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产酶溶杆菌OH11菌株胞外酶调控相关基因ctp的克隆及功能分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
上篇 文献综述第10-30页
 第一章 植物病害生物防治研究进展第12-22页
  1 植物病害生物防治研究概况第12-14页
  2 生防细菌在植物病害防治中的应用第14-16页
  3 酶在植物病害生物防治中的作用第16-22页
 第二章 生防细菌产酶溶杆菌的研究进展第22-30页
  1 分类地位第22-23页
  2 形态学及生物学特征第23页
  3 产酶溶杆菌(L.enzymogenes)在植物病害生物防治中的应用第23-24页
  4 产酶溶杆菌(L.enzymogenes)的生防机理第24-30页
   ·胞外酶第24-26页
   ·胞外酶调控机制第26-27页
   ·次生代谢第27-29页
   ·生物表面活性剂第29页
   ·诱导抗性第29-30页
下篇 研究内容第30-80页
 第一章 产酶溶杆菌OH11突变体文库的构建及四种胞外酶缺失突变株的筛选第32-52页
  1. 试验材料第34-37页
   ·供试菌株、质粒第34页
   ·引物第34-35页
   ·培养基、抗生素配制第35-37页
  2. 试验方法第37-45页
   ·细菌基因组DNA的提取第37-38页
   ·质粒提取第38-39页
   ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算第39-40页
   ·PCR产物回收"TA"克隆第40页
   ·大肠杆菌感受态的制备和转化第40-42页
   ·L.enzymogenes OH11转座子插入文库的构建及验证第42-43页
   ·四种胞外酶缺失的L.enzymogenes OH11突变株的筛选及16S rDNA测序分析第43-44页
   ·L.enzymogenes OH11四种胞外酶缺失突变株中转座子插入位点鉴定第44-45页
  3 结果分析第45-50页
   ·L.enzymogenes OH11转座子插入文库的构建及验证第45-46页
   ·四种胞外酶产量减少的L.enzymogenes OH11突变株的筛选及鉴定第46-48页
   ·克隆鉴定突变株D-11中mariner转座子的插入位点第48-50页
  4 讨论第50-52页
 第二章 ctp基因的敲除及突变体特性的初步研究第52-80页
  1 试验材料第53-56页
   ·试验菌株、质粒和培养条件第53-55页
   ·引物第55页
   ·培养基配制第55-56页
  2 试验方法第56-64页
   ·L.enzymogenes OH11中ctp基因的定向敲除及验证第56-59页
   ·ctp互补菌株的构建及验证第59-61页
   ·胞外酶测定第61-62页
   ·生长曲线测定第62页
   ·生物膜测定第62-63页
   ·菌落形态观察第63页
   ·胞外多糖(EPS)的检测第63页
   ·病原真菌和卵菌的平板拮抗活性测定第63-64页
  3 结果分析第64-76页
   ·L.enzymogenes OH11的ctp突变体的构建及验证第64-67页
   ·ctp互补菌株的构建及验证第67-70页
   ·ctp基因的突变影响OH11三种胞外酶的产生第70-72页
   ·ctp基因的突变不影响OH11的正常生长第72-73页
   ·ctp基因的突变降低了OH11生物膜的形成第73-74页
   ·ctp基因的突变改变了OH11的菌落形态第74页
   ·ctp基因的突变不影响胞外多糖产生第74-75页
   ·ctp基因的突变不改变OH11对病原真菌河卵菌的拮抗活性第75-76页
  4 讨论第76-80页
参考文献第80-90页
致谢第90页

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