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副溶血弧菌细胞膜脂肪酸组成的气相色谱研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
0 前言第16-34页
    0.1 副溶血弧菌的简介第16-19页
        0.1.1 副溶血弧菌的生理特性第16-17页
        0.1.2 副溶血弧菌的致病性第17页
        0.1.3 副溶血弧菌的致病因子第17-19页
            0.1.3.1 溶血毒素第18-19页
            0.1.3.2 尿素酶第19页
            0.1.3.3 其他致病因子(黏附因子、侵袭力和蛋白酶)第19页
    0.2 副溶血弧菌的检测技术第19-24页
        0.2.1 传统培养方法第20-21页
            0.2.1.1 国家标准检测方法第20页
            0.2.1.2 最大可能数法(MPN)第20页
            0.2.1.3 神奈川溶血试验(KP试验)第20-21页
        0.2.2 分子生物学方法第21-23页
            0.2.2.1 基因探针检测第21页
            0.2.2.2 PCR技术第21-23页
            0.2.2.3 基因芯片第23页
        0.2.3 免疫学检测技术第23-24页
            0.2.3.1 酶联免疫吸附法(ELISA)第23-24页
            0.2.3.2 免疫荧光抗体技术第24页
            0.2.3.3 免疫胶体金技术第24页
    0.3 脂肪酸甲酯(FAME)谱图分析方法第24-28页
        0.3.1 原理第24-25页
        0.3.2 方法第25页
        0.3.3 应用第25-28页
            0.3.3.1 FAME图谱分析方法在微生物鉴定中的应用第25-26页
            0.3.3.2 FAME图谱分析方法在微生物多样性分析中的应用第26-27页
            0.3.3.3 脂肪酸标记在海洋食物网研究中的应用第27-28页
    0.4 指纹图谱分析的方法第28-31页
        0.4.1 指纹图谱的概述第28页
        0.4.2 指纹图谱数据处理方法第28-31页
            0.4.2.1 直接分析比较法第28页
            0.4.2.2 量化数据比较法第28-29页
            0.4.2.3 化学模式识别法第29-31页
    0.5 立题背景、意义及本课题研究内容第31-34页
        0.5.1 立题背景、意义第31-32页
        0.5.2 本课题研究内容第32-34页
1 菌种的筛选、分离和鉴定第34-40页
    引言第34页
    1.1 实验材料第34-35页
        1.1.1 实验菌种和培养基第34-35页
        1.1.2 主要试剂第35页
        1.1.3 主要仪器第35页
    1.2 实验方法第35-37页
        1.2.1 TCBS培养基的平板筛选第35页
        1.2.2 2216E培养基的平板分离、纯化及保藏第35页
        1.2.3 菌株的PCR扩增第35-37页
            1.2.3.1 菌株的液体培养第35-36页
            1.2.3.2 DNA的提取第36页
            1.2.3.3 PCR反应体系和扩增参数第36页
            1.2.3.4 PCR扩增产物的序列分析第36-37页
    1.3 结果与讨论第37-39页
        1.3.1 海水筛选菌株结果第37页
        1.3.2 PCR扩增产物的检测第37页
        1.3.3 序列分析和进化树的构建第37-39页
    1.4 本章小结第39-40页
2 脂肪酸衍生化条件的研究第40-51页
    引言第40页
    2.1 实验材料第40-41页
        2.1.1 实验菌种和培养基第40页
        2.1.2 主要试剂第40-41页
        2.1.3 主要仪器第41页
    2.2 实验方法第41-43页
        2.2.1 菌株的平板活化第41页
        2.2.2 种子液的制备第41页
        2.2.3 菌株的液体培养第41页
        2.2.4 菌体的离心收集和干燥第41-42页
        2.2.5 脂肪酸衍生化条件第42页
        2.2.6 气相色谱和质谱条件第42-43页
        2.2.7 结果分析第43页
    2.3 结果与讨论第43-50页
        2.3.1 V.parahaemolyticus VP-X-3脂肪酸组成的气相色谱和质谱分析第43-45页
        2.3.2 脂肪酸衍生化条件对色谱峰数量的影响第45页
        2.3.3 脂肪酸衍生化条件对色谱峰高的影响第45-48页
        2.3.4 脂肪酸衍生化条件对脂肪酸百分含量的影响第48-50页
    2.4 本章小结第50-51页
3 不同环境条件下副溶血弧菌脂肪酸组成的研究第51-64页
    引言第51页
    3.1 实验材料第51-52页
        3.1.1 实验菌种和培养基第51页
        3.1.2 主要试剂第51-52页
        3.1.3 主要仪器第52页
    3.2 实验方法第52-54页
        3.2.1 菌株的平板活化第52页
        3.2.2 种子液的制备第52页
        3.2.3 不同环境因素对 V. parahaemolyticus 脂肪酸组成的影响第52-53页
            3.2.3.1 生长温度的影响第52页
            3.2.3.2 培养基pH的影响第52-53页
            3.2.3.3 培养时间的影响第53页
            3.2.3.4 4°C低温环境的影响第53页
        3.2.4 脂肪酸的皂化和甲酯化第53页
        3.2.5 气相色谱条件第53-54页
    3.3 结果与讨论第54-63页
        3.3.1 生长温度对 V.parahaemolyticus 脂肪酸组成的影响第54-56页
        3.3.2 培养基pH对 V.parahaemolyticus 脂肪酸组成的影响第56-58页
        3.3.3 培养时间对 V.parahaemolyticus 脂肪酸组成的影响第58-60页
        3.3.4 4℃低温环境对 V.parahaemolyticus 的影响第60-63页
            3.3.4.1 活菌平板计数第60-61页
            3.3.4.2 4℃低温对脂肪酸组成的影响第61-63页
    3.5 本章小结第63-64页
4 副溶血弧菌脂肪酸指纹图谱的建立第64-78页
    引言第64页
    4.1 实验材料第64-65页
        4.1.1 实验菌种和培养基第64-65页
        4.1.2 实验试剂第65页
        4.1.3 主要仪器第65页
    4.2 实验方法第65-67页
        4.2.1 菌株的平板活化第65页
        4.2.2 种子液的制备第65-66页
        4.2.3 菌株的液体培养第66页
        4.2.4 菌体的收集和干燥第66页
        4.2.5 脂肪酸的皂化和甲酯化第66页
        4.2.6 气相色谱条件第66页
        4.2.7 标准指纹图谱的建立第66-67页
            4.2.7.1 副溶血弧菌指纹图谱信息的采集第66页
            4.2.7.2 副溶血弧菌脂肪酸指纹图谱相似度的分析第66-67页
            4.2.7.3 主成分分析第67页
    4.3 结果与讨论第67-76页
        4.3.1 V.parahaemolyticus指纹图谱信息的采集及与其他细菌指纹图谱的比较第67-73页
            4.3.1.1 副溶血弧菌指纹图谱信息的采集第67-70页
            4.3.1.2 副溶血弧菌与不同种属海洋细菌脂肪酸组成上的差异比较第70-73页
        4.3.2 相似度的计算第73-75页
        4.3.3 主成分分析第75-76页
    4.4 本章小结第76-78页
        4.4.1 15株海洋细菌脂肪酸组成的分析第76页
        4.4.2 相似度的分析第76-77页
        4.4.3 主成分分析第77-78页
结论第78-82页
参考文献第82-91页
展望第91页
创新点第91-92页
致谢第92-93页
个人简历第93-94页
硕士期间发表的学术论文第94-95页

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