中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-10页 |
第一章 绪论 | 第10-29页 |
·黄嘌呤氧化酶概述 | 第10-16页 |
·黄嘌呤氧化酶的一般性质 | 第10-11页 |
·黄嘌呤氧化还原酶的两种形式 | 第11-12页 |
·黄嘌呤氧化酶的底物特性及催化反应 | 第12-14页 |
·黄嘌呤氧化酶的抑制剂 | 第14-15页 |
·嘌呤结构类似性抑制物 | 第14页 |
·非嘌呤结构类抑制剂 | 第14-15页 |
·黄嘌呤氧化酶的应用 | 第15-16页 |
·黄嘌呤氧化酶的生理功能 | 第15页 |
·黄嘌呤氧化酶的病理功能 | 第15页 |
·检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力 | 第15-16页 |
·黄嘌呤氧化酶酶促产物的作用 | 第16页 |
·其它应用 | 第16页 |
·国内外来源于不同生物的黄嘌呤氧化酶的研究进展 | 第16-18页 |
·动物来源的 XOD | 第17页 |
·植物来源的 XOD | 第17页 |
·微生物来源的 XOD | 第17-18页 |
·黄嘌呤氧化酶生产菌的选育 | 第18-22页 |
·菌种选育的目标 | 第18页 |
·生产菌株的选育 | 第18-22页 |
·诱变育种 | 第19-20页 |
·分离和筛选 | 第20-21页 |
·产物黄嘌呤氧化酶活性测定 | 第21-22页 |
·黄嘌呤氧化酶菌株的鉴定方法 | 第22-23页 |
·经典鉴定法 | 第23页 |
·分子遗传学分类鉴定法 | 第23页 |
·诱变株黄嘌呤氧化酶发酵工艺的研究 | 第23-27页 |
·培养基组成的研究 | 第23-25页 |
·水 | 第23-24页 |
·碳源 | 第24页 |
·氮源 | 第24页 |
·无机盐类及微量元素 | 第24-25页 |
·生长因子和产酶促进剂 | 第25页 |
·响应面法 | 第25-26页 |
·环境条件的研究 | 第26-27页 |
·温度 | 第27页 |
·pH值 | 第27页 |
·溶氧 | 第27页 |
·本课题的背景及主要研究内容 | 第27-29页 |
第二章 黄嘌呤氧化酶产生菌的诱变选育 | 第29-41页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·菌种来源 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·培养基 | 第30页 |
·溶液的配制 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·诱变方法 | 第31-33页 |
·紫外线诱变 | 第31页 |
·硫酸二乙酯(DES)诱变 | 第31-32页 |
·亚硝酸诱变 | 第32页 |
·盐酸羟胺诱变 | 第32页 |
·紫外线与氯化锂复合诱变 | 第32页 |
·紫外线与硫酸二乙酯(DES)复合诱变 | 第32页 |
·紫外线与微波复合诱变 | 第32-33页 |
·筛选方法 | 第33页 |
·初筛 | 第33页 |
·复筛 | 第33页 |
·酶活测定方法 | 第33-34页 |
·稳定性分析方法 | 第34页 |
·结果与讨论 | 第34-39页 |
·紫外诱变选育 | 第34-35页 |
·硫酸二乙酯(DES)诱变选育 | 第35页 |
·亚硝酸诱变选育 | 第35-36页 |
·盐酸羟胺诱变选育 | 第36页 |
·紫外与氯化锂复合诱变 | 第36-37页 |
·紫外与硫酸二乙酯复合诱变 | 第37页 |
·紫外与微波复合诱变 | 第37-38页 |
·不同诱变株产酶高峰期的确定 | 第38-39页 |
·传代稳定性考察 | 第39页 |
·本章小结 | 第39-41页 |
第三章 黄嘌呤氧化酶诱变菌株的鉴定 | 第41-54页 |
·实验材料 | 第41-44页 |
·菌株及引物 | 第41页 |
·培养基 | 第41-42页 |
·主要分子试剂 | 第42页 |
·主要仪器设备 | 第42-43页 |
·试剂配制 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-48页 |
·菌种生理生化鉴定 | 第44页 |
·菌体培养方法 | 第44-45页 |
·菌株基因组的提取 | 第45页 |
·16SrDNA 的 PCR 扩增 | 第45-46页 |
·PCR扩增目的基因 | 第45-46页 |
·PCR扩增产物的回收与纯化 | 第46页 |
·测序用克隆载体与目的基因的连接 | 第46-47页 |
·测序用克隆载体与目的基因的连接 | 第46页 |
·感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
·质粒DNA的转化 | 第47页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第47页 |
·目的基因的序列测定及相似性分析 | 第47-48页 |
·系统进化树的构建 | 第48页 |
·结果与讨论 | 第48-52页 |
·菌株生理生化鉴定结果分析 | 第48-49页 |
·菌株基因组提取结果分析 | 第49-50页 |
·16SrDNA 基因片段的获得 | 第50页 |
·重组质粒鉴定结果 | 第50-52页 |
·构建 Arthrobacter sp.UW6 菌株的系统进化树 | 第52页 |
·本章小结 | 第52-54页 |
第四章 发酵条件的优化及酶学性质的初步研究 | 第54-70页 |
·材料与方法 | 第54-56页 |
·菌株 | 第54页 |
·主要试剂 | 第54-55页 |
·主要仪器 | 第55页 |
·培养基 | 第55页 |
·培养方法 | 第55页 |
·分析方法 | 第55页 |
·粗酶性质的初步研究 | 第55-56页 |
·pH值对酶活性及稳定性的影响 | 第55-56页 |
·温度对酶活性及稳定性的影响 | 第56页 |
·金属离子对酶稳定性的影响 | 第56页 |
·结果与讨论 | 第56-69页 |
·培养基优化结果与分析 | 第56-62页 |
·不同碳源对黄嘌呤氧化酶发酵的影响 | 第56-57页 |
·不同氮源对黄嘌呤氧化酶发酵的影响 | 第57页 |
·Plackett-Burman法结果与分析 | 第57-58页 |
·最陡爬坡实验 | 第58-59页 |
·Box-Behnken实验设计及结果 | 第59-62页 |
·模型验证 | 第62页 |
·发酵工艺优化结果与分析 | 第62-66页 |
·初始pH值对产酶的影响 | 第63页 |
·接种量对产酶的影响 | 第63-64页 |
·装样量对产酶影响 | 第64页 |
·摇床转速对产酶的影响 | 第64-65页 |
·培养温度对产酶的影响 | 第65页 |
·Arthrobacter sp.UW6的产酶进程曲线 | 第65-66页 |
·优化结果实验验证 | 第66页 |
·粗酶的酶学性质 | 第66-69页 |
·pH值对XOD酶活性及稳定性的影响 | 第66-67页 |
·温度对XOD酶活性及稳定性的影响 | 第67-68页 |
·金属离子对XOD酶活性的影响 | 第68-69页 |
·本章小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
个人简历 | 第79页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第79页 |