摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-26页 |
1.1 番茄红素的概述 | 第13-17页 |
1.1.1 番茄红素的简介 | 第13-14页 |
1.1.2 番茄红素的功效 | 第14-16页 |
1.1.3 番茄红素的应用 | 第16页 |
1.1.4 番茄红素生产方式 | 第16-17页 |
1.2 巴氏杜氏藻与类胡萝卜素合成途径 | 第17-21页 |
1.2.1 杜氏藻 | 第17-18页 |
1.2.2 巴氏藻中类胡萝卜素合成途径 | 第18-21页 |
1.3 基因工程菌的高密度发酵及过程优化 | 第21-25页 |
1.3.1 高密度发酵技术 | 第21-22页 |
1.3.2 影响高密度发酵的因素 | 第22-24页 |
1.3.3 补料方式对高密度发酵的影响 | 第24-25页 |
1.4 本文的主要研究内容 | 第25-26页 |
第二章 番茄红素工程菌发酵条件优化 | 第26-48页 |
2.1 前言 | 第26-27页 |
2.2 实验材料 | 第27-28页 |
2.2.1 菌株 | 第27页 |
2.2.2 生化试剂 | 第27页 |
2.2.3 仪器设备 | 第27页 |
2.2.4 主要培养基配置 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-31页 |
2.3.1 工程菌的培养 | 第28页 |
2.3.2 菌体生物量的测定 | 第28页 |
2.3.3 番茄红素的提取与含量测定 | 第28-29页 |
2.3.4 单因素优化 | 第29-30页 |
2.3.5 响应因素水平的优化 | 第30页 |
2.3.6 发酵罐高密度培养 | 第30-31页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第31-47页 |
2.4.1 标准曲线的绘制 | 第31页 |
2.4.2 不同培养基对菌体生长和色素积累的影响 | 第31-33页 |
2.4.3 培养温度对菌体生长和色素积累的影响 | 第33页 |
2.4.4 响应面法确定最适培养基影响因子 | 第33-37页 |
2.4.5 响应面分析 | 第37-43页 |
2.4.6 发酵罐扩大培养 | 第43-47页 |
2.5 本章小结 | 第47-48页 |
第三章 用于阻遏巴氏杜氏藻生产番茄红素阻断剂的探索 | 第48-58页 |
3.1 前言 | 第48页 |
3.2 材料与设备 | 第48-50页 |
3.2.1 藻种 | 第48-49页 |
3.2.2 培养基 | 第49-50页 |
3.2.3 生化试剂 | 第50页 |
3.2.4 主要仪器 | 第50页 |
3.3 实验方法 | 第50-51页 |
3.3.1 巴氏杜氏盐藻的培养 | 第50-51页 |
3.3.2 巴氏杜氏盐藻生物量测定及阻断剂的加入 | 第51页 |
3.3.3 色素的提取鉴定以及含量测定 | 第51页 |
3.4 实验结果 | 第51-57页 |
3.4.1 藻细胞数标准曲线的确立 | 第51-52页 |
3.4.2 七种阻断剂加入剂量的探索 | 第52页 |
3.4.3 三乙胺的阻遏效果 | 第52-54页 |
3.4.4 其他阻断的阻遏效果 | 第54-57页 |
3.5 小结与讨论 | 第57-58页 |
第四章 阻断生产番茄红素条件优化 | 第58-69页 |
4.1 前言 | 第58页 |
4.2 材料与方法 | 第58-61页 |
4.2.1 生化试剂 | 第58页 |
4.2.2 培养液 | 第58-59页 |
4.2.3 番茄红素标准曲线的测定 | 第59页 |
4.2.4 巴氏杜氏藻生长曲线的测定 | 第59页 |
4.2.5 不同盐度下藻的生长曲线及β-胡萝卜素的积累 | 第59-60页 |
4.2.6 三乙胺的加入浓度以及加入时间优化 | 第60页 |
4.2.7 缺氮、缺磷环境下加入三乙胺番茄红素的积累 | 第60-61页 |
4.3 实验结果 | 第61-68页 |
4.3.1 番茄红素标准曲线 | 第61-62页 |
4.3.2 巴氏杜氏藻生长曲线 | 第62页 |
4.3.3 不同盐度下藻的生长曲线及β-胡萝卜素的积累 | 第62-63页 |
4.3.4 三乙胺最优加入浓度与最优加入时间探究 | 第63-64页 |
4.3.5 缺氮、缺磷环境下加入三乙胺番茄红素的积累 | 第64-68页 |
4.5 小结与讨论 | 第68-69页 |
第五章 三乙胺对巴氏杜氏藻中生产番茄红素关键基因转录水平的影响 | 第69-76页 |
5.1 前言 | 第69页 |
5.2 材料与设备 | 第69-71页 |
5.2.1 藻种 | 第69页 |
5.2.2 培养基 | 第69页 |
5.2.3 试剂与仪器 | 第69-70页 |
5.2.4 主要仪器 | 第70-71页 |
5.3 实验方法 | 第71-73页 |
5.3.1 巴氏杜氏盐藻的培养及阻断剂的加入 | 第71页 |
5.3.2 mRNA提取及检测 | 第71页 |
5.3.3 mRNA反转录反应 | 第71-72页 |
5.3.4 引物 | 第72-73页 |
5.3.5 荧光定量PCR扩增反应 | 第73页 |
5.4 实验结果 | 第73-75页 |
5.5 小结与讨论 | 第75-76页 |
结论与展望 | 第76-79页 |
参考文献 | 第79-85页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
附件 | 第87页 |