致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
英文缩略词 | 第12-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-36页 |
1 磺胺类药物简介 | 第18-26页 |
·磺胺类药物结构及理化性质 | 第18页 |
·磺胺类药物的作用机理 | 第18-19页 |
·磺胺药物代谢 | 第19-20页 |
·磺胺类药物危害 | 第20-21页 |
·损伤泌尿系统 | 第20页 |
·过敏反应 | 第20页 |
·抑制造血系统 | 第20页 |
·导致细菌产生抗药性 | 第20-21页 |
·磺胺类药物的应用现状及限量标准 | 第21页 |
·磺胺类药物多残留检测方法 | 第21-26页 |
·磺胺药物的液相检测 | 第21-22页 |
·色谱质谱联用 | 第22页 |
·薄层色谱法 | 第22-23页 |
·毛细管电泳法 | 第23页 |
·免疫分析方法 | 第23-26页 |
2 氟喹诺酮类药物简介 | 第26-33页 |
·氟喹诺酮类药物的结构及性质 | 第26-27页 |
·氟喹诺酮类药物的作用机理 | 第27页 |
·氟喹诺酮类药物的代谢 | 第27-28页 |
·氟喹诺酮类药物危害 | 第28页 |
·氟喹诺酮类药物的应用现状及限量标准 | 第28-29页 |
·氟喹诺酮类药物多残留检测方法 | 第29-33页 |
·徽生物法检测 | 第29页 |
·液相色谱检测 | 第29-30页 |
·色谱-质谱联用 | 第30页 |
·高效毛细管电泳法 | 第30-31页 |
·氟喳诺酮类的免疫分析方法 | 第31-33页 |
3 本课题的目的和意义 | 第33-36页 |
第二章 磺胺类药物人工抗原与多克隆抗体的制备 | 第36-50页 |
导言 | 第36页 |
·材料 | 第36-38页 |
·试剂 | 第36-37页 |
·仪器与材料 | 第37-38页 |
·溶液配制 | 第38页 |
·方法 | 第38-42页 |
·母核结构TS半抗原的合成与鉴定 | 第38-39页 |
·人工抗原的制备 | 第39-40页 |
·人工抗原浓度的测定 | 第40-41页 |
·免疫抗原的鉴定及偶联率测定 | 第41页 |
·兔子的免疫 | 第41-42页 |
·多抗血清的获得、检测及兔子脾脏的筛选 | 第42页 |
·结果 | 第42-47页 |
·人工半抗原TS合成鉴定 | 第42-44页 |
·人工免疫抗原的鉴定 | 第44-45页 |
·人工免疫蛋白质含量测定 | 第45页 |
·多抗血清的筛选 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
第三章 抗磺胺类药物兔单克隆抗体的制备及酶联免疫(ELISA)检测应用技术研究 | 第50-69页 |
导言 | 第50页 |
·材料 | 第50-52页 |
·主要试剂 | 第50-51页 |
·主要设备与材料 | 第51页 |
·溶液的配制 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-57页 |
·细胞融合 | 第52页 |
·融合细胞的培养与杂交瘤细胞的筛选及克隆 | 第52-53页 |
·细胞筛选阶段ELISA检测筛选 | 第53-54页 |
·兔单克隆抗体ELISA检测方法的建立与优化 | 第54-56页 |
·SAs-80-8抗体免疫学性质的研究 | 第56-57页 |
·样品测定 | 第57页 |
·结果 | 第57-67页 |
·杂交瘤细胞的筛选与克隆 | 第57-59页 |
·ELISA条件的优化 | 第59-65页 |
·RabMAb SAs-80-8抗体免疫学性质测定 | 第65-67页 |
·样品回收率的测定 | 第67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
第四章 磺胺类药物金标卡的制备与应用 | 第69-87页 |
导言 | 第69页 |
·材料 | 第69-71页 |
·主要设备 | 第69-70页 |
·实验材料 | 第70页 |
·试剂及溶液配制 | 第70-71页 |
·方法 | 第71-76页 |
·玻璃器皿的准备 | 第71页 |
·胶体金的制备 | 第71页 |
·胶体金与抗体蛋白标记与纯化 | 第71-72页 |
·金标试纸条的制作 | 第72页 |
·试纸条上样条件确定 | 第72-73页 |
·胶体金试纸条性质测定 | 第73-74页 |
