| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·磷脂及磷脂酶 | 第8-10页 |
| ·磷脂 | 第8页 |
| ·磷脂酶和磷脂酶 C | 第8-9页 |
| ·磷脂酶 C 的应用 | 第9-10页 |
| ·PLC 检测方法 | 第10-11页 |
| ·卵黄平板法 | 第10页 |
| ·p-NPPC 法 | 第10-11页 |
| ·无机定磷法 | 第11页 |
| ·TLC 法 | 第11页 |
| ·微生物 PLC 的研究现状 | 第11-13页 |
| ·蜡样芽孢杆菌型磷脂酶 C | 第12-13页 |
| ·铜绿假单胞菌型磷脂酶 C | 第13页 |
| ·本课题立题意义及研究内容 | 第13-15页 |
| ·立题意义 | 第13-14页 |
| ·研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-21页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·菌株与质粒 | 第15页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第15页 |
| ·常用溶液 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-21页 |
| ·确定出发菌株及查找相关基因 | 第16-17页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提取 | 第17页 |
| ·委内瑞拉链霉菌基因组 DNA 的提取 | 第17页 |
| ·磷脂酶 C 基因的克隆 | 第17-18页 |
| ·重组大肠杆菌的构建 | 第18页 |
| ·重组大肠杆菌的诱导表达及鉴定 | 第18-19页 |
| ·磷脂酶 C 活力的测定 | 第19页 |
| ·磷脂酶 C 底物特异性分析 | 第19页 |
| ·总磷含量的测定 | 第19页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第19-20页 |
| ·磷脂酶 C 的纯化 | 第20-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-38页 |
| ·出发菌株的选择及磷脂酶 C 重组大肠杆菌构建 | 第21-29页 |
| ·出发菌株的选择及确定 | 第21-22页 |
| ·A. calcoaceticus 磷脂酶 C 基因的克隆表达及纯化 | 第22-24页 |
| ·S. venezuelae 磷脂酶 C 基因的克隆表达及纯化 | 第24-27页 |
| ·B. cereus 磷脂酶 C 基因的克隆表达及纯化 | 第27-29页 |
| ·重组磷脂酶 C 的酶学性质分析 | 第29-38页 |
| ·最适反应温度的测定 | 第29-30页 |
| ·最适 pH 值分析 | 第30-31页 |
| ·热稳定性分析 | 第31-32页 |
| ·pH 耐受性分析 | 第32-33页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第33-35页 |
| ·重组 PLC 底物特异性分析 | 第35-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45页 |
