| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-14页 |
| ·启动子的性质和功能的研究 | 第8-10页 |
| ·启动子的性质和研究意义 | 第8页 |
| ·启动子的分类 | 第8-9页 |
| ·启动子筛选的方法 | 第9-10页 |
| ·启动子探测载体及其研究现状 | 第10页 |
| ·棒杆菌启动子的研究现状 | 第10-11页 |
| ·双向电泳在蛋白质组学中的应用 | 第11-12页 |
| ·报告基因研究概述 | 第12页 |
| ·绿色荧光蛋白 GFP | 第12页 |
| ·氯霉素乙酰转移酶 CAT | 第12页 |
| ·本研究的立题背景和内容 | 第12-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-23页 |
| ·菌株与质粒 | 第14-15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·生化试剂 | 第15页 |
| ·工具酶及其它 | 第15-16页 |
| ·2-DE 主要试剂配方 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·引物设计和合成 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-23页 |
| ·应用 2-DE 分离鉴定钝齿棒杆菌 SYPA5-5 胞内可溶性蛋白 | 第16-18页 |
| ·目标蛋白的筛选鉴定 | 第18页 |
| ·携带启动子的重组构建 | 第18-21页 |
| ·启动子的功能分析 | 第21-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-45页 |
| ·钝齿棒杆菌胞内可溶性蛋白的2-DE分析 | 第23-26页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第23页 |
| ·钝齿棒杆菌组成型胞内可溶性蛋白 2-DE 图谱分析 | 第23-24页 |
| ·钝齿棒杆菌受溶氧影响蛋白 2-DE 图谱分析 | 第24-26页 |
| ·蛋白质的肽指纹图谱鉴定 | 第26-28页 |
| ·钝齿棒杆菌组成型高表达蛋白的鉴定 | 第26-27页 |
| ·受溶氧水平影响显著差异蛋白鉴定 | 第27-28页 |
| ·目标蛋白编码基因上游启动子区域功能分析及其重组构建 | 第28-34页 |
| ·启动子克隆及其功能区域分析 | 第28-32页 |
| ·重组载体 pDXW-8-gfp 和 pDXW-8-cat 的构建 | 第32页 |
| ·携带启动子片段的重组载体的构建 | 第32-34页 |
| ·组成型启动子的功能鉴定 | 第34-38页 |
| ·GFP 荧光检测 | 第34页 |
| ·CAT 酶活性检测 | 第34-36页 |
| ·5 L 发酵罐分析 P-argG 和 P-argF 在重组钝齿棒杆菌中活性 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| ·溶氧诱导型启动子功能鉴定 | 第38-45页 |
| ·GFP 的荧光检测 | 第38-39页 |
| ·CAT 酶活力测定 | 第39-41页 |
| ·5 L 发酵罐中 P-tkt 在重组钝齿棒杆菌中功能验证 | 第41-42页 |
| ·5 L 发酵罐中 P-bdh 在重组钝齿棒杆菌中功能验证 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-47页 |
| 主要结论 | 第45-46页 |
| 展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
