| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·过氧化氢酶概述 | 第7-9页 |
| ·过氧化氢酶的简介 | 第7页 |
| ·过氧化氢酶的分类、性质和结构 | 第7-8页 |
| ·过氧化氢酶的来源 | 第8-9页 |
| ·过氧化氢酶的应用 | 第9页 |
| ·过氧化氢酶的研究进展 | 第9-12页 |
| ·微生物过氧化氢酶的发酵 | 第9-10页 |
| ·基因工程菌发酵产过氧化氢酶的研究 | 第10-11页 |
| ·过氧化氢酶的性质研究 | 第11-12页 |
| ·芽孢杆菌表达系统 | 第12页 |
| ·立题依据及其意义 | 第12-13页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第15页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第15页 |
| ·试剂 | 第15页 |
| ·仪器 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·操作方法 | 第16-21页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第16页 |
| ·目的基因突变位点的选择 | 第16页 |
| ·突变质粒的构建与转化 | 第16-18页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态制备及转化 | 第18页 |
| ·重组菌培养及过氧化氢酶表达 | 第18页 |
| ·突变体过氧化氢酶的纯化 | 第18-19页 |
| ·过氧化氢酶活性检测 | 第19页 |
| ·SDS-PAGE 检测 | 第19页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第19页 |
| ·突变体酶的最适反应温度及热稳定性检测 | 第19页 |
| ·突变体酶的最适反应 pH 及 pH 稳定性检测 | 第19-20页 |
| ·突变体酶的动力学分析 | 第20页 |
| ·过氧化氢酶的晶体结构模拟 | 第20-21页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第21-40页 |
| ·K114 定点突变提高过氧化氢酶热稳定性及催化效率 | 第21-27页 |
| ·突变质粒的构建与转化 | 第21页 |
| ·突变体的表达 | 第21-23页 |
| ·突变体的纯化 | 第23页 |
| ·突变体的热稳定性和最适反应温度 | 第23-24页 |
| ·突变体的 pH 稳定性和最适反应 pH | 第24-26页 |
| ·突变体的酶学参数分析 | 第26页 |
| ·突变体的结构分析 | 第26-27页 |
| ·G193 和 D123 定点突变对过氧化氢酶热稳定性及催化效率的影响 | 第27-33页 |
| ·突变质粒的构建与转化 | 第27-28页 |
| ·突变体的表达 | 第28页 |
| ·突变体的纯化 | 第28-29页 |
| ·突变体的热稳定性和最适反应温度 | 第29-30页 |
| ·突变体的 pH 稳定性和最适反应 pH | 第30-32页 |
| ·突变体的酶学参数分析 | 第32页 |
| ·突变体的结构分析 | 第32-33页 |
| ·突变体在枯草芽孢杆菌 WSHZD-01 中的表达 | 第33-40页 |
| ·突变体在枯草芽孢杆菌 WB600 中的表达 | 第33-35页 |
| ·突变体在枯草芽孢杆菌 WSHZD-01 中的表达 | 第35-36页 |
| ·突变体粗酶液热稳定性的检测 | 第36页 |
| ·突变体在枯草芽孢杆菌 WSHZD-01 的发酵优化 | 第36-39页 |
| ·突变体在枯草芽孢杆菌 WSHZD-01 中的 3 L 罐验证 | 第39-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 主要结论 | 第40-41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
