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一株产α-半乳粮苷酶细菌的筛选、鉴定及酶基因克隆分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-21页
 1 α-半乳糖苷酶研究进展第11-16页
   ·α-半乳糖苷酶催化特性概述第11-12页
   ·α-半乳糖苷酶来源于分类第12-13页
   ·α-半乳糖苷酶分子特性概述第13-16页
 2 α-半乳糖苷酶的应用第16-19页
   ·α-半乳糖苷酶与饲料工业第16-17页
   ·α-半乳糖苷酶与医疗工业第17-19页
   ·α-半乳糖苷酶与制糖工业第19页
 3 研究的目的及意义第19-20页
 4 本研究技术路线图第20-21页
第二章 产α-半乳糖苷酶细菌的筛选与鉴定第21-32页
 1 材料与试剂第21页
   ·材料第21页
   ·菌株及质粒第21页
   ·试剂及试剂盒第21页
   ·培养基第21页
 2 方法第21-26页
   ·菌株的筛选第21-22页
   ·菌株鉴定第22-26页
 3 结果与分析第26-30页
   ·产α-半乳糖苷酶菌株的筛选与显微观察第26-27页
   ·菌株基于16S rDNA的分子鉴定第27-30页
 4 关于细菌分类方法的讨论第30-32页
第三章 产α-半乳糖苷酶细菌的酶学特性分析第32-40页
 1 材料与试剂第32页
   ·菌株第32页
   ·试剂与仪器第32页
   ·培养基第32页
 2 方法第32-35页
   ·酶活的测定第33-34页
   ·不同温度和pH对α-半乳糖苷酶活性的影响第34页
   ·细菌酶基因的表达调控分析第34页
   ·不同浓度棉籽糖诱导下酶基因表达的SDS一PAGE检测分析第34页
   ·不同浓度的葡萄糖、棉籽糖对菌株产a一半乳糖普酶的影响第34-35页
 3 结果与分析第35-38页
   ·对硝基酚标准曲线的绘制第35-36页
   ·温度和pH对酶活性的影响第36-37页
   ·不同浓度棉籽糖诱导下酶与底物作用显色反应分析第37页
   ·不同浓度的棉籽糖诱导对菌株产酶基因表达的SDS-PAGE检测第37-38页
   ·不同浓度的棉籽糖、葡萄糖对菌株分泌α-半乳糖苷酶影响第38页
 4 讨论第38-40页
第四章 乳球菌α-半乳糖苷酶基因的克隆与分析第40-57页
 1 材料与试剂第40-41页
   ·菌株及质粒第40页
   ·工具酶与试剂第40页
   ·主要仪器设备第40-41页
 2 方法第41-44页
   ·乳球菌基因组DNA的大量提取第41页
   ·目的片段的制备第41页
   ·pUC19载体的制备第41-42页
   ·目的片段与载体最佳连接比例的确定第42-43页
   ·连接产物的转化第43-44页
   ·阳性克隆的筛选第44页
   ·阳性克隆的鉴定第44页
   ·α-半乳糖苷酶基因的生物信息学分析第44页
 3 结果与分析第44-55页
   ·细菌基因组DNA不完全酶切条件的确定第44-45页
   ·载体的制备第45-46页
   ·阳性克隆的筛选与鉴定第46-47页
   ·阳性克隆生物信息学分析第47-55页
 4 讨论第55-57页
第五章 总结第57-58页
参考文献第58-64页
附录第64-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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