| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| ·2-O-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸 (AA-2G)概述 | 第9-12页 |
| ·AA-2G的理化性质 | 第9-10页 |
| ·AA-2G的生理功能及用途 | 第10页 |
| ·AA-2G的合成方法 | 第10-11页 |
| ·AA-2G的分离纯化 | 第11-12页 |
| ·CGTase生产AA-2G的概述 | 第12-14页 |
| ·CGTase催化合成AA-2G的机理 | 第12-13页 |
| ·CGTase合成AA-2G的研究进展 | 第13-14页 |
| ·酵母细胞表面展示系统简介 | 第14-16页 |
| ·絮凝素系统 | 第15页 |
| ·凝集素系统 | 第15-16页 |
| ·立题依据及意义 | 第16页 |
| ·本论文的研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料和方法 | 第17-25页 |
| ·菌种与质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·基因工程相关操作方法 | 第18-20页 |
| ·密码子优化 | 第18页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第18页 |
| ·重组表达载体构建及鉴定 | 第18-19页 |
| ·E. coli感受态细胞的热激转化 | 第19页 |
| ·S. cerevisiae EBY100 感受态细胞的热激转化 | 第19-20页 |
| ·突变质粒的构建与转化 | 第20页 |
| ·发酵方法 | 第20-21页 |
| ·重组E. coli BL21(DE3)摇瓶发酵培养 | 第20页 |
| ·表面展示CGTase诱导表达 | 第20-21页 |
| ·分析方法 | 第21-24页 |
| ·CGTase酶活的测定 | 第21-22页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第22页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第22页 |
| ·CGTase的分离纯化 | 第22-23页 |
| ·CGTase的酶学性质研究 | 第23-24页 |
| ·突变体酶法合成AA-2G的动力学参数测定 | 第24页 |
| ·AA-2G的酶转化工艺 | 第24-25页 |
| ·AA-2G制备流程 | 第24页 |
| ·AA-2G检测方法 | 第24-25页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第25-48页 |
| ·B. stearothermophilus C GTase在E. coli中的异源表达及酶学性质研究 | 第25-31页 |
| ·产B. stearothermophilus C GTase基因工程菌的构建 | 第25-27页 |
| ·重组CGTase在E. coli BL21(DE3)中的表达 | 第27-28页 |
| ·重组CGTase的酶学性质研究 | 第28-31页 |
| ·不同来源CGTase合成AA-2G的条件优化与比较 | 第31-35页 |
| ·反应温度对生产AA-2G的影响 | 第31-32页 |
| ·pH对生产AA-2G的影响 | 第32-33页 |
| ·加酶量对生产AA-2G的影响 | 第33页 |
| ·底物配比对生产AA-2G的影响 | 第33-34页 |
| ·反应时间对生产AA-2G的影响 | 第34-35页 |
| ·CGTase关键氨基酸残基对合成AA-2G的影响 | 第35-39页 |
| ·CGTase影响AA-2G合成的差异位点分析 | 第35页 |
| ·突变体的构建及酶学性质研究 | 第35-37页 |
| ·突变体对合成AA-2G的影响 | 第37-39页 |
| ·酿酒酵母表面展示CGTase生产AA-2G的初步研究 | 第39-48页 |
| ·酿酒酵母表面展示基因工程菌的构建 | 第39-41页 |
| ·表面展示CGTase诱导表达 | 第41-43页 |
| ·表面展示CGTase酶学性质初步研究 | 第43-44页 |
| ·表面展示CGTase生产AA-2G的研究 | 第44-48页 |
| 主要结论与展望 | 第48-49页 |
| 主要结论 | 第48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
