| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| ·大肠杆菌表达系统介绍 | 第9-12页 |
| ·大肠杆菌蛋白分泌系统简介 | 第9页 |
| ·蛋白分泌强化策略 | 第9-12页 |
| ·磷脂酶C及模型蛋白简介 | 第12-14页 |
| ·磷脂酶C | 第12页 |
| ·天然胞外定位型模型蛋白 | 第12-13页 |
| ·天然胞内定位型模型蛋白 | 第13-14页 |
| ·本论文的立题依据及意义 | 第14页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
| ·菌种与质粒 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·培养方法 | 第17页 |
| ·重组质粒构建方法 | 第17-19页 |
| ·PCR | 第17-18页 |
| ·载体连接方法 | 第18-19页 |
| ·Bacillus cereus基因组DNA提取方法 | 第19页 |
| ·质粒DNA提取方法 | 第19页 |
| ·琼脂糖凝胶回收DNA片段 | 第19页 |
| ·分析方法 | 第19-22页 |
| ·菌体干重（DCW）测定方法 | 第19页 |
| ·蛋白浓度测定方法 | 第19页 |
| ·酶活测定方法 | 第19-21页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测方法 | 第21-22页 |
| ·透射电镜（Transmission electron microscopy, TEM）分析 | 第22页 |
| ·蛋白纯化方法 | 第22页 |
| ·木聚糖酶纯化方法 | 第22页 |
| ·葡萄糖异构酶纯化方法 | 第22页 |
| ·酶学性质测定方法 | 第22-24页 |
| ·最适温度及温度稳定性分析 | 第22-23页 |
| ·最适p H及p H稳定性分析 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-49页 |
| ·磷脂酶C在E. coli BL21(DE3)中的克隆表达 | 第24-27页 |
| ·重组质粒p ETDuet1plc的构建 | 第24-25页 |
| ·磷脂酶C在E. coli BL21(DE3)中的表达 | 第25-27页 |
| ·磷脂酶C与天然胞外定位蛋白共表达 | 第27-39页 |
| ·磷脂酶C与 β-半乳糖苷酶共表达 | 第27-28页 |
| ·磷脂酶C与 α-环糊精葡萄糖基转移酶共表达 | 第28-30页 |
| ·磷脂酶C与木聚糖酶共表达 | 第30-33页 |
| ·木聚糖酶的纯化和酶学性质 | 第33-36页 |
| ·木聚糖酶胞外表达重组菌的 3 L罐高密度发酵 | 第36-39页 |
| ·磷脂酶C与天然胞内定位蛋白共表达 | 第39-49页 |
| ·磷脂酶C与异淀粉酶共表达 | 第39页 |
| ·磷脂酶C与海藻糖合酶共表达 | 第39-41页 |
| ·磷脂酶C与葡萄糖异构酶共表达 | 第41-43页 |
| ·葡萄糖异构酶的纯化和酶学性质 | 第43-47页 |
| ·葡萄糖异构酶胞外表达重组菌的 3 L罐高密度发酵 | 第47-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-51页 |
| 主要结论 | 第49页 |
| 展望 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第60页 |
