摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
前言 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-21页 |
1 沙门氏菌免疫学检测方法的研究进展 | 第11-18页 |
·免疫荧光标记技术 | 第12页 |
·免疫扩散技术 | 第12页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA)技术 | 第12-15页 |
·免疫印迹技术 | 第15-16页 |
·免疫沉淀 | 第16页 |
·免疫磁性分离(IMS)技术 | 第16-17页 |
·协同凝集试验 | 第17页 |
·免疫传感器 | 第17-18页 |
2 沙门氏菌鞭毛蛋白的研究进展 | 第18-21页 |
课题技术路线 | 第21-23页 |
第一章 鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白基因fliC的克隆及其在E.coli中的表达 | 第23-33页 |
1 材料 | 第23-24页 |
·质粒与菌种 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
2 方法 | 第24-29页 |
·细菌的培养 | 第24页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第24页 |
·引物设计 | 第24-25页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第25页 |
·质粒pET-28a(+)的提取 | 第25-26页 |
·pET-28a(+)-F表达载体构建 | 第26-27页 |
·细菌的转化 | 第27页 |
·表达菌的鉴定 | 第27-29页 |
3 结果与分析 | 第29-31页 |
·沙门氏菌fliC基因片段的扩增和鉴定 | 第29页 |
·重组质粒pET28a-flic酶切鉴定和测序验证 | 第29-31页 |
·重组质粒的表达 | 第31页 |
4 讨论 | 第31-32页 |
5 结论 | 第32-33页 |
第二章 鼠伤寒沙门氏菌Ⅰ相鞭毛蛋白的纯化及鉴定 | 第33-39页 |
1 材料 | 第33-34页 |
·菌株 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
2 方法 | 第34-36页 |
·pET-28a(+)-F-BL21(DE3)pLysS表达菌的大量诱导与纯化 | 第34-35页 |
·重组蛋白pET-28a(+)-F的鉴定 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-38页 |
·蛋白可溶性分析 | 第36页 |
·重组蛋白纯化产物的SDS-PAGE鉴定结果 | 第36-37页 |
·FliC蛋白量测定 | 第37页 |
·Western-blot鉴定结果 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
第三章 FliC多克隆抗体的制备 | 第39-45页 |
1 材料 | 第39-40页 |
·实验动物 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·实验仪器 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-41页 |
·抗原乳化 | 第40页 |
·动物免疫 | 第40页 |
·抗体效价测定 | 第40-41页 |
·抗血清特异性的测定 | 第41页 |
3 结果与分析 | 第41-43页 |
·血清效价的测定 | 第41-42页 |
·抗体特异性检测结果 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43页 |
5 结论 | 第43-45页 |
全文结论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-55页 |
攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第55页 |