| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-29页 |
| ·黄嘌呤氧化酶概述 | 第10-16页 |
| ·黄嘌呤氧化酶的一般性质 | 第10-11页 |
| ·黄嘌呤氧化还原酶的两种形式 | 第11-12页 |
| ·黄嘌呤氧化酶的底物特性及催化反应 | 第12-14页 |
| ·黄嘌呤氧化酶的抑制剂 | 第14-15页 |
| ·嘌呤结构类似性抑制物 | 第14页 |
| ·非嘌呤结构类抑制剂 | 第14-15页 |
| ·黄嘌呤氧化酶的应用 | 第15-16页 |
| ·黄嘌呤氧化酶的生理功能 | 第15页 |
| ·黄嘌呤氧化酶的病理功能 | 第15页 |
| ·检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力 | 第15-16页 |
| ·黄嘌呤氧化酶酶促产物的作用 | 第16页 |
| ·其它应用 | 第16页 |
| ·国内外来源于不同生物的黄嘌呤氧化酶的研究进展 | 第16-18页 |
| ·动物来源的 XOD | 第17页 |
| ·植物来源的 XOD | 第17页 |
| ·微生物来源的 XOD | 第17-18页 |
| ·黄嘌呤氧化酶生产菌的选育 | 第18-22页 |
| ·菌种选育的目标 | 第18页 |
| ·生产菌株的选育 | 第18-22页 |
| ·诱变育种 | 第19-20页 |
| ·分离和筛选 | 第20-21页 |
| ·产物黄嘌呤氧化酶活性测定 | 第21-22页 |
| ·黄嘌呤氧化酶菌株的鉴定方法 | 第22-23页 |
| ·经典鉴定法 | 第23页 |
| ·分子遗传学分类鉴定法 | 第23页 |
| ·诱变株黄嘌呤氧化酶发酵工艺的研究 | 第23-27页 |
| ·培养基组成的研究 | 第23-25页 |
| ·水 | 第23-24页 |
| ·碳源 | 第24页 |
| ·氮源 | 第24页 |
| ·无机盐类及微量元素 | 第24-25页 |
| ·生长因子和产酶促进剂 | 第25页 |
| ·响应面法 | 第25-26页 |
| ·环境条件的研究 | 第26-27页 |
| ·温度 | 第27页 |
| ·pH值 | 第27页 |
| ·溶氧 | 第27页 |
| ·本课题的背景及主要研究内容 | 第27-29页 |
| 第二章 黄嘌呤氧化酶产生菌的诱变选育 | 第29-41页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·菌种来源 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·溶液的配制 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·诱变方法 | 第31-33页 |
| ·紫外线诱变 | 第31页 |
| ·硫酸二乙酯(DES)诱变 | 第31-32页 |
| ·亚硝酸诱变 | 第32页 |
| ·盐酸羟胺诱变 | 第32页 |
| ·紫外线与氯化锂复合诱变 | 第32页 |
| ·紫外线与硫酸二乙酯(DES)复合诱变 | 第32页 |
| ·紫外线与微波复合诱变 | 第32-33页 |
| ·筛选方法 | 第33页 |
| ·初筛 | 第33页 |
| ·复筛 | 第33页 |
| ·酶活测定方法 | 第33-34页 |
| ·稳定性分析方法 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-39页 |
| ·紫外诱变选育 | 第34-35页 |
| ·硫酸二乙酯(DES)诱变选育 | 第35页 |
| ·亚硝酸诱变选育 | 第35-36页 |
| ·盐酸羟胺诱变选育 | 第36页 |
| ·紫外与氯化锂复合诱变 | 第36-37页 |
| ·紫外与硫酸二乙酯复合诱变 | 第37页 |
| ·紫外与微波复合诱变 | 第37-38页 |
| ·不同诱变株产酶高峰期的确定 | 第38-39页 |
| ·传代稳定性考察 | 第39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 第三章 黄嘌呤氧化酶诱变菌株的鉴定 | 第41-54页 |
| ·实验材料 | 第41-44页 |
| ·菌株及引物 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41-42页 |
| ·主要分子试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42-43页 |
| ·试剂配制 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·菌种生理生化鉴定 | 第44页 |
| ·菌体培养方法 | 第44-45页 |
| ·菌株基因组的提取 | 第45页 |
| ·16SrDNA 的 PCR 扩增 | 第45-46页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第45-46页 |
| ·PCR扩增产物的回收与纯化 | 第46页 |
| ·测序用克隆载体与目的基因的连接 | 第46-47页 |
| ·测序用克隆载体与目的基因的连接 | 第46页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第47页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第47页 |
| ·目的基因的序列测定及相似性分析 | 第47-48页 |
| ·系统进化树的构建 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-52页 |
| ·菌株生理生化鉴定结果分析 | 第48-49页 |
| ·菌株基因组提取结果分析 | 第49-50页 |
| ·16SrDNA 基因片段的获得 | 第50页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第50-52页 |
| ·构建 Arthrobacter sp.UW6 菌株的系统进化树 | 第52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 第四章 发酵条件的优化及酶学性质的初步研究 | 第54-70页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·菌株 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54-55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·培养基 | 第55页 |
| ·培养方法 | 第55页 |
| ·分析方法 | 第55页 |
| ·粗酶性质的初步研究 | 第55-56页 |
| ·pH值对酶活性及稳定性的影响 | 第55-56页 |
| ·温度对酶活性及稳定性的影响 | 第56页 |
| ·金属离子对酶稳定性的影响 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-69页 |
| ·培养基优化结果与分析 | 第56-62页 |
| ·不同碳源对黄嘌呤氧化酶发酵的影响 | 第56-57页 |
| ·不同氮源对黄嘌呤氧化酶发酵的影响 | 第57页 |
| ·Plackett-Burman法结果与分析 | 第57-58页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第58-59页 |
| ·Box-Behnken实验设计及结果 | 第59-62页 |
| ·模型验证 | 第62页 |
| ·发酵工艺优化结果与分析 | 第62-66页 |
| ·初始pH值对产酶的影响 | 第63页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第63-64页 |
| ·装样量对产酶影响 | 第64页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第64-65页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第65页 |
| ·Arthrobacter sp.UW6的产酶进程曲线 | 第65-66页 |
| ·优化结果实验验证 | 第66页 |
| ·粗酶的酶学性质 | 第66-69页 |
| ·pH值对XOD酶活性及稳定性的影响 | 第66-67页 |
| ·温度对XOD酶活性及稳定性的影响 | 第67-68页 |
| ·金属离子对XOD酶活性的影响 | 第68-69页 |
| ·本章小结 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第79页 |