摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 概述 | 第11-12页 |
1.2 国内外研究进展 | 第12-20页 |
1.2.1 纤维素酶表达调控因子研究进展 | 第12-15页 |
1.2.2 丝状真菌纤维素酶诱导表达机制 | 第15-20页 |
1.2.3 基于纤维素酶转录调控特性的理性改造 | 第20页 |
1.3 本论文立题依据与研究内容 | 第20-22页 |
1.3.1 立题依据及研究意义 | 第20-21页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第21-22页 |
第二章 匍枝根霉纤维二糖合成酶的发现及功能鉴定 | 第22-43页 |
2.1 前言 | 第22页 |
2.2 材料与方法 | 第22-28页 |
2.2.1 菌株、质粒和引物 | 第22-23页 |
2.2.2 培养基和培养条件 | 第23-24页 |
2.2.3 色谱法检测糖组分 | 第24页 |
2.2.4 基因克隆、表达及纯化 | 第24-25页 |
2.2.5 体外实验 | 第25-26页 |
2.2.6 缺陷株构建 | 第26-27页 |
2.2.7 荧光定量PCR | 第27页 |
2.2.8 酶活测定 | 第27-28页 |
2.3 结果与讨论 | 第28-42页 |
2.3.1 纤维素酶关键诱导因子的确定 | 第28-33页 |
2.3.2 纤维二糖合成酶CBS的基因克隆、表达及纯化 | 第33-36页 |
2.3.3 纤维二糖合成酶功能研究 | 第36-38页 |
2.3.4 CBS缺失对纤维素酶基因转录和表达水平的影响 | 第38-42页 |
2.4 本章小结 | 第42-43页 |
第三章 纤维素酶天然诱导因子纤维二糖的胞内合成途径研究 | 第43-54页 |
3.1 前言 | 第43页 |
3.2 实验材料与方法 | 第43-45页 |
3.2.1 菌株、质粒和引物 | 第43-44页 |
3.2.2 培养基和培养条件 | 第44页 |
3.2.3 基因克隆及分析 | 第44页 |
3.2.4 突变株构建 | 第44-45页 |
3.2.5 检测方法 | 第45页 |
3.3 结果与讨论 | 第45-53页 |
3.3.1 CBS糖基供体的确定 | 第45-49页 |
3.3.2 匍枝根霉胞内纤维二糖合成途径 | 第49页 |
3.3.3 纤维二糖合成酶结构功能研究 | 第49-53页 |
3.4 本章小结 | 第53-54页 |
第四章 纤维二糖合成酶基因的转录调控特性研究 | 第54-64页 |
4.1 前言 | 第54页 |
4.2 实验材料与方法 | 第54-56页 |
4.2.1 菌株、质粒和引物 | 第54-55页 |
4.2.2 培养基和培养条件 | 第55页 |
4.2.3 基因克隆及分析 | 第55页 |
4.2.4 缺陷株构建 | 第55-56页 |
4.2.5 过表达株构建 | 第56页 |
4.2.6 检测方法 | 第56页 |
4.3 结果与讨论 | 第56-63页 |
4.3.1 CBS调控元件分析 | 第56-57页 |
4.3.2 激活因子XYR1对CBS的调控特性研究 | 第57-60页 |
4.3.3 CBS在XYR1对纤维素酶表达调控中的作用研究 | 第60-62页 |
4.3.4 XYR1参与的纤维素酶表达调控机制研究 | 第62-63页 |
4.4 本章小结 | 第63-64页 |
第五章 碳代谢阻遏作用在纤维素酶合成调控中的特性研究 | 第64-74页 |
5.1 前言 | 第64页 |
5.2 实验材料与方法 | 第64-65页 |
5.2.1 菌株、质粒和引物 | 第64-65页 |
5.2.2 培养基和培养条件 | 第65页 |
5.2.3 目的基因扩增 | 第65页 |
5.2.4 缺陷株构建 | 第65页 |
5.2.5 转录水平及酶活测定 | 第65页 |
5.3 结果与讨论 | 第65-73页 |
5.3.1 转录因子CRE的基因克隆和序列分析 | 第65-66页 |
5.3.2 CRE对纤维素酶基因的转录调控特性研究 | 第66-70页 |
5.3.3 CRE对纤维二糖合成酶的作用研究 | 第70-72页 |
5.3.4 基于CRE调控特性利用葡萄糖产纤维素酶的研究 | 第72-73页 |
5.4 本章小结 | 第73-74页 |
第六章 纤维二糖合成酶调控纤维素酶基因转录模型的构建 | 第74-86页 |
6.1 前言 | 第74页 |
6.2 实验材料与方法 | 第74-76页 |
6.2.1 菌株、质粒和引物 | 第74-75页 |
6.2.2 培养基和培养条件 | 第75页 |
6.2.3 基因克隆及分析 | 第75页 |
6.2.4 突变株构建 | 第75-76页 |
6.2.5 过表达株构建 | 第76页 |
6.2.6 检测方法 | 第76页 |
6.3 结果与讨论 | 第76-84页 |
6.3.1 纤维二糖诱导纤维素酶基因转录途径研究 | 第76-78页 |
6.3.2 金属离子对纤维二糖合成酶基因转录的影响 | 第78-80页 |
6.3.3 匍枝根霉纤维素酶基因转录调控模型构建 | 第80-81页 |
6.3.4 匍枝根霉纤维素酶合成调控方案研究 | 第81-84页 |
6.4 本章小结 | 第84-86页 |
主要结论与展望 | 第86-88页 |
主要结论 | 第86-87页 |
展望 | 第87-88页 |
论文创新点 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第98页 |