目录 | 第1-7页 |
本研究的创新之处 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略语(Abbreviations) | 第13-15页 |
第一部分 DON无毒phage-ELISA检测方法的建立 | 第15-99页 |
1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇文献综述 | 第15-35页 |
·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的发现 | 第15页 |
·脱氧雪腐镰刀菌烯醇的理化性质 | 第15-18页 |
·谷物及其制品DON的污染情况 | 第18-19页 |
·DON的毒性和作用机理 | 第19-25页 |
·DON的急性毒性 | 第20页 |
·DON的吸收及代谢 | 第20-21页 |
·DON的免疫毒性 | 第21-24页 |
·DON的细胞毒性效应 | 第24-25页 |
·DON的生殖毒性 | 第25页 |
·DON的提取、纯化与检测 | 第25-32页 |
·DON的提取技术 | 第26页 |
·DON的净化技术 | 第26-28页 |
·DON的检测技术 | 第28-32页 |
·DON的防控 | 第32-33页 |
·选题目的和意义 | 第33-35页 |
2 材料与方法 | 第35-66页 |
·试剂与仪器 | 第35-39页 |
·实验方法和步骤 | 第39-66页 |
·MBSA(Modified Bovine Serum Albumen)的制备 | 第39页 |
·DON免疫抗原(DON-MBSA)的制备 | 第39-40页 |
·DON检测抗原(DON-HG-OVA)的制备 | 第40-42页 |
·抗DON多克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
·抗DON单克隆抗体的制备 | 第43-49页 |
·抗DON单克隆抗体特性的鉴定 | 第49-52页 |
·脱氧雪腐镰刀菌烯醇酶联免疫吸附检测方法的建立 | 第52-54页 |
·DON单克隆抗体免疫亲和层析柱的研制 | 第54-57页 |
·DON噬菌体七肽模似表位的淘选及应用 | 第57-63页 |
·DON无毒间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第63-66页 |
3 结果 | 第66-88页 |
·DON人工抗原的制备及免疫效果 | 第66-69页 |
·DON—HG的制备(封闭、接臂、解封闭) | 第66-67页 |
·DON—HG与载体蛋白的偶联(3-HG-DON-OVA的制备) | 第67-68页 |
·DON免疫抗原(DON-MBSA)的制备及免疫BALB/c小鼠 | 第68-69页 |
·抗DON单克隆抗体的制备 | 第69-70页 |
·细胞融合 | 第69页 |
·杂交瘤细胞的筛选 | 第69页 |
·抗DON单克隆抗体的生产和纯化 | 第69-70页 |
·抗DON单克隆抗体的鉴定 | 第70-73页 |
·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第70-71页 |
·抗DON单克隆抗体的类别和亚类鉴定 | 第71页 |
·杂交瘤细胞12D1分泌抗体的稳定性 | 第71页 |
·单克隆抗体亲和力常数的测定 | 第71-72页 |
·抗DON单克隆抗体特异性测定结果 | 第72-73页 |
·DON间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第73-78页 |
·DON间接竞争ELISA标准曲线 | 第73-74页 |
·甲醇浓度对ELISA的影响 | 第74页 |
·不同提取液对DON回收的影响 | 第74-75页 |
·小麦、玉米样品DON加标回收检测结果 | 第75页 |
·间接竞争ELISA法与进口ELISA试剂盒检测样品DON结果 | 第75-76页 |
·自建的ELISA检测饲料样品中DON结果 | 第76-78页 |
·DON免疫亲和层析柱的研制 | 第78-81页 |
·脱氧雪腐镰刀菌烯醇醇HPLC检测方法的建立 | 第78-79页 |
·免疫亲和柱使用条件 | 第79页 |
·DON免疫亲和柱洗脱液的选择 | 第79页 |
·DON免疫亲和柱性能评价 | 第79-81页 |
·免疫亲和柱-HPLC法检测小麦、玉米和饲料中DON含量 | 第81页 |
·DON噬菌体七肽模似表位的淘选及应用 | 第81-88页 |
·大肠杆菌E. coli ER2738生长曲线的测定 | 第81-82页 |
·亲和淘选结果 | 第82-83页 |
·噬菌体阳性克隆的鉴定 | 第83-84页 |
·阳性噬菌体竞争抑制曲线 | 第84-85页 |
·DON无毒ELISA检测方法(phage-ELISA)的建立及应用 | 第85-88页 |
4 讨论 | 第88-98页 |
·DON人工抗原的制备 | 第88-92页 |
·载体蛋白的选择 | 第88-89页 |
·小分子偶联基团的选择 | 第89页 |
·偶联方法的选择 | 第89-91页 |
·DON羟基保护 | 第91页 |
·DON检测抗原的制各 | 第91-92页 |
·抗DON单克隆抗体的制备 | 第92-94页 |
·DON的免疫检测 | 第94-95页 |
·DON七肽模似表位的淘选 | 第95-98页 |
5 小结 | 第98-99页 |
第二部分 展青霉素免疫以检测初探 | 第99-143页 |
6 展青霉素文献综述 | 第99-105页 |
·展青霉素理化性质 | 第99页 |
·展青霉素的主要产生菌 | 第99-100页 |
·食品中展青霉素的污染情况 | 第100页 |
·展青霉素的毒性 | 第100-102页 |
·急性和亚急性毒性 | 第100页 |
·致癌性 | 第100-101页 |
·致畸、致突变作用 | 第101页 |
·对免疫系统的影响 | 第101-102页 |
·展青霉素的检测 | 第102-104页 |
·薄层色谱法(TLC) | 第102页 |
·气相色谱法(GC) | 第102-103页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第103页 |
·免疫学检测方法 | 第103-104页 |
·展青霉毒素的防控 | 第104-105页 |
7 材料与方法 | 第105-112页 |
·主要实验材料 | 第105-106页 |
·实验方法和步骤 | 第106-112页 |
·展青霉素人工抗原(PAT-HG-OVA)的制备 | 第106-107页 |
·展青霉素人工抗原PAT-MBSA的制备 | 第107-108页 |
·抗展青霉素多克隆抗体的制各 | 第108-109页 |
·抗展青霉素单克隆抗体的研究 | 第109-110页 |
·展青霉素结构类似物的合成 | 第110-112页 |
8 结果 | 第112-122页 |
·展青霉素活化结果 | 第112-113页 |
·PAT-HG与载体蛋白的偶联 | 第113页 |
·抗展青霉素多克隆抗体的制备 | 第113-114页 |
·抗展青霉素单克隆抗体的研究 | 第114页 |
·展青霉素结构类似物的合成结果 | 第114-120页 |
·化合物B(4-羟基-4H-5,6-二氢-苯并呋喃)的合成 | 第114页 |
·化合物C(2-羧亚甲基-3-羟基-环己酮)的合成 | 第114-117页 |
·化合物D(2-甲酯亚甲基3-3-羟基-环己酮)的合成 | 第117-118页 |
·展青霉素结构类似物(4-羟基-4H-5,6-二氢-苯并呋喃(3,2C)-2-酮)的合成 | 第118-120页 |
·展青霉素结构类似物稳定性结果 | 第120-122页 |
9 讨论 | 第122-127页 |
·展青霉素人工抗原及多克隆抗体的制备 | 第122-124页 |
·展青霉素结构类似物的合成 | 第124-127页 |
10 小结 | 第127-128页 |
11 参考文献 | 第128-142页 |
12 致谢 | 第142-143页 |
个人简厉 | 第143页 |
13 博士研究生期间撰写的学术论文 | 第143页 |