摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 绪论 | 第12-28页 |
1.1 莱克多巴胺的简介及研究现状 | 第12-16页 |
1.1.1 莱克多巴胺的概述 | 第12页 |
1.1.2 莱克多巴胺的理化性质 | 第12-13页 |
1.1.3 莱克多巴胺的作用原理 | 第13页 |
1.1.4 莱克多巴胺的危害以限量标准 | 第13-14页 |
1.1.5 莱克多巴胺检测方法的研究进展 | 第14-16页 |
1.1.5.1 仪器检测方法 | 第15页 |
1.1.5.2 免疫检测方法 | 第15页 |
1.1.5.3 其他检测方法 | 第15-16页 |
1.2 紫外分光光度法的概述及应用 | 第16-18页 |
1.2.1 紫外分光光度法的概述 | 第16-17页 |
1.2.2 紫外分光光度法的应用 | 第17-18页 |
1.2.2.1 在分析化合物结构方面的应用 | 第17页 |
1.2.2.2 在定性分析方面的应用 | 第17页 |
1.2.2.3 在纯度鉴定方面的应用 | 第17-18页 |
1.2.2.4 在定量分析方面的应用 | 第18页 |
1.3 免疫磁分离技术及其应用 | 第18-21页 |
1.3.1 免疫磁珠的结构与制备方法 | 第19-20页 |
1.3.2 免疫磁珠技术的应用 | 第20-21页 |
1.3.2.1 在细胞分离和检测方面的应用 | 第20页 |
1.3.2.2 在药物靶向方面的应用 | 第20-21页 |
1.3.2.3 在微生物检测方面的应用 | 第21页 |
1.4 生物素-亲和素标记系统 | 第21-23页 |
1.4.1 生物素与亲和素的概述 | 第21-22页 |
1.4.2 生物素-亲和素标记系统的类型 | 第22-23页 |
1.4.2.1 BA法或LAB法 | 第22页 |
1.4.2.2 BAB法或BRAB法 | 第22-23页 |
1.4.2.3 ABC法或SABC法 | 第23页 |
1.4.3 生物素-亲和素标记系统的应用 | 第23页 |
1.5 酶联免疫吸附法的概述及应用 | 第23-26页 |
1.5.1 酶联免疫吸附法的概述 | 第23-24页 |
1.5.2 酶联免疫吸附法的类型 | 第24-25页 |
1.5.2.1 竞争法 | 第24页 |
1.5.2.2 间接法 | 第24页 |
1.5.2.3 双抗体夹心法 | 第24-25页 |
1.5.3 酶联免疫吸附法的应用 | 第25-26页 |
1.5.3.1 在检测食品添加剂方面的应用 | 第25页 |
1.5.3.2 在检测农药残留方面的应用 | 第25-26页 |
1.6 本论文的选题意义及主要内容 | 第26-28页 |
1.6.1 选题意义 | 第26页 |
1.6.2 主要内容 | 第26-28页 |
2 β-环糊精包合富集-紫外分光光度法检测莱克多巴胺的含量 | 第28-38页 |
2.1 引言 | 第28-29页 |
2.2 实验部分 | 第29-32页 |
2.2.1 主要试剂和仪器 | 第29页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第29-30页 |
2.2.2.1 实验用水 | 第29页 |
2.2.2.2 莱克多巴胺标准贮存液 | 第29-30页 |
2.2.2.3 莱克多巴胺标准使用液 | 第30页 |
2.2.2.4 β-环糊精溶液 | 第30页 |
2.2.3 实验方法 | 第30-32页 |
2.2.3.1 富集条件的优化 | 第30页 |
2.2.3.2 标准曲线的绘制 | 第30-31页 |
2.2.3.3 样品前处理 | 第31页 |
2.2.3.4 检测方法性能指标的评价 | 第31-32页 |
2.3 结果与讨论 | 第32-37页 |
2.3.1 最佳吸收波长的确定 | 第32页 |
2.3.2 最优富集条件的确定 | 第32-35页 |
2.3.3 标准曲线的绘制 | 第35页 |
2.3.4 检测方法性能指标的评价 | 第35-37页 |
2.3.4.1 检出限 | 第36页 |
2.3.4.2 精密度及重现性 | 第36页 |
2.3.4.3 干扰的测定 | 第36页 |
2.3.4.4 添加回收率 | 第36-37页 |
2.4 本章小结 | 第37-38页 |
