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水稻逆境应答基因OsTIFY10b的克隆与分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-21页
 1 TIFY蛋白家族研究进展第11-17页
   ·TIFY蛋白简述第11页
   ·TIFY蛋白的分类第11-12页
   ·PPD蛋白家族第12页
   ·ZML蛋白家族第12页
   ·JAZ蛋白家族第12-17页
     ·JAZ蛋白家族的发现第12-13页
     ·JAZ蛋白的结构第13-14页
     ·JAZ蛋白的功能第14-15页
     ·JAZ互作蛋白的研究第15-17页
   ·TIFY蛋白在植物逆境中的作用第17页
 2 植物逆境分子生物学进展第17-20页
   ·DREB1/CBF和DREB2类转录因子第17-18页
   ·AREB/ABF类基因第18页
   ·NAC类转录因子第18页
   ·MYB/MYC类基因第18-19页
   ·植物逆境信号途径第19-20页
 3 本研究的目的与意义第20-21页
第二章 水稻OsTIFY10b的克隆及表达分析第21-34页
 1 材料与方法第21-30页
   ·实验材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·菌株和质粒第21页
     ·主要培养基第21-22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要仪器设备第22页
   ·实验方法第22-30页
     ·水稻日本晴的处理第22-23页
     ·RNA提取与纯化第23-25页
     ·RNA的反转录第25页
     ·OsTIFY10b的克隆第25-29页
     ·表达分析第29-30页
 2 结果与分析第30-33页
   ·OsTIFY10b的克隆第30页
   ·OsTIFY10b的序列分析第30-31页
     ·OsTIFY10b核酸序列分析第30-31页
     ·OsTIFY10b氨基酸序列分析第31页
   ·OsTIFY10b的表达分析第31-33页
     ·基于在线数据的OsTIFY10b在不同时期水稻器官表达分析第31-32页
     ·在不同逆境下的表达第32-33页
 3 讨论第33-34页
第三章 转基因载体的构建、转化及分析第34-53页
 1 材料与方法第34-46页
   ·实验材料第34-36页
     ·植物材料第34页
     ·菌株和质粒第34-35页
     ·主要培养基第35-36页
     ·主要试剂第36页
     ·主要仪器设备第36页
   ·实验方法第36-46页
     ·pCAMBIA 1301-OsTIFY10b超表达载体及反义载体的构建第36-39页
     ·pCAMBIA1301::OsTIFY10b-GFP载体的构建第39-42页
     ·载体转入农杆菌第42-43页
     ·转基因水稻的获得第43-44页
     ·转基因水稻的阳性检测第44-45页
     ·转基因后代的耐盐性初步检测第45-46页
 2 结果与分析第46-51页
   ·pCAMBIA1301::OsTIFY10b超表达和反向抑制载体的构建第46-47页
   ·pCAMBIA1301::OsTIFY10b-GFP载体的构建第47页
   ·转基因植株的获得第47-48页
   ·转基因水稻的检测第48-50页
     ·转基因植株的快速检测第48-49页
     ·转基因水稻的PCR鉴定第49-50页
     ·转基因T1代种子的潮霉素发芽检测第50页
   ·T2代转基因植株种子耐盐发芽实验第50-51页
 3 讨论第51-53页
第四章 互作蛋白的筛选与融合蛋白的表达、纯化第53-68页
 1 材料与方法第53-62页
   ·实验材料第53-56页
     ·菌株与质粒第53-55页
     ·cDNA文库第55页
     ·主要培养基第55页
     ·主要试剂第55页
     ·主要仪器第55-56页
   ·实验方法第56-62页
     ·BD载体的构建第56页
     ·酵母双杂交筛选互作蛋白第56-59页
     ·融合表达载体的构建第59-60页
     ·表达菌株的转化第60页
     ·融合蛋白诱导表达第60-61页
     ·SDS-PAGE分析第61页
     ·融合蛋白的纯化第61-62页
 2 结果与分析第62-66页
   ·pGBKT7::OsTIFY10b质粒的构建第62页
   ·BD融合蛋白的自转录活性检测与毒性检测第62-63页
   ·酵母双杂交筛选互作蛋白第63-65页
   ·融合蛋白载体的构建第65页
   ·融合蛋白的表达与纯化第65-66页
 3 讨论第66-68页
第五章 综合结论与讨论第68-70页
参考文献第70-76页
致谢第76页

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