中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 α-半乳糖苷酶研究进展 | 第11-16页 |
·α-半乳糖苷酶催化特性概述 | 第11-12页 |
·α-半乳糖苷酶来源于分类 | 第12-13页 |
·α-半乳糖苷酶分子特性概述 | 第13-16页 |
2 α-半乳糖苷酶的应用 | 第16-19页 |
·α-半乳糖苷酶与饲料工业 | 第16-17页 |
·α-半乳糖苷酶与医疗工业 | 第17-19页 |
·α-半乳糖苷酶与制糖工业 | 第19页 |
3 研究的目的及意义 | 第19-20页 |
4 本研究技术路线图 | 第20-21页 |
第二章 产α-半乳糖苷酶细菌的筛选与鉴定 | 第21-32页 |
1 材料与试剂 | 第21页 |
·材料 | 第21页 |
·菌株及质粒 | 第21页 |
·试剂及试剂盒 | 第21页 |
·培养基 | 第21页 |
2 方法 | 第21-26页 |
·菌株的筛选 | 第21-22页 |
·菌株鉴定 | 第22-26页 |
3 结果与分析 | 第26-30页 |
·产α-半乳糖苷酶菌株的筛选与显微观察 | 第26-27页 |
·菌株基于16S rDNA的分子鉴定 | 第27-30页 |
4 关于细菌分类方法的讨论 | 第30-32页 |
第三章 产α-半乳糖苷酶细菌的酶学特性分析 | 第32-40页 |
1 材料与试剂 | 第32页 |
·菌株 | 第32页 |
·试剂与仪器 | 第32页 |
·培养基 | 第32页 |
2 方法 | 第32-35页 |
·酶活的测定 | 第33-34页 |
·不同温度和pH对α-半乳糖苷酶活性的影响 | 第34页 |
·细菌酶基因的表达调控分析 | 第34页 |
·不同浓度棉籽糖诱导下酶基因表达的SDS一PAGE检测分析 | 第34页 |
·不同浓度的葡萄糖、棉籽糖对菌株产a一半乳糖普酶的影响 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-38页 |
·对硝基酚标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
·温度和pH对酶活性的影响 | 第36-37页 |
·不同浓度棉籽糖诱导下酶与底物作用显色反应分析 | 第37页 |
·不同浓度的棉籽糖诱导对菌株产酶基因表达的SDS-PAGE检测 | 第37-38页 |
·不同浓度的棉籽糖、葡萄糖对菌株分泌α-半乳糖苷酶影响 | 第38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
第四章 乳球菌α-半乳糖苷酶基因的克隆与分析 | 第40-57页 |
1 材料与试剂 | 第40-41页 |
·菌株及质粒 | 第40页 |
·工具酶与试剂 | 第40页 |
·主要仪器设备 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
·乳球菌基因组DNA的大量提取 | 第41页 |
·目的片段的制备 | 第41页 |
·pUC19载体的制备 | 第41-42页 |
·目的片段与载体最佳连接比例的确定 | 第42-43页 |
·连接产物的转化 | 第43-44页 |
·阳性克隆的筛选 | 第44页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第44页 |
·α-半乳糖苷酶基因的生物信息学分析 | 第44页 |
3 结果与分析 | 第44-55页 |
·细菌基因组DNA不完全酶切条件的确定 | 第44-45页 |
·载体的制备 | 第45-46页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第46-47页 |
·阳性克隆生物信息学分析 | 第47-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
第五章 总结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71页 |