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肉组织中莱克多巴胺检测方法的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第12-28页
    1.1 莱克多巴胺的简介及研究现状第12-16页
        1.1.1 莱克多巴胺的概述第12页
        1.1.2 莱克多巴胺的理化性质第12-13页
        1.1.3 莱克多巴胺的作用原理第13页
        1.1.4 莱克多巴胺的危害以限量标准第13-14页
        1.1.5 莱克多巴胺检测方法的研究进展第14-16页
            1.1.5.1 仪器检测方法第15页
            1.1.5.2 免疫检测方法第15页
            1.1.5.3 其他检测方法第15-16页
    1.2 紫外分光光度法的概述及应用第16-18页
        1.2.1 紫外分光光度法的概述第16-17页
        1.2.2 紫外分光光度法的应用第17-18页
            1.2.2.1 在分析化合物结构方面的应用第17页
            1.2.2.2 在定性分析方面的应用第17页
            1.2.2.3 在纯度鉴定方面的应用第17-18页
            1.2.2.4 在定量分析方面的应用第18页
    1.3 免疫磁分离技术及其应用第18-21页
        1.3.1 免疫磁珠的结构与制备方法第19-20页
        1.3.2 免疫磁珠技术的应用第20-21页
            1.3.2.1 在细胞分离和检测方面的应用第20页
            1.3.2.2 在药物靶向方面的应用第20-21页
            1.3.2.3 在微生物检测方面的应用第21页
    1.4 生物素-亲和素标记系统第21-23页
        1.4.1 生物素与亲和素的概述第21-22页
        1.4.2 生物素-亲和素标记系统的类型第22-23页
            1.4.2.1 BA法或LAB法第22页
            1.4.2.2 BAB法或BRAB法第22-23页
            1.4.2.3 ABC法或SABC法第23页
        1.4.3 生物素-亲和素标记系统的应用第23页
    1.5 酶联免疫吸附法的概述及应用第23-26页
        1.5.1 酶联免疫吸附法的概述第23-24页
        1.5.2 酶联免疫吸附法的类型第24-25页
            1.5.2.1 竞争法第24页
            1.5.2.2 间接法第24页
            1.5.2.3 双抗体夹心法第24-25页
        1.5.3 酶联免疫吸附法的应用第25-26页
            1.5.3.1 在检测食品添加剂方面的应用第25页
            1.5.3.2 在检测农药残留方面的应用第25-26页
    1.6 本论文的选题意义及主要内容第26-28页
        1.6.1 选题意义第26页
        1.6.2 主要内容第26-28页
2 β-环糊精包合富集-紫外分光光度法检测莱克多巴胺的含量第28-38页
    2.1 引言第28-29页
    2.2 实验部分第29-32页
        2.2.1 主要试剂和仪器第29页
        2.2.2 主要试剂的配制第29-30页
            2.2.2.1 实验用水第29页
            2.2.2.2 莱克多巴胺标准贮存液第29-30页
            2.2.2.3 莱克多巴胺标准使用液第30页
            2.2.2.4 β-环糊精溶液第30页
        2.2.3 实验方法第30-32页
            2.2.3.1 富集条件的优化第30页
            2.2.3.2 标准曲线的绘制第30-31页
            2.2.3.3 样品前处理第31页
            2.2.3.4 检测方法性能指标的评价第31-32页
    2.3 结果与讨论第32-37页
        2.3.1 最佳吸收波长的确定第32页
        2.3.2 最优富集条件的确定第32-35页
        2.3.3 标准曲线的绘制第35页
        2.3.4 检测方法性能指标的评价第35-37页
            2.3.4.1 检出限第36页
            2.3.4.2 精密度及重现性第36页
            2.3.4.3 干扰的测定第36页
            2.3.4.4 添加回收率第36-37页
    2.4 本章小结第37-38页
3 纳米磁珠分离富集肉组织中的莱克多巴胺第38-50页
    3.1 引言第38页
    3.2 实验部分第38-42页
        3.2.1 主要试剂和仪器第38-40页
        3.2.2 主要试剂的配制第40页
            3.2.2.1 10mM Sulfo-NHS-LC-Biotin溶液第40页
            3.2.2.2 0.01mol/L PBS溶液第40页
            3.2.2.3 0.02mol/LpH6 PB溶液第40页
        3.2.3 生物素化抗体的制备及定量第40页
        3.2.4 免疫磁珠的制备第40-41页
            3.2.4.1 偶联条件的优化第41页
            3.2.4.2 磁珠偶联链霉亲和素的优化第41页
            3.2.4.3 抗体标记磁珠的优化第41页
        3.2.5 吸附条件的优化第41-42页
        3.2.6 洗脱条件的优化第42页
        3.2.7 添加回收率第42页
    3.3 结果与讨论第42-49页
        3.3.1 生物素化抗体的制备第42-43页
        3.3.2 偶联条件的优化第43页
            3.3.2.1 偶联液的确定第43页
            3.3.2.2 偶联液pH的确定第43页
        3.3.3 磁珠偶联链霉亲和素的优化第43-44页
        3.3.4 抗体标记磁珠的优化第44-45页
        3.3.5 吸附条件的优化第45-47页
        3.3.6 洗脱条件的确定第47-48页
        3.3.7 添加回收率第48-49页
    3.4 本章小结第49-50页
4 莱克多巴胺ELISA检测方法的建立第50-66页
    4.1 引言第50页
    4.2 实验部分第50-54页
        4.2.1 试剂与仪器第50-52页
        4.2.2 主要试剂的配制第52页
            4.2.2.1 包被缓冲液(0.05mol/L pH9.6 Na_2CO_3-NaHCO_3)第52页
            4.2.2.2 稀释液(0.01mol/LpH7.4 PBS)第52页
            4.2.2.3 洗涤液(pH7.4 PBST)第52页
            4.2.2.4 封闭液(2.0%脱脂奶粉)第52页
            4.2.2.5 终止液(2mol/LH_2SO_4)第52页
        4.2.3 莱克多巴胺的检测方案第52页
        4.2.4 酶联免疫吸附法检测的最佳工艺条件第52-53页
            4.2.4.1 包被抗原与抗体最佳工作浓度的选择第53页
            4.2.4.2 封闭液的选择第53页
            4.2.4.3 竞争反应条件的选择第53页
            4.2.4.4 SA-HRP工作条件的选择第53页
        4.2.5 直接竞争ELISA检测法的建立第53-54页
            4.2.5.1 直接竞争ELISA检测法标准曲线的建立第53页
            4.2.5.2 精密度及特异性第53-54页
        4.2.6 样品前处理方法的优化第54页
    4.3 结果与讨论第54-64页
        4.3.2 直接竞争ELISA检测最佳工艺条件的确定第54-58页
            4.3.2.1 包被抗原与抗体最佳工作浓度的选择第54-55页
            4.3.2.2 封闭液最佳工作浓度的选择第55-56页
            4.3.2.3 竞争反应条件的选择第56-57页
            4.3.2.4 SA-HRP工作条件的选择第57-58页
        4.3.3 直接竞争ELISA检测法标准曲线的绘制第58-60页
        4.3.4 精密度第60页
        4.3.5 特异性第60-61页
        4.3.6 前处理方法优化第61-63页
        4.3.7 添加回收率第63-64页
    4.4 本章小结第64-66页
5 结论与展望第66-68页
    5.1 结论第66页
    5.2 展望第66-68页
参考文献第68-76页
攻读硕士学位期间发表的科研成果第76-77页
致谢第77-78页

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