| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第18-28页 |
| 1.1 丙谷二肽简介 | 第18-20页 |
| 1.1.1 L-谷氨酰胺 | 第18-19页 |
| 1.1.2 丙谷二肽 | 第19-20页 |
| 1.2 二肽的合成方法 | 第20-24页 |
| 1.2.1 化学合成 | 第20-21页 |
| 1.2.2 化学酶合成 | 第21-22页 |
| 1.2.3 生物酶法合成 | 第22-24页 |
| 1.3 丙谷二肽的国内外生产现状与前景 | 第24-25页 |
| 1.4 本课题的立题意义 | 第25-28页 |
| 第二章 α-氨基酸酯酰基转移酶重组工程菌的构建 | 第28-40页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第28-32页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.3 菌株和质粒 | 第30页 |
| 2.2.4 培养基 | 第30页 |
| 2.2.5 主要试剂的配制 | 第30-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-36页 |
| 2.3.1 重组工程菌的构建 | 第32-35页 |
| 2.3.2 重组菌发酵产酶 | 第35-36页 |
| 2.3.3 酶活测定 | 第36页 |
| 2.3.4 丙谷二肽的液相检测 | 第36页 |
| 2.3.5 目标重组菌株的筛选 | 第36页 |
| 2.4 结果与分析 | 第36-39页 |
| 2.4.1 重组质粒的验证 | 第36-38页 |
| 2.4.2 最优工程菌的选择 | 第38-39页 |
| 2.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 SAET-QC01发酵产酶条件的研究 | 第40-55页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第40-42页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.2.3 菌株 | 第42页 |
| 3.2.4 培养基 | 第42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.3.1 SAET-QC01发酵产酶 | 第42页 |
| 3.3.2 酶活测定 | 第42页 |
| 3.3.3 丙谷二肽的液相检测 | 第42页 |
| 3.3.4 碳源对SAET-QC01产酶的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.5 氮源对SAET-QC01产酶的影响 | 第43页 |
| 3.3.6 金属离子和化合物对SAET-QC01产酶的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.7 培养基的正交优化 | 第44页 |
| 3.3.8 培养基初始pH对SAET-QC01产酶的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.9 诱导温度对菌株产酶的影响 | 第45页 |
| 3.3.10 IPTG浓度对菌株产酶的影响 | 第45页 |
| 3.3.11 诱导初始菌浓对SAET-QC01产酶的影响 | 第45页 |
| 3.3.12 诱导时间对SAET-QC01产酶的影响 | 第45-46页 |
| 3.4 结果与分析 | 第46-54页 |
| 3.4.1 碳源对SAET-QC01产酶的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.2 氮源对SAET-QC01产酶的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.3 金属离子和化合物对SAET-QC01产酶的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.4 培养基正交优化 | 第49-50页 |
| 3.4.5 初始pH对SAET-QC01产酶的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.6 诱导温度对SAET-QC01产酶的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.7 IPTG浓度对SAET-QC01产酶的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.8 诱导初始菌浓对SAET-QC01产酶的影响 | 第53页 |
| 3.4.9 诱导时间对SAET-QC01产酶的影响 | 第53-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 酶学性质及催化特性的初步研究 | 第55-68页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第55-58页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第56-57页 |
| 4.2.3 培养基 | 第57页 |
| 4.2.4 主要试剂的配制 | 第57-58页 |
| 4.3 实验方法 | 第58-60页 |
| 4.3.1 SAET-QC01发酵产酶 | 第58页 |
| 4.3.2 酶活测定 | 第58页 |
| 4.3.3 粗酶液的分离纯化 | 第58-59页 |
| 4.3.4 纯化酶的SDS-PAGE电泳检测 | 第59页 |
| 4.3.5 α-氨基酸酯酰基转移酶的酶学性质 | 第59页 |
| 4.3.6 α-氨基酸酯酰基转移酶催化条件研究 | 第59-60页 |
| 4.4 结果与分析 | 第60-67页 |
| 4.4.1 α-氨基酸酯酰基转移酶的分离纯化 | 第60-62页 |
| 4.4.2 α-氨基酸酯酰基转移酶酶学性质 | 第62-65页 |
| 4.4.3 α-氨基酸酯酰基转移酶催化条件 | 第65-67页 |
| 4.5 本章小结 | 第67-68页 |
| 第五章 产品鉴定及结构表征 | 第68-75页 |
| 5.1 引言 | 第68页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第68-69页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第69页 |
| 5.3 实验方法 | 第69-70页 |
| 5.3.1 薄层层析 | 第69页 |
| 5.3.2 产品的分离纯化 | 第69-70页 |
| 5.3.3 液相色谱检测 | 第70页 |
| 5.3.4 质谱检测 | 第70页 |
| 5.3.5 红外检测 | 第70页 |
| 5.3.6 核磁共振检测 | 第70页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第70-74页 |
| 5.4.1 薄层色谱图 | 第70页 |
| 5.4.2 液相色谱图 | 第70-71页 |
| 5.4.3 质谱图 | 第71-72页 |
| 5.4.4 红外色谱图 | 第72页 |
| 5.4.5 核磁共振谱图 | 第72-74页 |
| 5.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 第六章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 6.1 结论 | 第75-76页 |
| 6.2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 攻读硕士学位期间学术活动及成果情况 | 第82-83页 |
