| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-14页 |
| ·磷脂和磷脂酶 | 第8页 |
| ·磷脂酶 C 种类及结构 | 第8-9页 |
| ·磷脂酶 C 的常用检测方法 | 第9-10页 |
| ·卵黄平板法 | 第9-10页 |
| ·p-NPPC 法 | 第10页 |
| ·磷脂酶 C 的应用 | 第10-11页 |
| ·酶法脱胶 | 第10页 |
| ·医药方面的应用 | 第10-11页 |
| ·食品方面的应用 | 第11页 |
| ·微生物磷脂酶 C 的研究现状 | 第11-12页 |
| ·国内外微生物磷脂酶 C 研究进展 | 第11页 |
| ·Pseudomonas aeruginosa 及其磷脂酶 C 的特性 | 第11-12页 |
| ·本课题的研究目的、立题意义及研究内容 | 第12-14页 |
| ·研究目的 | 第12页 |
| ·立题意义 | 第12-13页 |
| ·研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-22页 |
| ·实验材料 | 第14-15页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·主要试剂与工具酶 | 第14页 |
| ·常用溶液 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·实验方法 | 第15-22页 |
| ·产磷脂酶 C 菌株筛选 | 第15-16页 |
| ·确定出发菌株与查找相关基因 | 第16页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提取 | 第16页 |
| ·产磷脂酶 C 相关基因的克隆 | 第16-17页 |
| ·重组大肠杆菌表达质粒的构建 | 第17页 |
| ·重组大肠杆菌的诱导表达及鉴定 | 第17页 |
| ·磷脂酶 C 酶活力和主要研究菌株的确定 | 第17页 |
| ·溶血性磷脂酶 C (PLCH) 功能的初步研究 | 第17-18页 |
| ·LB 培养基中，重组大肠杆菌生长曲线和比生长速率曲线的绘制 | 第18页 |
| ·LB 培养基中，添加 IPTG 对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第18页 |
| ·LB 培养基中，添加乳糖对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第18-19页 |
| ·TB 培养基中磷酸盐的替换 | 第19页 |
| ·TB 培养基中碳源的优化 | 第19页 |
| ·TB 培养基中，重组大肠杆菌生长曲线的绘制 | 第19页 |
| ·TB 培养基中，添加 IPTG 对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第19-20页 |
| ·TB 培养基中，添加乳糖对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第20页 |
| ·7 L 发酵罐试验 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-51页 |
| ·产磷脂酶 C 菌株筛选 | 第22-23页 |
| ·产磷脂酶 C 菌株的初筛 | 第22-23页 |
| ·产磷脂酶 C 菌株的复筛 | 第23页 |
| ·PLC 在大肠杆菌中的克隆与表达 | 第23-30页 |
| ·PLC 基因的克隆 | 第23-24页 |
| ·重组大肠杆菌表达质粒的构建 | 第24-26页 |
| ·重组菌的诱导表达及鉴定 | 第26-27页 |
| ·磷脂酶 C 酶活力的测定及主要研究菌株的确定 | 第27-28页 |
| ·PLCH 的溶血能力及相关功能的初步研究 | 第28-30页 |
| ·LB 培养基中考察重组大肠杆菌 BL21(DE3)/pET28a-plcH 的发酵条件 | 第30-39页 |
| ·生长曲线和比生长速率曲线的绘制 | 第30-31页 |
| ·添加 IPTG 对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第31-33页 |
| ·添加乳糖对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第33-37页 |
| ·7 L 发酵罐试验 | 第37-39页 |
| ·TB 培养基中考察重组大肠杆菌 BL21(DE3)/pET28a-plcH 的发酵条件 | 第39-51页 |
| ·TB 培养基中磷酸盐的替换 | 第39-40页 |
| ·碳源的优化 | 第40-42页 |
| ·重组菌生长曲线和比生长速率曲线的绘制 | 第42-43页 |
| ·添加 IPTG 对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第43-46页 |
| ·添加乳糖对重组大肠杆菌进行诱导条件的初步优化 | 第46-48页 |
| ·7 L 发酵罐试验 | 第48-51页 |
| 主要结论与展望 | 第51-52页 |
| 主要结论 | 第51页 |
| 展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |
