微生物异亮氨酸双加氧酶的筛选和表达及其转化合成羟基异亮氨酸
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-18页 |
| ·加氧酶的研究进展 | 第7-12页 |
| ·真菌来源的加氧酶 | 第8-9页 |
| ·细菌来源的加氧酶 | 第9-11页 |
| ·放线菌来源的加氧酶 | 第11-12页 |
| ·其他来源的加氧酶 | 第12页 |
| ·羟基氨基酸生物合成研究进展 | 第12-15页 |
| ·羟基氨基酸的应用与生物合成 | 第13-14页 |
| ·羟基异亮氨酸的应用与生物合成 | 第14-15页 |
| ·论文的研究意义和主要研究内容 | 第15-18页 |
| ·课题来源 | 第15-16页 |
| ·课题研究意义 | 第16页 |
| ·课题主要研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-24页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第18页 |
| ·试剂药品 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18-19页 |
| ·主要培养基 | 第19页 |
| ·菌株筛选 | 第19-20页 |
| ·芽孢杆菌的筛选 | 第19页 |
| ·酶标显色检测方法 | 第19-20页 |
| ·薄层层析检测方法 | 第20页 |
| ·生理生化分析 | 第20页 |
| ·基因组 DNA 提取和质粒的提取 | 第20页 |
| ·目的基因的克隆 | 第20页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第20-21页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第21页 |
| ·重组菌的生物转化反应 | 第21页 |
| ·生物转化反应条件优化 | 第21-23页 |
| ·转化反应体系优化 | 第21页 |
| ·补加碳源对转化的影响 | 第21-22页 |
| ·补加原料策略 | 第22页 |
| ·转化反应条件优化 | 第22页 |
| ·反应溶剂选择 | 第22页 |
| ·细胞透性化处理 | 第22页 |
| ·细胞温育策略 | 第22-23页 |
| ·底物与产物的分析检测方法 | 第23-24页 |
| ·反应液衍生化 | 第23页 |
| ·HPLC 检测条件 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-37页 |
| ·产酶菌株的筛选 | 第24-27页 |
| ·菌株筛选 | 第24页 |
| ·生理生化分析 | 第24-25页 |
| ·进化分析 | 第25-27页 |
| ·加氧酶基因的克隆与表达 | 第27-29页 |
| ·加氧酶基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·加氧酶基因的表达 | 第28-29页 |
| ·重组菌全细胞转化反应条件优化 | 第29-37页 |
| ·反应体系组成对转化效率的影响 | 第29-31页 |
| ·细胞浓度对转化效率的影响 | 第31页 |
| ·添加碳源对转化效率的影响 | 第31-32页 |
| ·补加原料对转化效率的影响 | 第32-33页 |
| ·反应条件对转化效率的影响 | 第33页 |
| ·反应液溶剂对转化效率的影响 | 第33-34页 |
| ·细胞透性化处理对转化效率的影响 | 第34-35页 |
| ·过夜温育细胞对转化效率的影响 | 第35页 |
| ·各优化条件下的转化反应时间进程曲线 | 第35-37页 |
| 主要结论与展望 | 第37-39页 |
| 主要结论 | 第37-38页 |
| 展望 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |
