| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略符号说明 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 食品过敏及致敏机制 | 第12-14页 |
| 1.1.1 食品过敏的定义 | 第12页 |
| 1.1.2 食品过敏原的种类及其特点 | 第12-13页 |
| 1.1.3 食品致敏的机制 | 第13-14页 |
| 1.2 食品过敏原检测方法 | 第14-19页 |
| 1.2.1 过敏原体内检测方法 | 第15页 |
| 1.2.2 过敏原体外检测方法 | 第15-19页 |
| 1.3 细胞传感技术与应用 | 第19-28页 |
| 1.3.1 细胞传感概述 | 第19页 |
| 1.3.2 细胞传感的工作原理 | 第19-20页 |
| 1.3.3 细胞的固定化方法 | 第20页 |
| 1.3.4 细胞传感检测技术 | 第20-26页 |
| 1.3.5 肥大细胞及其在细胞传感中的应用 | 第26-28页 |
| 1.4 立题背景及意义 | 第28页 |
| 1.5 本课题的主要研究内容 | 第28-31页 |
| 第二章 小鼠致敏模型在食品过敏原分析中的应用 | 第31-41页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第31-32页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.2 设备和仪器 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.3.1 过敏蛋白的制备 | 第32页 |
| 2.3.2 考马斯亮蓝法测定过敏原蛋白质的浓度 | 第32-33页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE分析鉴定过敏原 | 第33页 |
| 2.3.4 过敏症小鼠模型建立 | 第33页 |
| 2.3.5 血清IgE效价的测定 | 第33-34页 |
| 2.3.6 小鼠腹腔肥大细胞分离采集 | 第34页 |
| 2.3.7 体外类胰蛋白酶定向释放测定 | 第34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-40页 |
| 2.4.1 牛奶、河虾致敏组分的分离鉴定 | 第34-35页 |
| 2.4.2 ICR小鼠免疫反应 | 第35页 |
| 2.4.3 小鼠致敏肥大细胞分离纯化及光镜观察 | 第35-37页 |
| 2.4.4 小鼠免疫血清IgE的检测 | 第37-39页 |
| 2.4.5 类胰蛋白酶释放率测定结果 | 第39-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 电化学肥大细胞传感器检测食品过敏原 | 第41-56页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第41-42页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第41-42页 |
| 3.2.2 设备和仪器 | 第42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.3.1 河虾过敏原的提取和纯化 | 第42页 |
| 3.3.2 金纳米粒子/半胱氨酸修饰的金电极的制备 | 第42-43页 |
| 3.3.3 肥大细胞培养与固定 | 第43-44页 |
| 3.3.4 肥大细胞电化学检测 | 第44页 |
| 3.3.5 肥大细胞体外 β-己糖胺酶定向释放率测定 | 第44-45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-55页 |
| 3.4.1 肥大细胞电化学传感器制备原理及表征 | 第45-46页 |
| 3.4.2 电极表面修饰材料表征 | 第46-48页 |
| 3.4.3 肥大细胞传感器电化学表征 | 第48-49页 |
| 3.4.4 河虾过敏原肌球蛋白分离纯化 | 第49-50页 |
| 3.4.5 肥大细胞电化学传感器检测食品过敏原研究 | 第50-53页 |
| 3.4.6 肥大细胞电化学传感器特异性、重现性和稳定性研究 | 第53-55页 |
| 3.5 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 荧光肥大细胞传感器检测食品过敏原 | 第56-72页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第56-57页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第56-57页 |
| 4.2.2 设备和仪器 | 第57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-60页 |
| 4.3.1 CD63-EGFP荧光质粒的构建 | 第57页 |
| 4.3.2 肥大细胞的培养和荧光质粒的转染 | 第57-58页 |
| 4.3.3 Western Blotting检测CD63-EGFP嵌合蛋白的表达 | 第58页 |
| 4.3.4 肥大细胞转染后细胞增殖活性分析 | 第58-59页 |
| 4.3.5 荧光肥大细胞传感器检测过敏原研究 | 第59页 |
| 4.3.6 肥大细胞体外 β-己糖胺酶定向释放率测定 | 第59页 |
| 4.3.7 鱼小清蛋白提取 | 第59-60页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第60-71页 |
| 4.4.1 荧光肥大细胞传感器制备原理 | 第60-61页 |
| 4.4.2 CD63-EGFP荧光质粒的成功构建与表达 | 第61-63页 |
| 4.4.3 肥大细胞荧光传感器检测鱼小清蛋白研究 | 第63-68页 |
| 4.4.4 荧光肥大细胞传感器检测三种淡水鱼实际样品研究 | 第68-69页 |
| 4.4.5 荧光肥大细胞传感器特异性、重现性和稳定性研究 | 第69-71页 |
| 4.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 第五章 荧光磁珠肥大细胞传感器检测食品过敏原 | 第72-91页 |
| 5.1 引言 | 第72页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第72-73页 |
| 5.2.1 材料与试剂 | 第72-73页 |
| 5.2.2 设备和仪器 | 第73页 |
| 5.3 实验方法 | 第73-76页 |
| 5.3.1 荧光磁性纳米材料的制备 | 第73-74页 |
| 5.3.2 肥大细胞培养和MFNPs磁转染 | 第74页 |
| 5.3.3 磁转染后RBL-2H3 肥大细胞细胞增殖及活性分析 | 第74-75页 |
| 5.3.4 荧光磁珠肥大细胞传感器检测过敏原研究 | 第75-76页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第76-90页 |
| 5.4.1 荧光磁珠肥大细胞传感器制备原理 | 第76-77页 |
| 5.4.2 荧光磁珠MFNPs的表征 | 第77-81页 |
| 5.4.3 CMFNPs转染肥大细胞及细胞毒性分析 | 第81-83页 |
| 5.4.4 荧光磁珠肥大细胞传感器电化学表征 | 第83-85页 |
| 5.4.5 肥大细胞传感器检测食品过敏原研究 | 第85-87页 |
| 5.4.6 荧光磁珠肥大细胞传感器特异性、重现性和稳定性研究 | 第87-90页 |
| 5.5 本章小结 | 第90-91页 |
| 第六章 细胞共培养微流控芯片在食品过敏原评价中的应用 | 第91-113页 |
| 6.1 引言 | 第91-92页 |
| 6.2 材料与仪器 | 第92页 |
| 6.2.1 材料与试剂 | 第92页 |
| 6.2.2 设备和仪器 | 第92页 |
| 6.3 实验方法 | 第92-96页 |
| 6.3.1 细胞共培养微流控芯片的设计与制作 | 第92-94页 |
| 6.3.2 微流控芯片中的细胞共培养 | 第94-95页 |
| 6.3.3 DNP-BSA对细胞共培养体系炎症因子IL-6、INF-γ、TNF-α 生成及分泌的影响 | 第95页 |
| 6.3.4 细胞共培养微流控芯片电化学分析 | 第95-96页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第96-112页 |
| 6.4.1 细胞共培养微流控芯片设计与制作 | 第96-99页 |
| 6.4.2 微流控芯片中细胞共培养体系的建立 | 第99-100页 |
| 6.4.3 微流控芯片中细胞共培养体系炎症因子释放研究 | 第100-106页 |
| 6.4.4 细胞共培养微流控芯片电化学阻抗测试分析 | 第106-112页 |
| 6.5 本章小结 | 第112-113页 |
| 主要结论与展望 | 第113-115页 |
| 主要结论 | 第113-114页 |
| 展望 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-126页 |
| 本论文创新点 | 第126-127页 |
| 附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第127页 |