3 纳米磁珠分离富集肉组织中的莱克多巴胺 | 第38-50页 |
3.1 引言 | 第38页 |
3.2 实验部分 | 第38-42页 |
3.2.1 主要试剂和仪器 | 第38-40页 |
3.2.2 主要试剂的配制 | 第40页 |
3.2.2.1 10mM Sulfo-NHS-LC-Biotin溶液 | 第40页 |
3.2.2.2 0.01mol/L PBS溶液 | 第40页 |
3.2.2.3 0.02mol/LpH6 PB溶液 | 第40页 |
3.2.3 生物素化抗体的制备及定量 | 第40页 |
3.2.4 免疫磁珠的制备 | 第40-41页 |
3.2.4.1 偶联条件的优化 | 第41页 |
3.2.4.2 磁珠偶联链霉亲和素的优化 | 第41页 |
3.2.4.3 抗体标记磁珠的优化 | 第41页 |
3.2.5 吸附条件的优化 | 第41-42页 |
3.2.6 洗脱条件的优化 | 第42页 |
3.2.7 添加回收率 | 第42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-49页 |
3.3.1 生物素化抗体的制备 | 第42-43页 |
3.3.2 偶联条件的优化 | 第43页 |
3.3.2.1 偶联液的确定 | 第43页 |
3.3.2.2 偶联液pH的确定 | 第43页 |
3.3.3 磁珠偶联链霉亲和素的优化 | 第43-44页 |
3.3.4 抗体标记磁珠的优化 | 第44-45页 |
3.3.5 吸附条件的优化 | 第45-47页 |
3.3.6 洗脱条件的确定 | 第47-48页 |
3.3.7 添加回收率 | 第48-49页 |
3.4 本章小结 | 第49-50页 |
4 莱克多巴胺ELISA检测方法的建立 | 第50-66页 |
4.1 引言 | 第50页 |
4.2 实验部分 | 第50-54页 |
4.2.1 试剂与仪器 | 第50-52页 |
4.2.2 主要试剂的配制 | 第52页 |
4.2.2.1 包被缓冲液(0.05mol/L pH9.6 Na_2CO_3-NaHCO_3) | 第52页 |
4.2.2.2 稀释液(0.01mol/LpH7.4 PBS) | 第52页 |
4.2.2.3 洗涤液(pH7.4 PBST) | 第52页 |
4.2.2.4 封闭液(2.0%脱脂奶粉) | 第52页 |
4.2.2.5 终止液(2mol/LH_2SO_4) | 第52页 |
4.2.3 莱克多巴胺的检测方案 | 第52页 |
4.2.4 酶联免疫吸附法检测的最佳工艺条件 | 第52-53页 |
4.2.4.1 包被抗原与抗体最佳工作浓度的选择 | 第53页 |
4.2.4.2 封闭液的选择 | 第53页 |
4.2.4.3 竞争反应条件的选择 | 第53页 |
4.2.4.4 SA-HRP工作条件的选择 | 第53页 |
4.2.5 直接竞争ELISA检测法的建立 | 第53-54页 |
4.2.5.1 直接竞争ELISA检测法标准曲线的建立 | 第53页 |
4.2.5.2 精密度及特异性 | 第53-54页 |
4.2.6 样品前处理方法的优化 | 第54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-64页 |
4.3.2 直接竞争ELISA检测最佳工艺条件的确定 | 第54-58页 |
4.3.2.1 包被抗原与抗体最佳工作浓度的选择 | 第54-55页 |
4.3.2.2 封闭液最佳工作浓度的选择 | 第55-56页 |
4.3.2.3 竞争反应条件的选择 | 第56-57页 |
4.3.2.4 SA-HRP工作条件的选择 | 第57-58页 |
4.3.3 直接竞争ELISA检测法标准曲线的绘制 | 第58-60页 |
4.3.4 精密度 | 第60页 |
4.3.5 特异性 | 第60-61页 |
4.3.6 前处理方法优化 | 第61-63页 |
4.3.7 添加回收率 | 第63-64页 |
4.4 本章小结 | 第64-66页 |
5 结论与展望 | 第66-68页 |
5.1 结论 | 第66页 |
5.2 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
攻读硕士学位期间发表的科研成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |