| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| ·L-异亮氨酸 | 第9-10页 |
| ·L-异亮氨酸性状与应用 | 第9页 |
| ·L-异亮氨酸合成途径及其生产 | 第9-10页 |
| ·NADPH 的供应途径 | 第10-11页 |
| ·NAD 激酶 | 第11-14页 |
| ·NAD 激酶的性质 | 第11-13页 |
| ·NAD 激酶的种类 | 第13页 |
| ·NAD 激酶的应用研究 | 第13-14页 |
| ·立题背景和研究内容 | 第14-16页 |
| ·立题背景 | 第14页 |
| ·研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-29页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·实验用菌株、质粒与引物 | 第16-17页 |
| ·主要培养基 | 第17-18页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·菌株培养以及感受态细胞的制备和转化 | 第19-20页 |
| ·基因组和质粒的提取 | 第20页 |
| ·基因的扩增和纯化 | 第20-21页 |
| ·质粒和菌株的构建 | 第21-24页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第24页 |
| ·6-磷酸葡萄糖脱氢酶酶活、NAD 激酶酶活以及 Pos5 的酶学性质的测定 | 第24-26页 |
| ·摇瓶发酵以及生长曲线、残糖和氨基酸的测定 | 第26页 |
| ·四种辅酶 NAD+、NADH、NADP+、NADPH 含量的测定 | 第26-28页 |
| ·上罐发酵操作 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-47页 |
| ·酿酒酵母 Pos5 的表达纯化和酶学性质 | 第29-34页 |
| ·POS5 的扩增和大肠杆菌中 POS5 表达菌株的构建 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌中 Pos5 的诱导表达与纯化 | 第30-31页 |
| ·Pos5 的酶学性质 | 第31-34页 |
| ·POS5 的过表达对 L-异亮氨酸摇瓶发酵的影响 | 第34-38页 |
| ·乳糖发酵短杆菌 POS5 表达菌株的构建 | 第34-35页 |
| ·POS5 表达菌摇瓶发酵的生长情况 | 第35-36页 |
| ·POS5 表达菌摇瓶发酵的 NAD 激酶酶活 | 第36页 |
| ·POS5 表达菌摇瓶发酵的胞内辅酶含量 | 第36-37页 |
| ·POS5 表达菌摇瓶发酵的 L-异亮氨酸产量 | 第37-38页 |
| ·zwf、ppnK 的单表达和共表达对 L-异亮氨酸摇瓶发酵的影响 | 第38-44页 |
| ·乳糖发酵短杆菌 zwf、ppnK 单表达和共表达菌株的构建 | 第38-40页 |
| ·zwf、ppnK 单表达和共表达菌株摇瓶发酵的生长情况 | 第40-41页 |
| ·zwf、ppnK 单表达和共表达菌株摇瓶发酵的酶活 | 第41页 |
| ·zwf、ppnK 单表达和共表达菌株摇瓶发酵的胞内辅酶含量 | 第41-42页 |
| ·zwf、ppnK 单表达和共表达菌株摇瓶发酵的 L-异亮氨酸产量 | 第42-44页 |
| ·POS5 和 zwf-ppnK 表达菌上罐发酵 | 第44-47页 |
| ·上罐发酵菌株生长情况 | 第44-45页 |
| ·上罐发酵菌株的胞内辅酶含量 | 第45页 |
| ·上罐发酵菌株的 L-异亮氨酸产量 | 第45-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-50页 |
| 主要结论 | 第47-48页 |
| 展望 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |
