| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-14页 |
| ·构建理想的CDNA文库需要考虑的因素: | 第11页 |
| ·CDNA文库的主要用途: | 第11-12页 |
| ·构建海藻糖生产菌CDNA文库的意义: | 第12-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-24页 |
| ·材料 | 第14-16页 |
| ·方法 | 第16-24页 |
| ·酵母总RNA提取方法的比较 | 第16-17页 |
| ·MRNA的分离 | 第17-18页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第18页 |
| ·合成cDNA第二链 | 第18页 |
| ·cDNA沉淀 | 第18-19页 |
| ·cDNA分级纯化 | 第19页 |
| ·ECORⅠ-NOTⅠ-BAMHⅠ ADAPTOR与CDNA的连接及5’端磷酸化 | 第19-20页 |
| ·除去多余的ADAPTOR | 第20页 |
| ·载体的酶切及去磷酸化 | 第20页 |
| ·连接与转化 | 第20-21页 |
| ·cDNA文库的保存与扩增 | 第21-22页 |
| ·文库质量的鉴定 | 第22页 |
| ·TPS1基因的PCR扩增 | 第22-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-32页 |
| ·总RNA的提取结果 | 第24-26页 |
| ·MRNA的分离纯化结果 | 第26页 |
| ·cDNA合成与纯化 | 第26页 |
| ·pUC18载体的酶切 | 第26页 |
| ·cDNA文库构建 | 第26-28页 |
| ·重组质粒的提取及酶切鉴定结果 | 第28页 |
| ·TPS1基因的PCR扩增结果 | 第28-29页 |
| ·测序结果 | 第29-32页 |
| 4 讨论 | 第32-37页 |
| ·提高总RNA质量的措施 | 第32页 |
| ·MRNA的分离纯化 | 第32-33页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第33-36页 |
| ·TPS1基因的PCR扩增结果 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献: | 第38-41页 |
| 附录 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42页 |