基因工程菌产β-葡聚糖酶发酵条件的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-16页 |
| ·β-葡聚糖 | 第8页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶概况 | 第8-9页 |
| ·β-葡聚糖酶的分类 | 第8-9页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶的来源 | 第9页 |
| ·β-葡聚糖酶的作用机理 | 第9页 |
| ·液体发酵生产β-葡聚糖酶 | 第9-12页 |
| ·液体发酵生产β-葡聚糖酶的类型 | 第9-10页 |
| ·液体发酵生产β-葡聚糖酶的影响因素 | 第10-12页 |
| ·β-葡聚糖酶稳定性的研究进展 | 第12-13页 |
| ·β-葡聚糖酶的基因工程研究进展 | 第13页 |
| ·β-葡聚糖酶的应用 | 第13-14页 |
| ·在啤酒工业中的应用 | 第13-14页 |
| ·在饲料中的应用 | 第14页 |
| ·在人类营养健康方面的应用 | 第14页 |
| ·立题背景及意义 | 第14-15页 |
| ·课题主要研究内容 | 第15-16页 |
| 2 实验材料与方法 | 第16-24页 |
| ·实验材料与设备 | 第16-17页 |
| ·菌种 | 第16页 |
| ·主要材料与试剂 | 第16页 |
| ·实验设备 | 第16-17页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-24页 |
| ·菌种的活化、扩大培养和保藏 | 第17页 |
| ·菌体生物量的测定 | 第17-18页 |
| ·β-葡聚糖酶酶活性的测定 | 第18页 |
| ·蛋白的测定 | 第18-19页 |
| ·产β-葡聚糖酶基因工程菌发酵培养基的优化 | 第19-20页 |
| ·产β-葡聚糖酶基因工程菌培养条件的优化 | 第20页 |
| ·产β-葡聚糖酶基因工程菌诱导条件的优化 | 第20-21页 |
| ·5 L 发酵罐放大实验 | 第21页 |
| ·β-葡聚糖酶的分离纯化 | 第21页 |
| ·β-葡聚糖酶酶学特性的研究 | 第21-22页 |
| ·β-葡聚糖酶保护剂的研究 | 第22-24页 |
| 3 结果与讨论 | 第24-48页 |
| ·产β-葡聚糖酶基因工程菌发酵培养基的优化 | 第24-30页 |
| ·种子生长曲线及种龄的确定 | 第24页 |
| ·碳源 | 第24-25页 |
| ·碳源浓度 | 第25-26页 |
| ·酵母粉浓度 | 第26页 |
| ·蛋白胨浓度 | 第26-27页 |
| ·磷酸盐浓度 | 第27-28页 |
| ·金属离子 | 第28页 |
| ·Ca~(2+)浓度 | 第28-29页 |
| ·表面活性剂 | 第29-30页 |
| ·最佳培养基的验证 | 第30页 |
| ·产β-葡聚糖酶基因工程菌培养条件的优化 | 第30-33页 |
| ·接种量 | 第30-31页 |
| ·培养基初始 pH | 第31页 |
| ·装液量 | 第31-32页 |
| ·正交实验 | 第32-33页 |
| ·产β-葡聚糖酶基因工程菌诱导条件的优化 | 第33-37页 |
| ·诱导剂浓度 | 第33-34页 |
| ·诱导剂添加时机 | 第34-35页 |
| ·诱导持续时间 | 第35页 |
| ·诱导温度 | 第35-36页 |
| ·优化前后的效果比较 | 第36-37页 |
| ·5 L 发酵罐放大实验 | 第37-38页 |
| ·β-葡聚糖酶的分离纯化 | 第38-39页 |
| ·(NH_4)_2SO_4沉淀曲线 | 第38页 |
| ·β-葡聚糖酶的亲和层析纯化 | 第38-39页 |
| ·β-葡聚糖酶酶学特性的研究 | 第39-42页 |
| ·最适反应温度的测定 | 第39-40页 |
| ·热稳定性的研究 | 第40页 |
| ·最适反应 pH 的测定 | 第40-41页 |
| ·酸碱稳定性的研究 | 第41页 |
| ·金属离子对β-葡聚糖酶的影响 | 第41-42页 |
| ·β-葡聚糖酶保护剂的研究 | 第42-48页 |
| ·β-葡聚糖酶半衰期的测定 | 第42页 |
| ·保护剂的筛选 | 第42-45页 |
| ·正交实验 | 第45-46页 |
| ·复合保护剂对β-葡聚糖酶的影响 | 第46-48页 |
| 主要结论 | 第48-49页 |
| 展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-62页 |
| 附图 | 第62-63页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |
