| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| abstract | 第9页 |
| 第一章 绪论 | 第16-27页 |
| 1.1 磷脂 | 第16-18页 |
| 1.1.1 磷脂简介 | 第16页 |
| 1.1.2 磷脂的结构与性质 | 第16-17页 |
| 1.1.3 磷脂的功能与应用 | 第17-18页 |
| 1.1.4 大豆磷脂研究国内外概况 | 第18页 |
| 1.2 磷脂酶 | 第18-25页 |
| 1.2.1 磷脂酶分类 | 第18-19页 |
| 1.2.2 磷脂酶类型的确定方法 | 第19-20页 |
| 1.2.3 磷脂酶的来源及性质 | 第20-24页 |
| 1.2.4 磷脂酶的结构及催化机理 | 第24-25页 |
| 1.2.5 磷脂酶的应用研究 | 第25页 |
| 1.3 本课题的研究意义 | 第25-26页 |
| 1.4 研究内容与思路 | 第26-27页 |
| 第二章 磷脂酶产生菌的筛选与鉴定 | 第27-37页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-30页 |
| 2.2.1 主要仪器与试剂 | 第27-29页 |
| 2.2.2 培养基及试剂的配制 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.3.1 底物缓冲溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.3.2 磷脂酶活力的测定方法 | 第31页 |
| 2.3.3 土样采集及处理 | 第31页 |
| 2.3.4 稀释涂布法分离菌株 | 第31-32页 |
| 2.3.5 产酶菌株初筛 | 第32页 |
| 2.3.6 产酶菌株复筛 | 第32页 |
| 2.3.7 产酶菌株的分类鉴定 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与分析 | 第33-36页 |
| 2.4.1 产酶菌株的筛选结果 | 第33-34页 |
| 2.4.2 产酶菌株的分类鉴定 | 第34-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 菌株B8发酵产酶条件的初步研究 | 第37-48页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料 | 第37-39页 |
| 3.2.1 菌株 | 第37页 |
| 3.2.2 实验仪器与试剂 | 第37-39页 |
| 3.2.3 培养基及试剂的配制 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.3.1 菌种B8的培养方法 | 第39页 |
| 3.3.2 粗酶液的酶活检测方法 | 第39页 |
| 3.3.3 生物量的测定方法 | 第39-40页 |
| 3.3.4 酶蛋白含量的测定方法 | 第40页 |
| 3.3.5 碳源对菌株产酶的影响 | 第40页 |
| 3.3.6 氮源对菌株产酶的影响 | 第40页 |
| 3.3.7 无机盐对B8菌株产磷脂酶的影响 | 第40页 |
| 3.3.8 培养基初始pH对菌株B8产磷脂酶的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.9 摇瓶转速对菌株B8产磷脂酶的影响 | 第41页 |
| 3.3.10 培养温度对菌株B8产磷脂酶的影响 | 第41页 |
| 3.3.11 发酵时间对菌株B8产磷脂酶的影响 | 第41页 |
| 3.3.12 数据处理 | 第41页 |
| 3.4 结果与分析 | 第41-47页 |
| 3.4.1 不同碳源对B8产酶的影响 | 第41-42页 |
| 3.4.2 复合碳源对B8产酶的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.3 氮源对菌株产酶的影响 | 第43页 |
| 3.4.4 无机盐对B8菌株产磷脂酶的影响 | 第43-45页 |
| 3.4.5 培养基初始pH对B8产磷脂酶的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.6 摇床转速对菌株B8产磷脂酶的影响 | 第46页 |
| 3.4.7 培养温度对菌株B8产磷脂酶的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.8 发酵时间对菌株B8产磷脂酶的影响 | 第47页 |
| 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 磷脂酶的分离纯化与酶学性质研究 | 第48-60页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48-51页 |
| 4.2.1 菌株来源 | 第48页 |
| 4.2.2 主要仪器与试剂 | 第48-50页 |
| 4.2.3 培养基及试剂的配制 | 第50-51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.3.1 磷脂酶活力的测定方法 | 第51页 |
| 4.3.2 蛋白质含量的测定方法 | 第51页 |
| 4.3.3 磷脂酶的分离纯化 | 第51-52页 |
| 4.3.4 磷脂酶的酶学性质 | 第52-53页 |
| 4.3.5 数据处理与分析 | 第53页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第53-59页 |
| 4.4.1 磷脂酶的分离纯化 | 第53-55页 |
| 4.4.2 磷脂酶的反应动力学参数Km和Vmax测定 | 第55-56页 |
| 4.4.3 酶学性质 | 第56-59页 |
| 4.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 酶法制备GPC、产物纯化及结构表征 | 第60-72页 |
| 5.1 引言 | 第60页 |
| 5.2 实验材料 | 第60-62页 |
| 5.2.1 菌株来源 | 第60页 |
| 5.2.2 磷脂酶 | 第60页 |
| 5.2.3 主要仪器与试剂 | 第60-62页 |
| 5.3 实验方法 | 第62-66页 |
| 5.3.1 反应体系的构建 | 第62-63页 |
| 5.3.2 磷脂酶酶活力测定 | 第63页 |
| 5.3.3 反应体系PC转化率的测定方法 | 第63页 |
| 5.3.4 水相酶法催化制备甘油磷酸胆碱反应 | 第63页 |
| 5.3.5 催化产物的分离纯化 | 第63-64页 |
| 5.3.6 乙酸钠的测定 | 第64-65页 |
| 5.3.7 甘油磷酸胆碱的薄层色谱层析检测 | 第65-66页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第66-71页 |
| 5.4.1 酶法催化反应体系的构建 | 第66-68页 |
| 5.4.2 催化产物的分离纯化 | 第68-70页 |
| 5.4.3 薄层色谱层析检测 | 第70-71页 |
| 5.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 第六章 结论与展望 | 第72-74页 |
| 6.1 结论 | 第72-73页 |
| 6.2 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第84-85页 |