| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·α-乙酰乳酸脱羧酶概述 | 第8页 |
| ·α-乙酰乳酸脱羧酶及其特性 | 第8页 |
| ·α-ALDC 的作用机理 | 第8页 |
| ·α-ALDC 与啤酒工业 | 第8-10页 |
| ·双乙酰的生成 | 第8-9页 |
| ·双乙酰的控制 | 第9-10页 |
| ·α-ALDC 在啤酒发酵中的应用 | 第10页 |
| ·α-ALDC 的国内外研究现状 | 第10-15页 |
| ·ALDC 产生菌及其筛选 | 第10-11页 |
| ·α-ALDC 的分子生物学研究 | 第11-12页 |
| ·ALDC 基因的克隆表达研究 | 第12-13页 |
| ·α-ALDC 的酶学性质研究 | 第13-15页 |
| ·本课题的研究意义及主要研究内容 | 第15-16页 |
| ·研究意义 | 第15页 |
| ·主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-25页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第16-17页 |
| ·引物设计 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·培养基及培养条件 | 第18页 |
| ·主要试剂配制 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·α-ALDC 产生菌的筛选与鉴定 | 第19页 |
| ·S. aureus α-ALDC 基因 Saald 和 B. subtilis α-ALDC 基因 BsalsD 的克隆 | 第19页 |
| ·重组质粒 pET-28a(+)-Saald 与 pET-28a(+)-BsalsD 的构建 | 第19-20页 |
| ·重组大肠杆菌的构建及其诱导表达 | 第20页 |
| ·重组质粒 pMA5-Saald 与 pMA5-BsalsD 的构建 | 第20-21页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的构建与表达 | 第21页 |
| ·重组α-ALDC 的纯化及酶学性质研究 | 第21-22页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌产酶发酵研究 | 第22页 |
| ·5 L 发酵罐中重组枯草芽孢杆菌的发酵研究 | 第22-23页 |
| ·分析及检测方法 | 第23-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-52页 |
| ·α-ALDC 产生菌的筛选与鉴定 | 第25-28页 |
| ·α-ALDC 产生菌的筛选 | 第25页 |
| ·菌株 L 3-15 和 L 5-20 的形态学特征 | 第25-26页 |
| ·菌株 L 3-15 和 L 5-20 的生理生化反应 | 第26-27页 |
| ·菌株 L3-15 和 L5-20 的 16S rRNA 序列分析 | 第27-28页 |
| ·重组大肠杆菌的构建及其诱导表达研究 | 第28-32页 |
| ·α-ALDC 基因的克隆与分析 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 pET-28a(+)-Saald 和 pET-28a(+)-BsalsD 的构建及分析 | 第29-30页 |
| ·重组大肠杆菌的构建及诱导表达 | 第30-32页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的构建及其表达 | 第32-36页 |
| ·α-ALDC 基因的克隆与分析 | 第32-33页 |
| ·重组质粒 pMA5-Saald 和 pMA5-BsalsD 的构建 | 第33-34页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的构建及表达 | 第34-36页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌 SaALDC 和 BsALDC 的纯化及酶学性质研究比较 | 第36-41页 |
| ·重组α-ALDC 的纯化 | 第36-37页 |
| ·重组 SaALDC 和 BsALDC 最适 pH 及 pH 稳定性的比较研究 | 第37-38页 |
| ·重组 SaALDC 和 BsALDC 最适反应温度及温度稳定性的比较研究 | 第38-39页 |
| ·不同金属离子以及 EDTA 对酶活的影响 | 第39-40页 |
| ·Km值及Vmax的测定 | 第40-41页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的发酵产酶优化 | 第41-52页 |
| ·产酶发酵培养基中的菌体生长及产酶特征曲线 | 第41-42页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌发酵培养基的初步优化 | 第42-48页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌发酵条件的初步优化 | 第48-51页 |
| ·5 L 发酵罐中重组枯草芽孢杆菌的发酵产酶研究 | 第51-52页 |
| 主要结论与展望 | 第52-54页 |
| 主要结论 | 第52-53页 |
| 展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录一：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59-60页 |
| 附录二：缩略词表 | 第60页 |
