摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-20页 |
1 赭曲霉毒素A(OTA)和聚酮合成酶(polyketide synthase,PKS)基因 | 第11-12页 |
·OTA简介 | 第11页 |
·PKS基因 | 第11页 |
·OTA国内外研究现状 | 第11-12页 |
2 SPR技术 | 第12-18页 |
·SPR技术原理 | 第13-14页 |
·SPR检测方法 | 第14-17页 |
·直接法 | 第14页 |
·三明治法 | 第14-15页 |
·竞争法 | 第15-16页 |
·金纳米粒子 | 第16-17页 |
·SPR生物传感器的应用 | 第17-18页 |
·免疫学研究 | 第17页 |
·食品检测 | 第17-18页 |
·蛋白质组学 | 第18页 |
·DNA杂交反应 | 第18页 |
·药物研究与检测 | 第18页 |
3 本研究的意义和主要研究内容 | 第18-20页 |
第二章 聚酮合成酶基因的提取及其鉴定 | 第20-27页 |
1 材料与方法 | 第20-24页 |
·材料与设备 | 第20-21页 |
·材料 | 第20页 |
·主要药品与试剂 | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
·方法 | 第21-24页 |
·培养基与主要试剂的制备 | 第21页 |
·赭曲霉菌株培养及OTA的检验 | 第21-22页 |
·赭曲霉DNA的提取及电泳检测 | 第22-23页 |
·赭曲霉DNA的PCR扩增引物设计、扩增条件、检测与测序 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-26页 |
·ELISA试剂盒检测OTA | 第24页 |
·赭曲霖总DNA的提取及电泳检测 | 第24-25页 |
·赭曲霉DNA的PCR扩增、检测与测序 | 第25-26页 |
·PCR产物的扩增比对 | 第25页 |
·PCR测序结果 | 第25-26页 |
·比对结果 | 第26页 |
3 小结 | 第26-27页 |
第三章 SPR直接法检测PKS基因的特异性碱基序列 | 第27-34页 |
1 材料与方法 | 第27-29页 |
·材料与设备 | 第27-28页 |
·材料 | 第27页 |
·主要药品与试剂 | 第27页 |
·主要仪器设备 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-29页 |
·缓冲溶液配制 | 第28页 |
·SPR直接法检测PKS基因特异性序列 | 第28页 |
·SPR检测及芯片的再生 | 第28-29页 |
·SPR响应值(角度改变)的计算 | 第29页 |
·实际样品预处理 | 第29页 |
·实际样品的检测 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-32页 |
·SPR直接法检测PKS基因特异性序列 | 第29-30页 |
·MCH对杂交反应的影响 | 第30页 |
·互补链的洗脱 | 第30-31页 |
·实际样品的SPR检测 | 第31-32页 |
·提取污染样品的赭曲霉DNA结果 | 第31页 |
·样品高温变性解链处理 | 第31-32页 |
·SPR传感器检测样品 | 第32页 |
3 小结 | 第32-34页 |
第四章 纳米金增强SPR检测PKS基因的特异性碱基序列 | 第34-41页 |
1 材料与方法 | 第34-36页 |
·材料与设备 | 第34-35页 |
·材料 | 第34页 |
·主要药品与试剂 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-36页 |
·缓冲溶液配制 | 第35页 |
·金纳米粒子的制备和表征 | 第35页 |
·金纳米粒子作为传感膜,增强SPR检测PKS基因特异性碱基的信号 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-40页 |
·金纳米粒子的表征 | 第36页 |
·金纳米浓度计算 | 第36-37页 |
·金纳米粒子增强SPR检测 | 第37-40页 |
·金纳米粒子组装 | 第37-38页 |
·纳米金增强法 | 第38-40页 |
3 小结 | 第40-41页 |
第五章 全文总结 | 第41-43页 |
研究创新点与展望 | 第43-44页 |
1 创新点 | 第43页 |
2 展望 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附录 缩略语表 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |