| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-37页 |
| ·概述 | 第11页 |
| ·燃料酒精 | 第11-17页 |
| ·燃料酒精的历史与现状 | 第11-12页 |
| ·国内外概况 | 第12-14页 |
| ·发展燃料酒精的意义 | 第14-16页 |
| ·我国发展燃料酒精的可行性和紧迫性 | 第16-17页 |
| ·利用纤维质原料进行酒精生产 | 第17-19页 |
| ·工业酵母的遗传育种 | 第19-26页 |
| ·遗传工程 | 第19-20页 |
| ·同源重组技术 | 第20-22页 |
| ·工业微生物的遗传育种 | 第22页 |
| ·工业酵母的遗传工程 | 第22-23页 |
| ·工业酵母菌株重组的筛选标记 | 第23-24页 |
| ·酿酒酵母的同源重组 | 第24页 |
| ·整合型酵母转化机制 | 第24-26页 |
| ·酒精发酵生产的酵母菌株及其改造 | 第26-27页 |
| ·立题意义与本论文研究内容 | 第27-30页 |
| ·我国推行燃料酒精存在的问题 | 第27-28页 |
| ·课题意义 | 第28-29页 |
| ·研究内容 | 第29-30页 |
| ·参考文献 | 第30-37页 |
| 第二章 浓醪发酵酒精醪液的HPLC分析 | 第37-48页 |
| ·实验材料与方法 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·主要仪器与设备 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-46页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第39-41页 |
| ·分离效果 | 第41-42页 |
| ·回收率实验 | 第42-43页 |
| ·酒糟经过不同处理方法后的分析结果比较 | 第43页 |
| ·糖分析方法小结 | 第43-44页 |
| ·浓醪发酵酒精醪液中甘油含量的分析 | 第44-45页 |
| ·碳水化合物分离柱分析时各物质的最低检测限 | 第45页 |
| ·分析与讨论 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46页 |
| ·参考文献 | 第46-48页 |
| 第三章 酿酒酵母蜜二糖代谢途径的构建 | 第48-59页 |
| ·材料与方法 | 第48-54页 |
| ·菌种和质粒 | 第48-49页 |
| ·培养基、工具酶和试剂 | 第49-50页 |
| ·仪器与设备 | 第50页 |
| ·引物设计及目的基因的PCR 扩增 | 第50页 |
| ·酵母基因组DNA 的制备 | 第50-51页 |
| ·常规基因克隆操作方法 | 第51-52页 |
| ·S. cerevisiae W303-1A 电穿孔转化法 | 第52-53页 |
| ·酿酒酵母细胞裂解液的制备 | 第53页 |
| ·α-半乳糖苷酶酶活的测定 | 第53页 |
| ·对硝基酚-吸光度标准曲线绘制 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·PCR 扩增目的基因mel | 第54-55页 |
| ·mel 的克隆与表达 | 第55-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| ·参考文献 | 第58-59页 |
| 第四章 酿酒酵母纤维二糖代谢途径的构建 | 第59-68页 |
| ·材料与方法 | 第59-62页 |
| ·菌种和质粒 | 第59页 |
| ·培养基、工具酶和试剂 | 第59-61页 |
| ·主要仪器和设备 | 第61页 |
| ·引物设计及目的基因的PCR 扩增 | 第61页 |
| ·里氏木霉总RNA 的提取 | 第61-62页 |
| ·常规基因克隆操作方法 | 第62页 |
| ·S. cerevisiae W303-1A 电穿孔转化法 | 第62页 |
| ·细胞裂解液的制备 | 第62页 |
| ·酶活的测定 | 第62页 |
| ·对硝基酚-吸光度标准曲线绘制 | 第62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-66页 |
| ·总RNA 提取及样品的分析 | 第62-63页 |
| ·从总RNA 中纯化mRNA | 第63页 |
| ·PCR 扩增目的基因bgl | 第63-64页 |
| ·基因bgl 的克隆与表达 | 第64-66页 |
| ·外源基因表达能力验证 | 第66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| ·参考文献 | 第67-68页 |
| 第五章 酿酒酵母纤维二糖和蜜二糖代谢途径的搭建及3-磷酸甘油脱氢酶基因的敲除 | 第68-81页 |
| ·材料与方法 | 第68-71页 |
| ·菌种和质粒 | 第68页 |
| ·培养基、工具酶和试剂 | 第68-69页 |
| ·仪器与设备 | 第69页 |
| ·引物设计及目的基因的PCR 扩增 | 第69-70页 |
| ·常规基因克隆操作方法 | 第70页 |
| ·S. cerevisiae Y 电穿孔转化法 | 第70页 |
| ·个体与群体形态观察 | 第70-71页 |
| ·培养液甘油测定 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-79页 |
| ·重组质粒构建 | 第71-73页 |
| ·PCR 扩增 | 第73页 |
| ·目的基因在工业酿酒酵母染色体上的整合 | 第73-74页 |
| ·整合转化子的验证 | 第74-75页 |
| ·整合子基本性状的考察 | 第75-79页 |
| ·本章小结 | 第79页 |
| ·参考文献 | 第79-81页 |
| 第六章 工程菌的应用试验 | 第81-94页 |
| ·实验材料与方法 | 第81-82页 |
| ·实验材料 | 第81页 |
| ·主要仪器与设备 | 第81-82页 |
| ·实验方法 | 第82页 |
| ·实验结果与讨论 | 第82-93页 |
| ·工程菌S. cerevisiae MG1 发酵试验 | 第82-85页 |
| ·工程菌 S.cerevisiae CG1 发酵试验 | 第85-91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| ·本章小结 | 第93页 |
| ·参考文献 | 第93-94页 |
| 第七章 酿酒酵母基因工程菌浓醪酒糟饲料的可行性研究与安全性评价 | 第94-102页 |
| ·材料与方法 | 第95-96页 |
| ·试剂与药品 | 第95页 |
| ·仪器与设备 | 第95-96页 |
| ·实验方法 | 第96页 |
| ·结果 | 第96-100页 |
| ·DDGS 分析 | 第96-98页 |
| ·安全性的初步分析 | 第98-100页 |
| ·本章小结 | 第100页 |
| ·参考文献 | 第100-102页 |
| 结论与展望 | 第102-104页 |
| 论文创新点 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 研究生期间论文发表 | 第107-108页 |
