摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
上篇 文献综述 | 第10-30页 |
第一章 植物病害生物防治研究进展 | 第12-22页 |
1 植物病害生物防治研究概况 | 第12-14页 |
2 生防细菌在植物病害防治中的应用 | 第14-16页 |
3 酶在植物病害生物防治中的作用 | 第16-22页 |
第二章 生防细菌产酶溶杆菌的研究进展 | 第22-30页 |
1 分类地位 | 第22-23页 |
2 形态学及生物学特征 | 第23页 |
3 产酶溶杆菌(L.enzymogenes)在植物病害生物防治中的应用 | 第23-24页 |
4 产酶溶杆菌(L.enzymogenes)的生防机理 | 第24-30页 |
·胞外酶 | 第24-26页 |
·胞外酶调控机制 | 第26-27页 |
·次生代谢 | 第27-29页 |
·生物表面活性剂 | 第29页 |
·诱导抗性 | 第29-30页 |
下篇 研究内容 | 第30-80页 |
第一章 产酶溶杆菌OH11突变体文库的构建及四种胞外酶缺失突变株的筛选 | 第32-52页 |
1. 试验材料 | 第34-37页 |
·供试菌株、质粒 | 第34页 |
·引物 | 第34-35页 |
·培养基、抗生素配制 | 第35-37页 |
2. 试验方法 | 第37-45页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第37-38页 |
·质粒提取 | 第38-39页 |
·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第39-40页 |
·PCR产物回收"TA"克隆 | 第40页 |
·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第40-42页 |
·L.enzymogenes OH11转座子插入文库的构建及验证 | 第42-43页 |
·四种胞外酶缺失的L.enzymogenes OH11突变株的筛选及16S rDNA测序分析 | 第43-44页 |
·L.enzymogenes OH11四种胞外酶缺失突变株中转座子插入位点鉴定 | 第44-45页 |
3 结果分析 | 第45-50页 |
·L.enzymogenes OH11转座子插入文库的构建及验证 | 第45-46页 |
·四种胞外酶产量减少的L.enzymogenes OH11突变株的筛选及鉴定 | 第46-48页 |
·克隆鉴定突变株D-11中mariner转座子的插入位点 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
第二章 ctp基因的敲除及突变体特性的初步研究 | 第52-80页 |
1 试验材料 | 第53-56页 |
·试验菌株、质粒和培养条件 | 第53-55页 |
·引物 | 第55页 |
·培养基配制 | 第55-56页 |
2 试验方法 | 第56-64页 |
·L.enzymogenes OH11中ctp基因的定向敲除及验证 | 第56-59页 |
·ctp互补菌株的构建及验证 | 第59-61页 |
·胞外酶测定 | 第61-62页 |
·生长曲线测定 | 第62页 |
·生物膜测定 | 第62-63页 |
·菌落形态观察 | 第63页 |
·胞外多糖(EPS)的检测 | 第63页 |
·病原真菌和卵菌的平板拮抗活性测定 | 第63-64页 |
3 结果分析 | 第64-76页 |
·L.enzymogenes OH11的ctp突变体的构建及验证 | 第64-67页 |
·ctp互补菌株的构建及验证 | 第67-70页 |
·ctp基因的突变影响OH11三种胞外酶的产生 | 第70-72页 |
·ctp基因的突变不影响OH11的正常生长 | 第72-73页 |
·ctp基因的突变降低了OH11生物膜的形成 | 第73-74页 |
·ctp基因的突变改变了OH11的菌落形态 | 第74页 |
·ctp基因的突变不影响胞外多糖产生 | 第74-75页 |
·ctp基因的突变不改变OH11对病原真菌河卵菌的拮抗活性 | 第75-76页 |
4 讨论 | 第76-80页 |
参考文献 | 第80-90页 |
致谢 | 第90页 |