| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·抗体概述 | 第7-8页 |
| ·单克隆抗体简介 | 第7-8页 |
| ·单链抗体与单域抗体简介 | 第8页 |
| ·大肠杆菌表达外源重组蛋白研究概述 | 第8-9页 |
| ·大肠杆菌表达系统简介 | 第8页 |
| ·大肠杆菌表达系统表达重组蛋白的研究现状 | 第8-9页 |
| ·目前仍需解决的问题 | 第9页 |
| ·由蛋白质氨基酸序列预测蛋白表达水平的研究进展 | 第9-10页 |
| ·多元线性回归分析 | 第10-11页 |
| ·立题依据与意义 | 第11-12页 |
| ·抗体片段是合适的分子模型，研究成果具有实用意义 | 第11-12页 |
| ·解析抗体片段蛋白质序列与表达量的关系，有助于缩短抗体药物研发时间 | 第12页 |
| ·主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-22页 |
| ·实验材料 | 第13-14页 |
| ·宿主菌和质粒 | 第13页 |
| ·主要试剂、试剂盒及纯化柱 | 第13页 |
| ·培养基及主要溶液 | 第13-14页 |
| ·主要仪器设备 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-20页 |
| ·发酵罐培养方法 | 第14页 |
| ·抗体纯化方法 | 第14-15页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第15-16页 |
| ·Western Blot鉴定scFv | 第16页 |
| ·菌株构建及保存方法 | 第16-19页 |
| ·48 孔深孔培养板平行发酵培养方法 | 第19页 |
| ·菌体破碎方法 | 第19-20页 |
| ·直接酶联免疫分析法测定dAb含量 | 第20页 |
| ·Bradford法检测总蛋白含量 | 第20页 |
| ·数据分析方法 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-36页 |
| ·scFv的表达及纯化 | 第22-24页 |
| ·pBW-sc Fv重组表达载体的酶切鉴定 | 第22页 |
| ·发酵罐培养表达scFv | 第22-23页 |
| ·scFv纯品制备及Western blot鉴定 | 第23-24页 |
| ·Bradford法测定scFv纯品浓度 | 第24页 |
| ·氨基酸组成对dAb可溶性表达量的影响 | 第24-36页 |
| ·构建dAb重组菌株及突变文库 | 第25-27页 |
| ·dAb含量测定 | 第27-30页 |
| ·C端添加单个氨基酸对dAb表达水平的影响 | 第30-32页 |
| ·氨基酸组成对dAb表达水平的影响 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 主要结论与展望 | 第36-37页 |
| 主要结论 | 第36页 |
| 展望 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 附录: 二十种氨基酸的缩写 | 第42-43页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43页 |