| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1.1 β-淀粉酶概述 | 第9-11页 |
| 1.1.1 淀粉酶的定义及分类 | 第9页 |
| 1.1.2 β-淀粉酶的简介 | 第9-10页 |
| 1.1.3 β-淀粉酶的应用 | 第10页 |
| 1.1.4 β-淀粉酶的生产 | 第10-11页 |
| 1.2 异源表达系统 | 第11-12页 |
| 1.2.1 大肠杆菌表达系统 | 第11页 |
| 1.2.2 枯草芽孢杆菌表达系统 | 第11-12页 |
| 1.2.3 地衣芽孢杆菌表达系统 | 第12页 |
| 1.3 微生物碳分解代谢物阻遏 | 第12-16页 |
| 1.3.1 细菌的PTS转运机制 | 第13-14页 |
| 1.3.2 革兰氏阴性菌的CCR机制 | 第14页 |
| 1.3.3 革兰氏阳性菌的CCR机制 | 第14-16页 |
| 1.3.4 碳代谢去阻遏的方法 | 第16页 |
| 1.4 立题意义与研究内容 | 第16-18页 |
| 1.4.1 立题意义 | 第16-17页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第18-19页 |
| 2.1.2 引物 | 第19页 |
| 2.1.3 主要工具酶及试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19-20页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 细菌基因组DNA提取 | 第20页 |
| 2.2.2 目的片段PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建 | 第21页 |
| 2.2.4 细菌感受态的制备及转化方法 | 第21页 |
| 2.2.5 重组菌株的构建 | 第21页 |
| 2.2.6 重组菌株的诱导发酵及重组β-淀粉酶粗酶液的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.7 重组β-淀粉酶酶活力的测定 | 第22页 |
| 2.2.8 蛋白含量测定及SDS-PAGE电泳 | 第22页 |
| 2.2.9 重组β-淀粉酶的纯化 | 第22页 |
| 2.2.10 重组枯草芽孢杆菌产β-淀粉酶发酵优化 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-41页 |
| 3.1 B.megatheriumβ-淀粉酶的异源表达 | 第24-28页 |
| 3.1.1 木糖诱导启动子和β-淀粉酶基因的克隆与分析 | 第24页 |
| 3.1.2 重组表达质粒的构建 | 第24-26页 |
| 3.1.3 重组β-淀粉酶的异源表达分析 | 第26-28页 |
| 3.2 重组β-淀粉酶酶学性质的研究 | 第28-31页 |
| 3.2.1 重组β-淀粉酶的纯化 | 第28-29页 |
| 3.2.2 温度对重组β-淀粉酶活力和稳定性的影响 | 第29页 |
| 3.2.3 pH对重组β-淀粉酶活力和稳定性的影响 | 第29-30页 |
| 3.2.4 金属离子对重组β-淀粉酶活性的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.5 重组β-淀粉酶的底物特异性 | 第31页 |
| 3.3 重组β-淀粉酶碳分解代谢物阻遏的研究 | 第31-41页 |
| 3.3.1 携带突变型amyM-CRE重组菌株的构建 | 第31-32页 |
| 3.3.2 突变amyM-CRE对重组菌表达β-淀粉酶的影响 | 第32-34页 |
| 3.3.3 重组菌株BAXMH4发酵培养基组分优化 | 第34-37页 |
| 3.3.4 重组菌株BAXMH4诱导发酵条件优化 | 第37-39页 |
| 3.3.5 重组菌株BAXMH4摇瓶发酵过程分析 | 第39-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
