| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1、概况 | 第12-17页 |
| 2、本研究方法的基本原理 | 第17-18页 |
| 3、技术关键问题概述、项目创新点概述 | 第18-19页 |
| 4、技术关键问题的解决 | 第19-20页 |
| 5、项目创新点 | 第20-21页 |
| 6、技术特点总结 | 第21-22页 |
| 第二章 普通 PCR 方法检测鸭源性成分方法研究 | 第22-40页 |
| 1、材料与方法 | 第22-28页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第22页 |
| 1.1.1 材料 | 第22页 |
| 1.1.2 试剂 | 第22页 |
| 1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 1.3 方法 | 第22-28页 |
| 1.3.1 畜肉加工制品样品前处理 | 第22-23页 |
| 1.3.2 饲料样品前处理 | 第23页 |
| 1.3.3 家鸭、羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿肉、酱鸭脖、酱鸭肠等 DNA 的提取 | 第23-24页 |
| 1.3.4 动物饲料DNA的提取 | 第24-25页 |
| 1.3.4.1 CTAB法制备非油脂类饲料模板DNA | 第24页 |
| 1.3.4.2 CTAB法制备油脂类饲料模板DNA | 第24-25页 |
| 1.3.4.3 试剂盒法 | 第25页 |
| 1.3.5 引物设计 | 第25页 |
| 1.3.6 反应体系和反应条件 | 第25-26页 |
| 1.3.7 限制性内切酶及其产物检测 | 第26-27页 |
| 1.3.8 基因测序 | 第27页 |
| 1.3.9 退火温度的优化 | 第27页 |
| 1.3.10 特异性实验 | 第27页 |
| 1.3.11 灵敏度实验 | 第27页 |
| 1.3.12 PCR 方法用于实际食品样品检测 | 第27页 |
| 1.3.13 PCR 方法用于检测加工肉制品中鸭源性成分 | 第27页 |
| 1.3.14 PCR 方法用于检测动物饲料中鸭源性成分 | 第27页 |
| 1.3.15 PCR 方法检测动物饲料中鸭源性成分灵敏度试验 | 第27-28页 |
| 2、结果与分析 | 第28-37页 |
| 2.1 酱鸭肠、酱鸭脖、添加鸭骨粉的饲料中 DNA 提取效果 | 第28页 |
| 2.2 PCR 扩增电泳检测结果 | 第28-29页 |
| 2.3 退火温度的优化 | 第29-30页 |
| 2.4 限制性内切酶及其产物检测 | 第30页 |
| 2.5 鸭 PCR 产物测序 | 第30-32页 |
| 2.6 引物特异性验证 | 第32页 |
| 2.7 灵敏度实验 | 第32-33页 |
| 2.8 市售羊肉卷和肉板中的鸭源性成分检测 | 第33-34页 |
| 2.9 市售加工肉制品中鸭源性成分检测 | 第34页 |
| 2.10 动物饲料中鸭源性成分检测 | 第34-35页 |
| 2.11 饲料中鸭源性成分灵敏度试验 | 第35-37页 |
| 3、讨论 | 第37-39页 |
| 4、小结 | 第39-40页 |
| 第三章 荧光定量 PCR 方法检测鸭源性成分 | 第40-64页 |
| 1、材料与试剂 | 第40-46页 |
| 1.1 材料 | 第40页 |
| 1.2 试剂 | 第40页 |
| 1.3 主要仪器 | 第40页 |
| 1.4 方法 | 第40-46页 |
| 1.4.1 畜肉加工制品样品前处理[49] | 第40-41页 |
| 1.4.2 饲料样品前处理 | 第41页 |
| 1.4.3. 家鸭、羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、猪肉、兔肉、马肉、鹿肉、酱鸭脖、酱鸭肠、动物饲料等 DNA 的提取 | 第41页 |
| 1.4.4 动物饲料 DNA 的提取 | 第41-42页 |
| 1.4.4.1 CTAB法制备非油脂类饲料模板DNA | 第41-42页 |
| 1.4.4.2 CTAB法制备油脂类饲料模板DNA | 第42页 |
| 1.4.5 引物设计 | 第42-43页 |
| 1.4.6 反应体系和反应条件 | 第43-45页 |
| 1.4.7 退火温度的优化 | 第45页 |
| 1.4.8 特异性实验 | 第45页 |
| 1.4.9 灵敏度实验 | 第45页 |
| 1.4.10 荧光定量 PCR 方法用于实际食品样品检测 | 第45页 |
| 1.4.11 荧光定量 PCR 方法用于检测加工肉制品中鸭源性成分 | 第45页 |
| 1.4.12 荧光定量 PCR 方法用于检测动物饲料中鸭源性成分 | 第45页 |
| 1.4.13 荧光定量 PCR 方法用于检测动物饲料中鸭源性成分 | 第45页 |
| 1.4.14 荧光定量 PCR 方法检测动物饲料中鸭源性成分灵敏度试验 | 第45-46页 |
| 2、结果与分析 | 第46-60页 |
| 2.1 鸭源性成分荧光定量 PCR 方法的建立与标准化 | 第46-49页 |
| 2.1.1 荧光定量 PCR 反应优化结果 | 第46-47页 |
| 2.1.2 荧光 PCR 扩增检测结果 | 第47-49页 |
| 2.2 退火温度的优化 | 第49-51页 |
| 2.3 荧光 PCR 检测特异性试验结果 | 第51-52页 |
| 2.4 荧光PCR方法检测的最低质量数测定 | 第52-53页 |
| 2.5 市售羊肉卷和肉板中的鸭源性成分检测 | 第53-55页 |
| 2.6 市售加工肉制品中鸭源性成分检测 | 第55-57页 |
| 2.7 动物饲料中鸭源性成分检测 | 第57-58页 |
| 2.8 饲料中鸭源性成分灵敏度试验 | 第58-60页 |
| 3、讨论 | 第60-63页 |
| 3.1 关于鸭源性成分检测 | 第60页 |
| 3.2 关于靶基因细胞色素C氧化酶III基因 | 第60-61页 |
| 3.3 关于实时定量荧光 PCR | 第61-62页 |
| 3.4 关于荧光 PCR 的引物、探针 | 第62页 |
| 3.5 关于荧光定量PCR操作过程中应注意的问题 | 第62-63页 |
| 4、小结 | 第63-64页 |
| 英文缩写词表 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