·样品测定 | 第74页 |
·LC-MS/MS验证实验 | 第74-76页 |
·结果 | 第76-85页 |
·胶体金与抗体结合比例的确定 | 第76页 |
·免疫胶体金试纸条检测原理与结果判定 | 第76-77页 |
·试纸条上样条件确定 | 第77-78页 |
·试纸条的灵敏度及检测限 | 第78-79页 |
·试纸条的特异性试验 | 第79页 |
·样品检测试验 | 第79-83页 |
·LC-MS/MS电喷雾离子源的设置及标准曲线 | 第83-85页 |
·LC-MS/MS与LFA的比对 | 第85页 |
·讨论 | 第85-87页 |
第五章 磺胺类药物重组抗体的制备 | 第87-96页 |
导言 | 第87页 |
·材料与方法 | 第87-90页 |
·细胞株与菌株 | 第87页 |
·试剂及仪器 | 第87页 |
·细胞的裂解及mRNA的提取 | 第87-88页 |
·重链、轻链基因的PCR扩增及产物纯化 | 第88页 |
·目的基因片段与载体的连接 | 第88-89页 |
·质粒的转染与抗体的纯化 | 第89页 |
·重组生产与杂交瘤生产的抗体性质比较 | 第89-90页 |
·结果 | 第90-95页 |
·抗体重链与轻链的PCR扩增 | 第90页 |
·质粒的酶切鉴定 | 第90-91页 |
·重组质粒的测序 | 第91-93页 |
·获得抗体的检测 | 第93-94页 |
·重组生产与杂交瘤生产的抗体性质比较 | 第94-95页 |
·讨论 | 第95-96页 |
第六章 氟喹诺酮类药物人工抗原与多抗的制备 | 第96-104页 |
导言 | 第96页 |
·材料 | 第96-97页 |
·试剂 | 第96-97页 |
·仪器及材料 | 第97页 |
·溶液配制 | 第97页 |
·方法 | 第97-99页 |
·免疫抗原及包被抗原的合成 | 第97-98页 |
·包被抗原及免疫抗原浓度的测定 | 第98页 |
·免疫抗原的MALDI-TOFMS鉴定及偶联率测定 | 第98页 |
·兔子的免疫 | 第98-99页 |
·兔多抗血清的获得、检测及兔子脾脏的筛选 | 第99页 |
·结果与讨论 | 第99-104页 |
·免疫抗原的MODI-TOFMS鉴定 | 第99-101页 |
·免疫抗原偶联率 | 第101页 |
·免疫抗原及包被抗原浓度的测定 | 第101-102页 |
·多抗血清的筛选 | 第102-104页 |
第七章 氟喹诺酮类药物兔单克隆抗体的制备及酶联免疫(ELISA)检测技术研究 | 第104-132页 |
导言 | 第104页 |
·实验材料 | 第104页 |
·主要试剂 | 第104页 |
·主要设备与材料 | 第104页 |
·溶液配制 | 第104页 |
·实验方法 | 第104-105页 |
·细胞融合 | 第104页 |
·融合细胞的培养与杂交瘤细胞的筛选及克隆 | 第104页 |
·细胞筛选阶段ELISA检测筛选 | 第104-105页 |
·FQs-111-2 ELISA检测方法的初步建立 | 第105-109页 |
·免单克隆抗体111-2的优化 | 第105-108页 |
·FQs-111-2抗体免疫学性质的研究 | 第108页 |
·FQs药物回收率的测定 | 第108-109页 |
·FQs-31-3 EL1SA检测方法的初步建立 | 第109-112页 |
·兔单克隆抗体31-3优化 | 第109-110页 |
·FQs-31-3抗体免疫学性质的研究 | 第110-111页 |
·氧氟沙星药物ELISA回收率的测定 | 第111页 |
·氧氟沙星胶体金试纸条 | 第111页 |
·氧氟沙星LC-MS/MS确证 | 第111-112页 |
·结果与分析 | 第112-131页 |
·杂交瘤细胞的筛选与克隆 | 第112-114页 |
·FQs-111-2抗体ELISA检测方法的初步建立 | 第114-120页 |
·FQs-111-2抗体免疫学性质测定 | 第120-121页 |
·FQs回收率测定 | 第121-122页 |
·FQs-31-3抗体ELISA检测方法的初步建立 | 第122-127页 |
·FQs-31-3抗体免疫学性质测定 | 第127-128页 |
·氧氟沙星回收率的测定 | 第128-129页 |
·氧氟沙星胶体金试纸条 | 第129-131页 |
·讨论 | 第131-132页 |
第八章 总结与展望 | 第132-134页 |
参考文献 | 第134-142页 |
攻读学位期间发表的主要论文 | 第142页 |