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基因工程菌发酵与杜氏藻环化酶的阻遏产番茄红素的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第13-26页
    1.1 番茄红素的概述第13-17页
        1.1.1 番茄红素的简介第13-14页
        1.1.2 番茄红素的功效第14-16页
        1.1.3 番茄红素的应用第16页
        1.1.4 番茄红素生产方式第16-17页
    1.2 巴氏杜氏藻与类胡萝卜素合成途径第17-21页
        1.2.1 杜氏藻第17-18页
        1.2.2 巴氏藻中类胡萝卜素合成途径第18-21页
    1.3 基因工程菌的高密度发酵及过程优化第21-25页
        1.3.1 高密度发酵技术第21-22页
        1.3.2 影响高密度发酵的因素第22-24页
        1.3.3 补料方式对高密度发酵的影响第24-25页
    1.4 本文的主要研究内容第25-26页
第二章 番茄红素工程菌发酵条件优化第26-48页
    2.1 前言第26-27页
    2.2 实验材料第27-28页
        2.2.1 菌株第27页
        2.2.2 生化试剂第27页
        2.2.3 仪器设备第27页
        2.2.4 主要培养基配置第27-28页
    2.3 实验方法第28-31页
        2.3.1 工程菌的培养第28页
        2.3.2 菌体生物量的测定第28页
        2.3.3 番茄红素的提取与含量测定第28-29页
        2.3.4 单因素优化第29-30页
        2.3.5 响应因素水平的优化第30页
        2.3.6 发酵罐高密度培养第30-31页
    2.4 实验结果与讨论第31-47页
        2.4.1 标准曲线的绘制第31页
        2.4.2 不同培养基对菌体生长和色素积累的影响第31-33页
        2.4.3 培养温度对菌体生长和色素积累的影响第33页
        2.4.4 响应面法确定最适培养基影响因子第33-37页
        2.4.5 响应面分析第37-43页
        2.4.6 发酵罐扩大培养第43-47页
    2.5 本章小结第47-48页
第三章 用于阻遏巴氏杜氏藻生产番茄红素阻断剂的探索第48-58页
    3.1 前言第48页
    3.2 材料与设备第48-50页
        3.2.1 藻种第48-49页
        3.2.2 培养基第49-50页
        3.2.3 生化试剂第50页
        3.2.4 主要仪器第50页
    3.3 实验方法第50-51页
        3.3.1 巴氏杜氏盐藻的培养第50-51页
        3.3.2 巴氏杜氏盐藻生物量测定及阻断剂的加入第51页
        3.3.3 色素的提取鉴定以及含量测定第51页
    3.4 实验结果第51-57页
        3.4.1 藻细胞数标准曲线的确立第51-52页
        3.4.2 七种阻断剂加入剂量的探索第52页
        3.4.3 三乙胺的阻遏效果第52-54页
        3.4.4 其他阻断的阻遏效果第54-57页
    3.5 小结与讨论第57-58页
第四章 阻断生产番茄红素条件优化第58-69页
    4.1 前言第58页
    4.2 材料与方法第58-61页
        4.2.1 生化试剂第58页
        4.2.2 培养液第58-59页
        4.2.3 番茄红素标准曲线的测定第59页
        4.2.4 巴氏杜氏藻生长曲线的测定第59页
        4.2.5 不同盐度下藻的生长曲线及β-胡萝卜素的积累第59-60页
        4.2.6 三乙胺的加入浓度以及加入时间优化第60页
        4.2.7 缺氮、缺磷环境下加入三乙胺番茄红素的积累第60-61页
    4.3 实验结果第61-68页
        4.3.1 番茄红素标准曲线第61-62页
        4.3.2 巴氏杜氏藻生长曲线第62页
        4.3.3 不同盐度下藻的生长曲线及β-胡萝卜素的积累第62-63页
        4.3.4 三乙胺最优加入浓度与最优加入时间探究第63-64页
        4.3.5 缺氮、缺磷环境下加入三乙胺番茄红素的积累第64-68页
    4.5 小结与讨论第68-69页
第五章 三乙胺对巴氏杜氏藻中生产番茄红素关键基因转录水平的影响第69-76页
    5.1 前言第69页
    5.2 材料与设备第69-71页
        5.2.1 藻种第69页
        5.2.2 培养基第69页
        5.2.3 试剂与仪器第69-70页
        5.2.4 主要仪器第70-71页
    5.3 实验方法第71-73页
        5.3.1 巴氏杜氏盐藻的培养及阻断剂的加入第71页
        5.3.2 mRNA提取及检测第71页
        5.3.3 mRNA反转录反应第71-72页
        5.3.4 引物第72-73页
        5.3.5 荧光定量PCR扩增反应第73页
    5.4 实验结果第73-75页
    5.5 小结与讨论第75-76页
结论与展望第76-79页
参考文献第79-85页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第85-86页
致谢第86-87页
附件第87页

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