| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1. 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-12页 |
| 1.2 骆驼乳及乳源活性蛋白研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 骆驼资源分布 | 第12-13页 |
| 1.2.2 骆驼乳的生理功能 | 第13-14页 |
| 1.2.3 乳源活性蛋白的抑癌作用 | 第14-15页 |
| 1.3 肿瘤转录组学研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 肿瘤蛋白质组学的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.5 食管癌的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.6 研究内容 | 第20-23页 |
| 2. 新疆双峰驼乳清中抑癌活性蛋白组分的筛选 | 第23-36页 |
| 摘要 | 第23页 |
| 引言 | 第23-24页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.1.4.1 驼乳样品预处理 | 第25页 |
| 2.1.4.2 驼乳蛋白质的分离与纯化 | 第25-27页 |
| 2.1.4.3 驼乳抑癌活性组分的筛选 | 第27-28页 |
| 2.1.4.4 细胞显微形态观察 | 第28-29页 |
| 2.1.4.5 细胞超显微形态观察 | 第29页 |
| 2.1.4.6 统计学分析 | 第29页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第29-35页 |
| 2.2.1 驼乳乳清硫酸铵分级沉淀组分对ECA-109细胞增殖的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.2 驼乳清组分TR35对11株恶性肿瘤细胞增殖的抑制作用 | 第30-32页 |
| 2.2.3 驼乳清组分TR35对肿瘤细胞增殖的抑制 | 第32页 |
| 2.2.4 驼乳清组分TR35对肿瘤细胞形态的影响 | 第32-35页 |
| 2.2.5 驼乳清有效组分TR35对ECA-109细胞超显微结构的影响 | 第35页 |
| 2.3 本章小结 | 第35-36页 |
| 3. 驼乳清抑癌活性组分诱导ECA-109细胞凋亡机制的研究 | 第36-53页 |
| 摘要 | 第36页 |
| 引言 | 第36-37页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.1.4.1 ANNENXIN V/PI双染色法检测细胞凋亡 | 第37页 |
| 3.1.4.2 PI单染测定细胞周期 | 第37-38页 |
| 3.1.4.3 HOCHEST 33258染色检测细胞凋亡 | 第38页 |
| 3.1.4.4 线粒体膜电位检测 | 第38-39页 |
| 3.1.4.7 CASPASE 3、CASPASE 8、CASPASE 9酶活检测 | 第39-40页 |
| 3.2 结果 | 第40-50页 |
| 3.2.1 ANNENXIN V/PI双染色法检测细胞凋亡 | 第40-42页 |
| 3.2.2 PI单染法检测细胞周期 | 第42-45页 |
| 3.2.3 TR35-50诱导ECA-109细胞凋亡形态观察 | 第45页 |
| 3.2.4 TR35处理对ECA-109细胞线粒体膜电位的影响 | 第45-48页 |
| 3.2.5 TR35对ECA-109 CASPASE3、CASPASE 8、CASPASE 9的影响 | 第48-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-52页 |
| 3.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 4. 驼乳清蛋白抑制食管癌ECA-109细胞增殖的转录组研究 | 第53-73页 |
| 摘要 | 第53页 |
| 引言 | 第53-54页 |
| 4.1 材料与方法 | 第54-57页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第54-55页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第55页 |
| 4.1.3 实验方法 | 第55-57页 |
| 4.1.3.1 细胞总RNA的提取 | 第55-56页 |
| 4.1.3.2 测序结果分析 | 第56-57页 |
| 4.2 结果 | 第57-68页 |
| 4.2.1 高通量测序结果评估 | 第57-60页 |
| 4.2.1.1 与参考基因组和参考基因进行比对分析 | 第57页 |
| 4.2.1.2 测序质量评估 | 第57-58页 |
| 4.2.1.3 测序饱和度与随机性分析 | 第58-59页 |
| 4.2.1.4 Reads在参考基因组上的分布 | 第59-60页 |
| 4.2.2 差异表达基因筛选 | 第60-63页 |
| 4.2.3 差异表达基因的GO分析 | 第63-66页 |
| 4.2.4 差异表达基因的PATHWAY分析 | 第66-68页 |
| 4.3 讨论 | 第68-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 5. 驼乳清TR35对人食管癌细胞ECA-109差异蛋白组学分析 | 第73-93页 |
| 摘要 | 第73页 |
| 引言 | 第73-74页 |
| 5.1 材料与方法 | 第74-78页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第74页 |
| 5.1.2 仪器 | 第74-75页 |
| 5.1.3 方法 | 第75-78页 |
| 5.1.3.1 细胞总蛋白的提取 | 第75页 |
| 5.1.3.2 蛋白质含量的测定 | 第75页 |
| 5.1.3.3 第一向固相pH梯度等电聚焦 | 第75-76页 |
| 5.1.3.4 第二向 SDS-PAGE 电泳 | 第76-77页 |
| 5.1.3.5 蛋白斑点的取点与脱色 | 第77页 |
| 5.1.3.6 酶解 | 第77页 |
| 5.1.3.7 基质辅助激光解吸/电离飞行时间串联质谱 | 第77页 |
| 5.1.3.8 数据库检索 | 第77-78页 |
| 5.1.3.9 生物信息学分析 | 第78页 |
| 5.2 结果 | 第78-86页 |
| 5.2.1 蛋白质含量的测定 | 第78页 |
| 5.2.2 食管癌ECA-109细胞总蛋白双向电泳 | 第78-80页 |
| 5.2.3 双向电泳图谱部分差异蛋白点局部细节图 | 第80-81页 |
| 5.2.4 差异蛋白点的质谱分析结果 | 第81-83页 |
| 5.2.5 差异表达基因的GO分析 | 第83-86页 |
| 5.2.6 蛋白质组与RNA-SEQ的差异表达结果 | 第86页 |
| 5.3 讨论 | 第86-92页 |
| 5.4 本章小结 | 第92-93页 |
| 6. 结论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-105页 |
| 附录1 SDS-PAGE电泳溶液的制备 | 第105-106页 |
| 附录2 蛋白质浓度测定方法 | 第106-107页 |
| 附录3 双向电泳溶液制备 | 第107-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 个人简历 | 第111页 |
| 参与课题及发表文章 | 第111-112页 |
