| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·苹果酸脱氢酶的催化特性、反应机理及其三维结构 | 第8-10页 |
| ·苹果酸脱氢酶的催化特性 | 第8页 |
| ·苹果酸脱氢酶的反应机理 | 第8-9页 |
| ·苹果酸脱氢酶的三维结构 | 第9页 |
| ·苹果酸天冬氨酸穿梭系统 | 第9-10页 |
| ·苹果酸脱氢酶的来源及分布 | 第10-11页 |
| ·苹果酸脱氢酶分离纯化的研究进展 | 第11-12页 |
| ·苹果酸脱氢酶的实际应用价值 | 第12-14页 |
| ·用于定量测定L-苹果酸 | 第12页 |
| ·用于定量测定发酵液中的醋酸 | 第12-13页 |
| ·用于定量测定发酵液中的柠檬酸 | 第13页 |
| ·用作生产血清门冬氨酸氨基转移酶（AST）测定试剂盒的主要原料 | 第13页 |
| ·用于测定血清中总 CO_2 的含量 | 第13-14页 |
| ·课题研究意义及内容 | 第14-16页 |
| 第二章 猪心肌苹果酸脱氢酶制备工艺研究 | 第16-30页 |
| ·材料与方法 | 第16-19页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·原料 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·试剂配置方法 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-19页 |
| ·酶活测定方法 | 第17-18页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第18页 |
| ·猪心MDH 粗酶液的制备 | 第18页 |
| ·丙酮沉淀法与硫酸铵沉淀法 | 第18页 |
| ·Sephadex G-25 Fine 凝胶过滤（φ1.6 cm×80 cm） | 第18-19页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析（φ1.6 cm×30 cm） | 第19页 |
| ·Phenyl Sepharose 6 Fast Flow 疏水层析（φ1.6 cm×30 cm） | 第19页 |
| ·Sephadex G-75 Fine 凝胶过滤（φ1.6 cm×80 cm） | 第19页 |
| ·结果与讨论 | 第19-27页 |
| ·匀浆缓冲液的选择与用量的确定 | 第19-20页 |
| ·Bradford 法测定蛋白含量的标准曲线 | 第20-21页 |
| ·丙酮分级沉淀与硫酸铵分级沉淀的效果比较 | 第21-22页 |
| ·硫酸铵分级沉淀工艺条件的确定 | 第22-23页 |
| ·Sephadex G-25 Fine 凝胶过滤 | 第23-24页 |
| ·DEAE 离子交换层析对MDH 纯化效果的影响 | 第24-25页 |
| ·Phenyl Sepharose 6 Fast Flow 疏水层析 | 第25-26页 |
| ·Sephadex G-75 Fine 凝胶过滤 | 第26-27页 |
| ·本章小结 | 第27-30页 |
| ·分离纯化总流程 | 第27-28页 |
| ·纯化结果 | 第28页 |
| ·展望 | 第28-30页 |
| 第三章 猪心肌苹果酸脱氢酶性质及稳定性研究 | 第30-40页 |
| ·材料与方法 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·酶活测定方法 | 第30页 |
| ·MDH 最适反应温度及热稳定性的测定 | 第30页 |
| ·MDH 最适反应pH 及pH 稳定性的测定 | 第30-31页 |
| ·MDH 的酶促反应动力学 | 第31页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第31页 |
| ·醇类对苹果酸脱氢酶的热稳定性的影响 | 第31页 |
| ·MDH 的分子量的测定 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-37页 |
| ·最适反应温度及热稳定性 | 第31-33页 |
| ·最适反应pH 及pH 稳定性 | 第33-34页 |
| ·MDH 的酶促反应动力学 | 第34页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第34-35页 |
| ·MDH 的分子量的测定与双亚基推测 | 第35-36页 |
| ·醇类对苹果酸脱氢酶的热稳定性的影响 | 第36页 |
| ·不同稳定剂对MDH 存放稳定性的影响 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-40页 |
| 第四章 苹果酸脱氢酶在葡萄酒检测中的应用研究 | 第40-44页 |
| ·材料与方法 | 第40-41页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·葡萄酒中L-苹果酸的检测原理 | 第40页 |
| ·L-苹果酸测定的操作方法 | 第40-41页 |
| ·样品处理 | 第41页 |
| ·回收率计算 | 第41页 |
| ·精密度计算 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-43页 |
| ·测定葡萄酒中L-苹果酸方法的建立 | 第41-42页 |
| ·标准样品中L-苹果酸的测定结果 | 第42-43页 |
| ·MDH 测定葡萄酒中L-苹果酸的结果 | 第43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |
