摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 TIFY蛋白家族研究进展 | 第11-17页 |
·TIFY蛋白简述 | 第11页 |
·TIFY蛋白的分类 | 第11-12页 |
·PPD蛋白家族 | 第12页 |
·ZML蛋白家族 | 第12页 |
·JAZ蛋白家族 | 第12-17页 |
·JAZ蛋白家族的发现 | 第12-13页 |
·JAZ蛋白的结构 | 第13-14页 |
·JAZ蛋白的功能 | 第14-15页 |
·JAZ互作蛋白的研究 | 第15-17页 |
·TIFY蛋白在植物逆境中的作用 | 第17页 |
2 植物逆境分子生物学进展 | 第17-20页 |
·DREB1/CBF和DREB2类转录因子 | 第17-18页 |
·AREB/ABF类基因 | 第18页 |
·NAC类转录因子 | 第18页 |
·MYB/MYC类基因 | 第18-19页 |
·植物逆境信号途径 | 第19-20页 |
3 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 水稻OsTIFY10b的克隆及表达分析 | 第21-34页 |
1 材料与方法 | 第21-30页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌株和质粒 | 第21页 |
·主要培养基 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器设备 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-30页 |
·水稻日本晴的处理 | 第22-23页 |
·RNA提取与纯化 | 第23-25页 |
·RNA的反转录 | 第25页 |
·OsTIFY10b的克隆 | 第25-29页 |
·表达分析 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-33页 |
·OsTIFY10b的克隆 | 第30页 |
·OsTIFY10b的序列分析 | 第30-31页 |
·OsTIFY10b核酸序列分析 | 第30-31页 |
·OsTIFY10b氨基酸序列分析 | 第31页 |
·OsTIFY10b的表达分析 | 第31-33页 |
·基于在线数据的OsTIFY10b在不同时期水稻器官表达分析 | 第31-32页 |
·在不同逆境下的表达 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
第三章 转基因载体的构建、转化及分析 | 第34-53页 |
1 材料与方法 | 第34-46页 |
·实验材料 | 第34-36页 |
·植物材料 | 第34页 |
·菌株和质粒 | 第34-35页 |
·主要培养基 | 第35-36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·主要仪器设备 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-46页 |
·pCAMBIA 1301-OsTIFY10b超表达载体及反义载体的构建 | 第36-39页 |
·pCAMBIA1301::OsTIFY10b-GFP载体的构建 | 第39-42页 |
·载体转入农杆菌 | 第42-43页 |
·转基因水稻的获得 | 第43-44页 |
·转基因水稻的阳性检测 | 第44-45页 |
·转基因后代的耐盐性初步检测 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-51页 |
·pCAMBIA1301::OsTIFY10b超表达和反向抑制载体的构建 | 第46-47页 |
·pCAMBIA1301::OsTIFY10b-GFP载体的构建 | 第47页 |
·转基因植株的获得 | 第47-48页 |
·转基因水稻的检测 | 第48-50页 |
·转基因植株的快速检测 | 第48-49页 |
·转基因水稻的PCR鉴定 | 第49-50页 |
·转基因T1代种子的潮霉素发芽检测 | 第50页 |
·T2代转基因植株种子耐盐发芽实验 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
第四章 互作蛋白的筛选与融合蛋白的表达、纯化 | 第53-68页 |
1 材料与方法 | 第53-62页 |
·实验材料 | 第53-56页 |
·菌株与质粒 | 第53-55页 |
·cDNA文库 | 第55页 |
·主要培养基 | 第55页 |
·主要试剂 | 第55页 |
·主要仪器 | 第55-56页 |
·实验方法 | 第56-62页 |
·BD载体的构建 | 第56页 |
·酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第56-59页 |
·融合表达载体的构建 | 第59-60页 |
·表达菌株的转化 | 第60页 |
·融合蛋白诱导表达 | 第60-61页 |
·SDS-PAGE分析 | 第61页 |
·融合蛋白的纯化 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-66页 |
·pGBKT7::OsTIFY10b质粒的构建 | 第62页 |
·BD融合蛋白的自转录活性检测与毒性检测 | 第62-63页 |
·酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第63-65页 |
·融合蛋白载体的构建 | 第65页 |
·融合蛋白的表达与纯化 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
第五章 综合结论与讨论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
致谢 | 第76页 |