| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·甾体药物研究进展 | 第8-10页 |
| ·甾体化合物概述 | 第8页 |
| ·甾体药物概述 | 第8-9页 |
| ·国内外甾体药物的发展现状 | 第9-10页 |
| ·雄甾烯酮概述 | 第10-13页 |
| ·雄甾烯酮的理化性质 | 第10页 |
| ·微生物降解植物甾醇为雄甾烯酮机理研究 | 第10-12页 |
| ·雄甾烯酮的研究现状 | 第12-13页 |
| ·菌种选育方法概述 | 第13-14页 |
| ·传统诱变育种方法 | 第13页 |
| ·常压室温等离子体(ARTP)诱变方法介绍 | 第13-14页 |
| ·目的菌株筛选方法介绍 | 第14页 |
| ·蛋白质组学 | 第14-15页 |
| ·蛋白质组学简介 | 第14页 |
| ·蛋白质组学主要研究技术 | 第14-15页 |
| ·立题意义 | 第15页 |
| ·本课题主要的研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-28页 |
| ·实验材料 | 第17-22页 |
| ·实验仪器 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·菌株与质粒 | 第18页 |
| ·培养基和培养条件及其优化 | 第18-19页 |
| ·PCR引物设计以及ksdd序列测定 | 第19-21页 |
| ·主要溶液的配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·ARTP诱变新金色分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum ZAD) | 第22页 |
| ·高产AD菌株的快速筛选 | 第22-24页 |
| ·诱变菌株遗传稳定性验证 | 第24页 |
| ·M. neoaurum ZADF-4 降解植物甾醇的 2-DE分析 | 第24-26页 |
| ·目的蛋白的质谱鉴定 | 第26页 |
| ·qPCR检测差异蛋白的转录水平 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第28-47页 |
| ·ARTP诱变致死率曲线的绘制 | 第28页 |
| ·高产AD诱变菌株的快速筛选 | 第28-32页 |
| ·滤膜初筛 | 第28-29页 |
| ·KSDD酶活测定和摇瓶复筛 | 第29-31页 |
| ·ksdd基因序列比对与KSDD氨基酸序列分析 | 第31页 |
| ·变异菌株M. neoaurum ZADF-4 的遗传稳定性研究 | 第31-32页 |
| ·M. neoaurum ZADF-4 发酵培养条件优化 | 第32-41页 |
| ·不同碳源对M. neoaurum ZADF-4 的影响 | 第32-33页 |
| ·葡萄糖浓度梯度优化实验 | 第33-34页 |
| ·不同氮源对M. neoaurum ZADF-4 的影响 | 第34页 |
| ·大豆蛋白胨浓度梯度优化实验 | 第34-35页 |
| ·不同底物浓度对M. neoaurum ZADF-4 中AD产量的影响 | 第35-36页 |
| ·K2HPO4对变异菌株M. neoaurum ZADF-4 生长及AD产量的影响 | 第36页 |
| ·MgSO4浓度对变异菌株M. neoaurum ZADF-4 生长和AD产量的影响 | 第36-37页 |
| ·MnCl2浓度对变异菌株M. neoaurum ZADF-4 生长和AD产量的影响 | 第37页 |
| ·正交优化培养基组分 | 第37-38页 |
| ·助溶剂与底物浓度比对M. neoaurum ZADF-4 中AD产量的影响 | 第38-39页 |
| ·温度对变异菌株M. neoaurum ZADF-4 生长和AD产量的影响 | 第39-40页 |
| ·接种量对变异菌株M. neoaurum ZADF-4 生长和AD产量的影响 | 第40页 |
| ·转速对变异菌株M. neoaurum ZADF-4 生长和AD产量的影响 | 第40-41页 |
| ·变异菌株M. neoaurum ZADF-4 的 5 L发酵罐实验 | 第41页 |
| ·M. neoaurum ZADF-4 添加植物甾醇与否两种条件下的蛋白组学研究 | 第41-47页 |
| ·添加植物甾醇与否两种条件下M. neoaurum ZADF-4 全细胞蛋白的 2-DE图谱分析 | 第41-44页 |
| ·显著差异蛋白的质谱鉴定 | 第44页 |
| ·差异蛋白功能分析 | 第44-45页 |
| ·关键差异蛋白定量PCR验证以及与其他转录组实验结果比较 | 第45-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 主要结论 | 第47页 |
| 展望 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录I：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54-55页 |
| 附录II：出发菌株与变异菌株的ksdd基因序列 | 第55-56页 |
