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内源酶对刺参体壁自溶过程中蛋白质降解作用研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第8-15页
    1.1 海参概述第8页
    1.2 水产品自溶研现状第8-10页
        1.2.1 水产品自溶及影响因素第8-9页
        1.2.2 海参自溶及研究现状第9-10页
    1.3 动物蛋白研究进展第10-14页
        1.3.1 肌原纤维的特性研究第10-11页
        1.3.2 胶原蛋白研究进展第11-14页
            1.3.2.1 胶原蛋白的特征第11-12页
            1.3.2.2 胶原蛋白的提取第12-13页
            1.3.2.3 海参胶原蛋白第13-14页
    1.4 本课题研究的内容及意义第14-15页
第二章 材料与方法第15-28页
    2.1 实验材料第15-18页
        2.1.1 材料第15页
        2.1.2 主要实验仪器第15-16页
        2.1.3 主要实验试剂第16-18页
    2.2 实验方法第18-28页
        2.2.1 主要试剂配制第18-21页
            2.2.1.1 SDS-PAGE电泳相关试剂的配制第18-19页
            2.2.1.2 SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的配制第19页
            2.2.1.3 明胶酶谱相关试剂配制第19-20页
            2.2.1.4 M缓冲液配制第20页
            2.2.1.5 蛋白质提取液第20页
            2.2.1.6 pH9缓冲液(20mmol/L Tris,含 10mmol/L CaCl_2)第20页
            2.2.1.7 pH7.2 磷酸盐缓冲液(含 0.5%(w/v)SDS)第20页
            2.2.1.8 20%三氯乙酸(TCA)溶液的配制第20页
            2.2.1.9 Folin-酚溶液的配制第20-21页
            2.2.1.10 羟脯氨酸测定相关溶液的配制第21页
        2.2.2 Folin-酚法绘制蛋白质标准曲线第21-22页
            2.2.2.1 牛血清蛋白标准曲线第21-22页
            2.2.2.2 酪氨酸标准曲线第22页
        2.2.3 羟脯氨酸标准曲线测定第22-24页
        2.2.4 原料预处理第24页
        2.2.5 海参肌肉层蛋白质提取第24-25页
            2.2.5.1 不同pH下海参肌肉层蛋白溶液的制备第24页
            2.2.5.2 不同温度下海参肌肉层蛋白溶液的制备第24页
            2.2.5.3 不同温度下海参肌肉层蛋白溶液的制备第24页
            2.2.5.4 不同抑制剂存在条件下海参肌肉层蛋白溶液的制备第24-25页
        2.2.6 海参肌肉层自溶过程的SDS-PAGE电泳分析第25页
        2.2.7 海参肌肉层自溶过程TCA可溶性寡肽含量的测定第25页
        2.2.8 海参肠胶原酶的制备第25页
        2.2.9 海参肠胶原降解酶明胶酶谱检测第25页
        2.2.10 抑制剂对海参肠胶原酶的影响研究第25页
        2.2.11 海参体壁粗胶原纤维的提取第25-26页
        2.2.12 海参体壁酶促溶性胶原蛋白(PSC)的提取第26页
        2.2.13 海参肠胶原酶酶解PSC的研究第26-27页
        2.2.14 温度对PSC降解的影响第27页
        2.2.15 酶解过程中TCA可溶性寡肽含量的测定第27页
        2.2.16 酶解过程中羟脯氨酸含量的测定第27-28页
第三章 结果与讨论第28-41页
    3.1 海参肌肉层蛋白自溶最适条件的确定第28-33页
        3.1.1 不同pH条件下海参肌肉层蛋白质的降解及SDS-PAGE电泳分析第28-29页
        3.1.2 不同温度条件下海参肌肉层蛋白质的降解及SDS-PAGE电泳分析第29-30页
        3.1.3 海参肌肉层蛋白质随时间的降解变化第30-33页
    3.2 抑制剂对海参肌肉层自溶的影响第33-35页
    3.3 海参肠胶原酶对海参体壁酶促溶性胶原的水解作用第35-41页
        3.3.1 海参肠胶原酶的制备与明胶酶谱检测第35页
        3.3.2 抑制剂对海参肠胶原酶的影响第35-36页
        3.3.3 不同pH条件下海参肠胶原酶酶解PSC的SDS-PAGE电泳分析第36-38页
        3.3.4 温度对海参肠胶原酶酶解PSC的影响第38页
        3.3.5 海参肠胶原酶酶解PSC后TCA-可溶性寡肽含量变化第38-39页
        3.3.6 海参肠胶原酶酶解PSC后羟脯氨酸含量变化第39-41页
第四章 结论第41-42页
参考文献第42-48页
致谢第48-49页
附录第49页

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