β-甘露糖苷酶产生菌株的分离鉴定、产酶条件优化及其酶学性质研究
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·β-甘露糖苷酶概述 | 第10-16页 |
| ·糖苷酶 | 第10-11页 |
| ·β-甘露糖苷酶 | 第11-16页 |
| ·β-甘露糖苷酶的结构 | 第13-14页 |
| ·β-甘露糖苷酶的生理功能 | 第14-15页 |
| ·β-甘露糖苷酶的转糖基作用 | 第15-16页 |
| ·β-甘露糖苷酶的主要来源 | 第16-17页 |
| ·植物来源 | 第16页 |
| ·动物来源 | 第16页 |
| ·微生物来源 | 第16-17页 |
| ·β-甘露糖苷酶的应用 | 第17-20页 |
| ·植物中的应用 | 第17页 |
| ·细胞糖蛋白加工中的应用 | 第17-18页 |
| ·石油开发中的应用 | 第18-19页 |
| ·食品加工中的应用 | 第19页 |
| ·制药业中的应用 | 第19-20页 |
| ·β-甘露糖苷酶的研究现状 | 第20-21页 |
| ·菌株的筛选 | 第20页 |
| ·β-甘露糖苷酶酶活力的测定 | 第20-21页 |
| ·发酵条件的优化 | 第21页 |
| ·β-甘露糖苷酶的酶学性质 | 第21页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·供试土样 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·药品与试刺 | 第23页 |
| ·常用试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-34页 |
| ·原始菌株的筛选 | 第25-26页 |
| ·富集培养 | 第25页 |
| ·初筛 | 第25页 |
| ·复筛 | 第25-26页 |
| ·菌株的形态学及生理生化鉴定 | 第26-27页 |
| ·菌株的分子生物学鉴定 | 第27-30页 |
| ·菌株的活化 | 第27页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·DNA质量检测 | 第27-28页 |
| ·细菌16S rDNA的扩增与检测 | 第28页 |
| ·16SrDNA的回收与纯化 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞制备 | 第29页 |
| ·目的片段与载体的迎接 | 第29页 |
| ·转化DH5α感受态细胞 | 第29页 |
| ·菌落PCR检测 | 第29-30页 |
| ·测序及细菌16SrDNA系统发育树构建 | 第30页 |
| ·产酶条件的优化 | 第30-32页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第31页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第31页 |
| ·碳氮比对产酶的影响 | 第31页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第31页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第31页 |
| ·培养基初始pH对产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·金属离子对产酶的影响培养时间对产酶的影响 | 第32页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第32页 |
| ·正交实验确定最适发酵产酶培养基的组成 | 第32页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第32页 |
| ·β-甘露糖苷酶的性质研究 | 第32-34页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第32-33页 |
| ·酶的热稳定性 | 第33页 |
| ·pH对酶的影响 | 第33页 |
| ·酶的pH稳定性 | 第33页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-59页 |
| ·菌株的筛选 | 第34-36页 |
| ·β-甘露糖苷酶产生菌株的初筛 | 第34-35页 |
| ·β-甘露糖苷酶产生菌株的复筛 | 第35-36页 |
| ·对硝基苯酚标准曲线 | 第35页 |
| ·筛选结果 | 第35-36页 |
| ·菌株的鉴定 | 第36-40页 |
| ·形态学及生理生化鉴定 | 第36-37页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第37-40页 |
| ·菌株产酶条件的优化 | 第40-53页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第40-42页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第42-44页 |
| ·碳氮比对产酶的影响 | 第44-45页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第45-46页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第46-47页 |
| ·培养基初始pH对产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第49-50页 |
| ·正交实验确定最适发酵产酶培养基的组成 | 第50-53页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第53页 |
| ·β-甘露糖苷酶的性质研究 | 第53-59页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第53-54页 |
| ·酶的热稳定性 | 第54-55页 |
| ·pH对酶的影响 | 第55-56页 |
| ·酶的pH稳定性 | 第56-58页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第58-59页 |
| 4 讨论与结论 | 第59-63页 |
| ·产β-甘露糖苷酶菌株的筛选及鉴定 | 第59-60页 |
| ·β-甘露糖苷酶发酵条件的优化 | 第60-61页 |
| ·β-甘露糖苷酶的酶学性质 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
