响第65页
       ·Arthrobacter sp.UW6的产酶进程曲线第65-66页
     ·优化结果实验验证第66页
     ·粗酶的酶学性质第66-69页
       ·pH值对XOD酶活性及稳定性的影响第66-67页
       ·温度对XOD酶活性及稳定性的影响第67-68页
       ·金属离子对XOD酶活性的影响第68-69页
   ·本章小结第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-78页
致谢第78-79页
个人简历第79页
攻读硕士期间发表论文情况第79页

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