重组胆固醇氧化酶表达的发酵优化
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第7-15页 |
| ·胆固醇氧化酶及其来源 | 第7页 |
| ·提高重组酶的可溶表达的方法 | 第7-10页 |
| ·诱导剂的选择 | 第8页 |
| ·改变诱导方式 | 第8-9页 |
| ·降低培养温度 | 第9页 |
| ·改变培养基的组成 | 第9-10页 |
| ·重组大肠杆菌高密度发酵补料技术 | 第10-13页 |
| ·高密度发酵的限制因素 | 第10-11页 |
| ·高密度发酵的补料策略 | 第11-13页 |
| ·乳糖诱导的流加策略 | 第13页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-19页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·菌种 | 第15页 |
| ·试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·培养基及诱导剂 | 第15页 |
| ·培养方法 | 第15-16页 |
| ·种子制备 | 第16页 |
| ·摇瓶培养 | 第16页 |
| ·分批培养 | 第16页 |
| ·分批补料培养 | 第16页 |
| ·分析方法 | 第16-19页 |
| ·菌体浓度测定 | 第16-17页 |
| ·蛋白浓度分析 | 第17页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第17-18页 |
| ·胆固醇氧化酶活力测定 | 第18页 |
| ·其他 | 第18-19页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第19-41页 |
| ·诱导物选择对重组COD表达的影响 | 第19-26页 |
| ·天然诱导物与合成诱导物诱导COD表达的比较 | 第19-20页 |
| ·诱导物调整后的发酵培养基优化 | 第20-23页 |
| ·诱导发酵COD的条件确定 | 第23-26页 |
| ·双程培养策略提高活性COD产率的研究 | 第26-33页 |
| ·降低培养温度提高活性COD产率的研究 | 第27-29页 |
| ·改变诱导阶段pH提高活性COD产率 | 第29-32页 |
| ·双程培养提高活性胆固醇氧化酶表达 | 第32-33页 |
| ·7L发酵罐中综合调整活性COD发酵工艺的研究 | 第33-41页 |
| ·分批培养结束后乳糖直接诱导COD发酵工艺 | 第33-35页 |
| ·先提高菌浓再提高酶得率的发酵工艺 | 第35-38页 |
| ·综合外因和内因优化策略提高活性COD产率的结果 | 第38-41页 |
| 结论 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
