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匍枝根霉纤维二糖合成酶的鉴定与调控机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略词表第7-11页
第一章 绪论第11-22页
    1.1 概述第11-12页
    1.2 国内外研究进展第12-20页
        1.2.1 纤维素酶表达调控因子研究进展第12-15页
        1.2.2 丝状真菌纤维素酶诱导表达机制第15-20页
        1.2.3 基于纤维素酶转录调控特性的理性改造第20页
    1.3 本论文立题依据与研究内容第20-22页
        1.3.1 立题依据及研究意义第20-21页
        1.3.2 主要研究内容第21-22页
第二章 匍枝根霉纤维二糖合成酶的发现及功能鉴定第22-43页
    2.1 前言第22页
    2.2 材料与方法第22-28页
        2.2.1 菌株、质粒和引物第22-23页
        2.2.2 培养基和培养条件第23-24页
        2.2.3 色谱法检测糖组分第24页
        2.2.4 基因克隆、表达及纯化第24-25页
        2.2.5 体外实验第25-26页
        2.2.6 缺陷株构建第26-27页
        2.2.7 荧光定量PCR第27页
        2.2.8 酶活测定第27-28页
    2.3 结果与讨论第28-42页
        2.3.1 纤维素酶关键诱导因子的确定第28-33页
        2.3.2 纤维二糖合成酶CBS的基因克隆、表达及纯化第33-36页
        2.3.3 纤维二糖合成酶功能研究第36-38页
        2.3.4 CBS缺失对纤维素酶基因转录和表达水平的影响第38-42页
    2.4 本章小结第42-43页
第三章 纤维素酶天然诱导因子纤维二糖的胞内合成途径研究第43-54页
    3.1 前言第43页
    3.2 实验材料与方法第43-45页
        3.2.1 菌株、质粒和引物第43-44页
        3.2.2 培养基和培养条件第44页
        3.2.3 基因克隆及分析第44页
        3.2.4 突变株构建第44-45页
        3.2.5 检测方法第45页
    3.3 结果与讨论第45-53页
        3.3.1 CBS糖基供体的确定第45-49页
        3.3.2 匍枝根霉胞内纤维二糖合成途径第49页
        3.3.3 纤维二糖合成酶结构功能研究第49-53页
    3.4 本章小结第53-54页
第四章 纤维二糖合成酶基因的转录调控特性研究第54-64页
    4.1 前言第54页
    4.2 实验材料与方法第54-56页
        4.2.1 菌株、质粒和引物第54-55页
        4.2.2 培养基和培养条件第55页
        4.2.3 基因克隆及分析第55页
        4.2.4 缺陷株构建第55-56页
        4.2.5 过表达株构建第56页
        4.2.6 检测方法第56页
    4.3 结果与讨论第56-63页
        4.3.1 CBS调控元件分析第56-57页
        4.3.2 激活因子XYR1对CBS的调控特性研究第57-60页
        4.3.3 CBS在XYR1对纤维素酶表达调控中的作用研究第60-62页
        4.3.4 XYR1参与的纤维素酶表达调控机制研究第62-63页
    4.4 本章小结第63-64页
第五章 碳代谢阻遏作用在纤维素酶合成调控中的特性研究第64-74页
    5.1 前言第64页
    5.2 实验材料与方法第64-65页
        5.2.1 菌株、质粒和引物第64-65页
        5.2.2 培养基和培养条件第65页
        5.2.3 目的基因扩增第65页
        5.2.4 缺陷株构建第65页
        5.2.5 转录水平及酶活测定第65页
    5.3 结果与讨论第65-73页
        5.3.1 转录因子CRE的基因克隆和序列分析第65-66页
        5.3.2 CRE对纤维素酶基因的转录调控特性研究第66-70页
        5.3.3 CRE对纤维二糖合成酶的作用研究第70-72页
        5.3.4 基于CRE调控特性利用葡萄糖产纤维素酶的研究第72-73页
    5.4 本章小结第73-74页
第六章 纤维二糖合成酶调控纤维素酶基因转录模型的构建第74-86页
    6.1 前言第74页
    6.2 实验材料与方法第74-76页
        6.2.1 菌株、质粒和引物第74-75页
        6.2.2 培养基和培养条件第75页
        6.2.3 基因克隆及分析第75页
        6.2.4 突变株构建第75-76页
        6.2.5 过表达株构建第76页
        6.2.6 检测方法第76页
    6.3 结果与讨论第76-84页
        6.3.1 纤维二糖诱导纤维素酶基因转录途径研究第76-78页
        6.3.2 金属离子对纤维二糖合成酶基因转录的影响第78-80页
        6.3.3 匍枝根霉纤维素酶基因转录调控模型构建第80-81页
        6.3.4 匍枝根霉纤维素酶合成调控方案研究第81-84页
    6.4 本章小结第84-86页
主要结论与展望第86-88页
    主要结论第86-87页
    展望第87-88页
论文创新点第88-90页
参考文献第90-98页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第98页

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